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| 1 | 制备、纯化和鉴定生物活性肽的研究进展及应用显示文摘近年来,分离纯化以及鉴定技术的发展加速了生物活性肽的研究进程。生物活性肽被定义为具有生物活性,诸如抗氧化、降血压、抗血栓、减脂、抑菌和抗炎症功效等的,由2-20个氨基酸组成的特定肽类的总称。低毒和高特异性的特点使生物活性肽在食品和医药行业有着独特应用价值。文中重点综述了生物活性肽的制备,特别是微生物发酵和酶水解,并分析了各种技术手段的联用和辅助手段的运用。为了确定表征生物活性肽的主要方法,对分离、纯化和鉴定的方法进行了总结。最后,还对商业化应用中面临的挑战进行了分析。 | 刘铭 刘玉环 王允圃 阮榕生 樊亮亮 邹慧芳 涂春明 | 2016 | 食品与发酵工业2016，42，4： | 33 |
| 2 | 抗菌肽来源、分类方式、生物学活性、作用机制及应用研究进展显示文摘近年来,抗生素的滥用引发大量耐药菌株产生、抗生素疗效下降等一系列问题,严重威胁着人类和动物的健康。作为抗生素的一类可能替代物,抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)具有广谱抗菌活性,对部分病毒、寄生虫、肿瘤细胞等也具有抑杀作用,且不易产生耐药性,在医学、兽医学和生命科学等研究领域有着良好的应用前景。本文从抗菌肽的来源、分类方式、生物学活性、作用机制和应用研究等几个方面,综合阐述了国内外关于抗菌肽的研究动态。 | 刘秀 郭中坤 王可洲 | 2016 | 中国医药生物技术2016，11，6： | 20 |
| 3 | 抗菌肽壳聚糖复合膜对水果黄瓜的保鲜作用显示文摘为了延长水果黄瓜的货架期,本研究选用两种浓度的抗菌肽(1.00%、1.25%)分别与1.00%的壳聚糖复配成可食性复合膜,室温下对水果黄瓜进行喷淋涂膜处理后,在其表面覆盖一层PE保鲜膜,置于温度25℃、湿度40%~60%的环境下贮藏,每隔2 d测定其感官指标和理化指标(失重率、腐烂率、硬度、维生素C、可滴定酸和叶绿素含量)。结果表明,经21d贮藏后,1.00%的抗菌肽与壳聚糖复合膜处理组的失水率仅4.97%,腐烂率16.67%,硬度由9.53降至6.43,比空白组高42.50%,维生素C含量14.01 mg/100g,仅比贮藏前下降1.40%,果皮叶绿素含量0.63 mg/g,保鲜效果最佳。由此可得,抗菌肽与壳聚糖复合膜处理,能明显延缓黄瓜的腐败、失绿,减少维生素C和可滴定酸的损失,较好地保持黄瓜的硬度。 | 罗雪云 吴晓彤 谢颖思 弓佳卉 梁嘉妍 段星星 陈军丽 袁淼 杜秉健 林碧敏 鲍金勇 曹庸 苗建银 | 2020 | 现代食品科技2020，36，7： | 19 |
| 4 | 化学合成抗菌肽抑制致病性大肠杆菌F41的分子作用机理显示文摘本文以化学合成抗菌肽为研究对象,对合成抗菌肽的抑菌活力、抑菌动力学进行研究;通过圆二色谱法评价抗菌肽二级结构的变化;电镜观察抗菌肽对细菌微观结构影响;K+和紫外吸收物质泄漏实验分析抗菌肽对细胞膜通透性影响;DNA凝胶阻滞实验分析抗菌肽与细菌DNA相互作用关系。结果表明:不同抗菌肽的抗菌活力、抑菌动力学存在差异;抗菌活力与抗菌肽浓度、作用时间有关;抗菌肽Tac、Tac W、Tac V明显改变细胞微观结构,使胞内K+和紫外吸收物质泄漏,细胞膜通透性改变,造成细胞坍塌破裂,进入细胞与DNA结合,产生凝胶阻滞现象。得出结论:抗菌肽作用机理与抗菌肽结构中碱性氨基酸、两亲性氨基酸的比例密切相关,其分子作用机理包括使细胞膜通透性发生变化、改变细菌细胞微观结构、结合基因组DNA,抑制复制、转录等,形成多个作用靶点,是一种多效协同的作用机制。 | 谢海伟 杨贤松 柯春林 许晖 郭勇 | 2016 | 现代食品科技2016，32，1： | 11 |
| 5 | 黄粉虫抗菌肽的分离纯化及生物活性研究显示文摘本研究以黄粉虫为试材,采用碱性蛋白酶酶解黄粉虫蛋白制备获得了抗菌肽,并对其进行分离纯化,比较了不同组分及纯化后抗菌肽的抑菌活性、热稳定性及分子量。结果表明:大孔吸附树脂对蛋白酶酶解液动态吸附并梯度洗脱后得到5个组分,抑菌试验表明无水乙醇洗脱组分的抑菌活性最强。采用制备型HPLC对无水乙醇洗脱组分进一步纯化,得到两个组分(H-1,H-2),其中组分H-2对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均表现出较强的抑菌活性,且其最小抑菌浓度(MIC)为0.512 mg/m L。热稳定性试验表明,H-2具有较好的热稳定性,121℃加热20 min仍能保持较高活性。液质联用(LC-MS)结果表明,H-2的分子量为756.82u。本研究为黄粉虫抗菌肽的高效分离和纯化提供了科学依据,为黄粉虫抗菌肽在食品防腐中的应用提供了基础数据。 | 张建新 孙长江 | 2016 | 现代食品科技2016，32，1： | 9 |
| 6 | 植物抑菌剂抑菌机理的研究方法进展显示文摘综述了植物抑菌剂作用机理研究中常用的几种技术手段,从植物抑菌剂对微生物细胞形态的影响、对细胞壁、细胞膜、能量代谢和遗传物质的作用等不同方面加以介绍。采用SEM、TEM、AFM和CLSM方法观察微生物的形态结构;从细胞膜的通透性、流动性、结构变化和内溶物外流4个方面检测细胞膜的变化;采用呼吸代谢抑制试验、Clark氧电极法和荧光猝灭试验方法研究植物抑菌物质对菌体呼吸代谢的影响;论述光谱分析法、电化学方法、核磁共振法、计算机模拟技术手段对抑菌剂与DNA的相互作用方式的检测与分析。并对植物抑菌剂抑菌机理的分析方法的发展应用进行了展望。 | 李婷 周月 宋丽雅 何聪芬 | 2016 | 北方园艺2016，，4： | 9 |
| 7 | 抗菌肽分离纯化分析研究进展显示文摘抗菌肽与抗生素等传统灭菌剂的作用相似,多数具有强碱性、热稳定性以及广谱抗菌等特点,特别是某些抗菌肽对部分真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有强有力的杀伤作用。抗菌肽的分离纯化分析对于抗菌肽的应用具有重要意义,本文重点对其研究进展进行概述。 | 郭鑫杰 袁凯松 简敬一 包芷君 游嘉怡 王梓涛 胡紫微 李海斌 江正瑾 周海波 | 2017 | 国外医药(抗生素分册)2017，38，6： | 7 |
| 8 | 鹰嘴豆短肽的分步酶解法制备及其营养价值评价显示文摘以鹰嘴豆蛋白为原料,建立复合酶分步酶解法制备鹰嘴豆短肽的工艺。在鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解的基础上,进一步采用中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme继续水解鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase酶解物,并对各影响因素进行研究,建立短肽得率与各影响因素的回归模型,利用高效液相色谱法和氨基酸自动分析仪等测定鹰嘴豆短肽的相对分子质量、氨基酸组成、一般营养成分,评价鹰嘴豆短肽的营养价值。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme制备鹰嘴豆短肽的最佳工艺参数为:复合酶添加量5 678 U/g,pH 7.0,水解时间216 min,水解温度55℃,在此条件下,短肽得率为63.79%,与碱性蛋白酶Alcalase单独酶解相比明显提高,水解度为26.74%;大部分水解产物的相对分子质量低于1 000、脂肪含量低,蛋白质、必需氨基酸等含量丰富,与FAO/WHO推荐的成人需求量模式相比,其第一限制氨基酸是蛋氨酸和半胱氨酸,与学龄儿童需求量模式相比,其第一限制氨基酸是苏氨酸,氨基酸分分别高达138.18和103.25;必需氨基酸与非必需氨基酸比值(EAA/NEAA)为0.73,接近FAO/WHO参考标准值0.6。该研究为进一步开发利用和工业化生产鹰嘴豆短肽奠定了基础。 | 叶健明 石宁蕙 杨群慧 苏丽明 周建中 杨海燕 | 2020 | 保鲜与加工2020，20，1： | 7 |
| 9 | 鲣鱼暗色肉抗菌肽的制备及分离纯化显示文摘为提高鲣鱼暗色肉利用率和附加值,以鲣鱼暗色肉为原料,采用酶解法制备抗菌肽。通过单因素实验,以对大肠杆菌抑菌率为指标,得到优化的酶解条件范围,然后通过响应面法得到最佳酶解工艺条件,并对酶解产物进行分离纯化及最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)测定。结果显示,最佳酶解条件为:料液比1∶5(g∶mL),pH值4.0,加酶量2 000.0 U/g,酶解温度45℃,酶解时间2.5 h,大肠杆菌的抑菌率为(79.56±1.56)%。经分离纯化,获得一组分离峰S-3,对大肠杆菌的MIC值为40μg/mL。说明鲣鱼暗色肉可以通过酶解及分离纯化得到对大肠杆菌具有较好抑菌效果的抗菌肽产品,该研究可以为提高鱼类暗色肉等低值蛋白质的经济附加值提供参考,为鱼类暗色肉的精深加工及高值化利用提供新思路。 | 王焙 张登科 史咏梅 吴迪迪 李勇勇 娄永江 | 2019 | 食品与发酵工业2019，45，19： | 5 |
| 10 | 马鹿鹿茸不同部位差异蛋白质组学分析显示文摘旨在从差异蛋白质组学角度为鹿茸生物学特性的阐明奠定理论基础。本研究以天山马鹿65和75d鹿茸不同部位为试验材料,通过双向凝胶电泳、MALDI-TOF-MS质谱鉴定技术,结合生物信息学分析,成功鉴定出65种差异蛋白质,涉及代谢过程、细胞过程、发育过程、定位以及应激等生物学过程,还参与了血小板活化、黏着斑、代谢通路、PI3K-Akt信号通路等代谢通路。这些蛋白包括骨发育相关蛋白4种、神经发育相关蛋白3种、血管发育相关蛋白2种、抗氧化、内质网应激相关蛋白4种、免疫相关蛋白7种、凋亡相关蛋白5种。结果显示,TTR、RBP4、CRABP1在由65d鹿茸过渡到75d鹿茸的过程中,对鹿茸生长发育起一定调控作用。PRDX2、TXNDC5、ERP29、Pdia6在内质网应激、抗氧化中起重要作用。内质网应激、内质网相关性死亡途径、线粒体凋亡途径可在一定程度上阐明鹿茸细胞快速增殖分化的同时存在大量细胞凋亡现象,以满足快速生长、发育的需要。另外,GMFβ、CATHL1两种蛋白在神经发育和炎症抗性中可能具有重要的作用。 | 王磊 张然然 刘华淼 刘汇涛 周永娜 董世武 邢秀梅 | 2017 | 畜牧兽医学报2017，48，8： | 5 |
| 11 | 短小芽孢杆菌HN-10抗菌肽的分离纯化及其抗粉红单端孢活性显示文摘长期大量使用杀菌剂不但会导致病原微生物产生耐药性,同时也存在着严重的环境和健康风险,因此开发不易产生耐药性的新型抗菌物质非常重要。本实验采用硫酸铵沉淀、AB-8大孔吸附树脂、Sephadex G-100凝胶和半制备型反相高效液相色谱对短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10发酵液进行逐级分离纯化,以粉红单端孢(Trichothecium roseum)为指示菌,测其抑菌活性,并通过基质辅助激光解析串联飞行时间串联质谱对纯化后的活性物质进行氨基酸序列分析。结果表明,经纯化后得到一种抗真菌肽P-1,其氨基酸序列为G-G-S-G-G-G-S-S-G-G-S-I-G-G-R,分子质量为1 149.14 Da。经抑菌实验可知,抗真菌肽P-1在最小抑菌浓度为1μg/mL时可抑制粉红单端孢生长。经ProtParam软件分析得到P-1理论等电点为9.75,带有1个正电荷数。在NCBI数据库和APD数据库检索,与之序列相似性最高的仅为45%,因此判断这是一种新型抗真菌肽。抗真菌肽P-1抑菌效果良好,可为开发新型生防制剂提供理论依据。 | 严海娇 贠建民 白杰 郭娟 邓展瑞 李多佳 | 2018 | 食品科学2018，39，22： | 4 |
| 12 | 抗菌肽快速筛选方法的研究进展显示文摘抗菌肽是一类具有广谱抑菌活性功能的特殊生物活性肽,在医药、食品、农业等领域都有广泛的应用。本文总结了抗菌粗肽预处理方法的适用范围及特点,并重点综述了抗菌肽的快速筛选方法,包括抗菌肽-细菌吸附结合法、细胞膜色谱法、模拟细胞膜色谱法、毛细管电泳法、薄层色谱自显影法和高通量测序法等,为发掘抗菌肽、丰富抗菌肽库提供一定的参考。 | 薛辉 涂勇刚 熊春红 李建科 罗文翔 赵燕 | 2019 | 食品科学2019，40，13： | 4 |
| 13 | 多黏类芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及特性研究显示文摘试验旨在分离纯化多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)BLCC1-0402代谢产物中的抗菌肽,为抗菌肽制备及其制品检测提供参考。采用离心、不同分子质量卷式膜超滤浓缩、Superdex peptide 10/300GL凝胶过滤层析对多黏类芽孢杆菌发酵上清液进行逐级分离纯化,对不同时段的收集液做抑菌试验,以大肠杆菌O78标准菌株为指示菌,采用打孔法进行抑菌活性检测,比较评价分步层析效果,以Tricine-SDS-PAGE进行分子质量检测。结果显示,通过5和3 ku卷式膜超滤获得的3~5 ku组分蛋白质样品抗菌活性较强;对于3~5 ku组分经凝胶过滤层析分离纯化,纯化后的抗菌肽A3抑菌活性最强,经Tricine-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测,已达到电泳纯,分子质量为4 ku;抑菌活性检测结果显示,该抗菌肽A3对大肠杆菌O78标准菌株具有较强的抑菌作用。同时,抗菌肽A3表现出较好的耐热性,90~100℃处理15 min,抑菌活性可保持在96%左右;具有较好的酸碱稳定性,在pH 2.0~9.0下,抑菌活性保持在90%以上;经胃蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低20%,胰蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低18%,蛋白酶K对抗菌肽A3的抑菌活性几乎无影响。本研究结果表明,分离得到的抗菌肽A3是一种对大肠杆菌O78具有抑菌活性的新型抗菌肽,具有一定的开发潜力,可为下一步抗菌肽的结构分析、理化特性分析等深入研究提供一定参考依据。 | 于佳民 赵倩 张志焱 徐海燕 谷巍 | 2021 | 中国畜牧兽医2021，48，8： | 3 |
| 14 | 抗菌肽Piscidin 1 PG/聚乳酸电纺纳米纤维膜的制备及其对海鲈鱼的保鲜作用显示文摘本研究使用静电纺丝法制备了Piscidin 1 PG/聚乳酸(Pis-1 PG/PLA)纳米纤维膜,并对纤维膜形态、拉伸强度、结构、热性能、力学性能以及对腐败希瓦氏菌生长的影响进行了研究。最后用Pis-1 PG/PLA纤维膜包裹海鲈鱼鱼肉,通过测定4℃冷藏15d内菌落总数、p H、挥发性盐基氮(TVB-N)等指标研究膜的保鲜效果。结果表明:Pis-1 PG/PLA纳米纤维呈线状,结构光滑无序;Pis-1 PG的加入使得Pis-1 PG/PLA纤维膜纤维平均直径下降至225 nm,纤维膜拉伸强度提升至2.70 MPa,结晶度降低;红外光谱显示Pis-1 PG的加入对PLA的结构没有影响;体外抑菌实验显示Pis-1 PG/PLA纤维膜在6 h内会抑制腐败希瓦氏菌的生长并有持续抑菌的效果,抑菌效果显著(p<0.05);在4℃贮藏6 d后,Pis-1 PG/PLA纤维膜处理鱼肉的菌落总数低于空白组2.02~3.23 lg(cfu/m L),进而有效抑制鱼体p H值和TVB-N含量的升高,能延长海鲈鱼鱼肉冷藏期3 d以上。综上所述Pis-1 PG成功负载到了PLA纤维膜中;Pis-1 PG/PLA纤维膜对海鲈鱼鱼肉有保鲜效果,在水产品保鲜和食品包装等方面具有应用潜力。 | 徐宇辰 励建荣 李婷婷 谢晶 劳敏军 王轰 郭晓华 | 2021 | 现代食品科技2021，37，4： | 3 |
| 15 | 抗菌肽抗菌活性评价及应用研究进展显示文摘抗菌肽属先天性免疫物质,抗菌活性较为广泛,其不同于抗生素,作用机制独特,不易产生耐药性,在目前全球抗生素耐药问题突出的背景下,是有望代替抗生素的理想添加剂。文章对抗菌肽抗菌活性评价及在养殖业中的应用情况进行了阐述。 | 李洪宇 刘扬科 何涛 郭柑彤 吴玉臣 陈华丽 | 2022 | 饲料博览2022，，3： | 3 |
| 16 | 抗菌肽的分离纯化研究进展显示文摘抗菌肽是抗生素的替代选择之一,具有较高的抗菌活性和与抗生素不同的作用机制,不易产生耐药性。但是,天然抗菌肽的提取存在成本高、操作繁琐等缺点,因此需要加强对新型抗菌肽的研究。本文主要对天然抗菌肽的优势、分离和纯化步骤进行综述。 | 袁慧坤 袁文华 刁新平 | 2016 | 乡村科技2016，7，36： | 2 |
| 17 | 抗菌肽的来源、功能及其在畜禽生产中的应用显示文摘抗菌肽又称抗微生物肽或肽抗生素,来源于微生物的抗菌肽又称细菌素,是机体先天防御系统的重要组成部分。自20世纪70年代,瑞典科学家Boman研究小组从惜古比天蚕中发现第一种抗菌肽“天蚕素”以来,每年都有大量新的抗菌肽被发现。目前发现的多数抗菌肽具有较宽的活性谱,可有效杀死细菌、真菌、寄生虫甚至包膜病毒。更为重要的是,抗菌肽可以有效抑制对抗生素产生耐药性的细菌,因此抗菌肽又被誉为“天然超级抗生素”[1]。本文对抗菌肽的来源、功能和在畜禽生产中的应用进行了综述。 | 郑邓祥 | 2014 | 养殖与饲料2014，13，7： | 2 |
| 18 | 人α防御素5在酿酒酵母中的分泌表达及其活性分析显示文摘人α-防御素5(humanα-defensin 5,HD5)是人防御素α家族中发现的抑菌活性最高的多肽。为了探究HD5在酿酒酵母中分泌表达的可行性,首先利用PCR扩增获得酵母菌偏好的HD5核酸序列,构建酿酒酵母表达载体pVT102U/α-HD5,并将该重组质粒转入酿酒酵母S78中,通过营养缺陷筛选获得阳性转化菌株。然后,对重组菌进行发酵培养,取上清液纯化后通过tricine-SDS-PAGE和质谱检测表达产物。最后,利用琼脂扩散法检测表达的HD5的抑菌活性以及其对温度的耐受性,同时通过二倍稀释法检测表达的HD5对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏杆菌的最小完全抑制浓度。结果显示:表达的HD5对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏杆菌均具有明显的抑菌活性。发酵上清冻干粉对金黄色葡萄球菌完全抑制的最小浓度为10 mg/mL,对大肠杆菌和沙门氏杆菌完全抑制的最小浓度为40 mg/mL;且在不同温度处理下,表达的HD5对3种细菌仍具有一定的抑菌作用。上述结果表明具有高抑菌活性的HD5防御素在该重组系统中成功表达。 | 宋南 邵婕 刘子昊 徐子龙 许琪瑶 张学文 陈金军 | 2017 | 生命科学研究2017，21，6： | 1 |
| 19 | 芽孢杆菌BLy的鉴定及抑菌活性物质特性显示文摘对一株拮抗芽孢杆菌菌株BLy进行鉴定,研究其产生的抑菌物质的理化性质。结合菌落形态、生理生化指标和16SrDNA序列分析鉴定菌株BLy的种属;运用抑菌圈法研究抑菌物质的产生过程、抑菌谱及抑菌物质的理化特性。菌株BLy鉴定为地衣芽孢杆菌,其发酵液上清液对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,20μL发酵上清液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈可达21.5 mm;对枯草芽孢杆菌有抑菌作用,对供试的其他菌株无抑菌作用;抑菌活性物质具有较强的耐热性能,100℃保温30 min仍保持48.19%的抑菌性能,且其活性物质耐环境pH、不受蛋白酶类影响。地衣芽孢杆菌BLy产生的抑菌物质具有窄的抗菌谱,说明其代谢产物有较好的选择抗性,可作为筛选抗性活性化合物的菌种资源。 | 叶生梅 严航 程其国 | 2019 | 安徽工程大学学报2019，34，5： | 1 |
| 20 | 天蚕素AD在毕赤酵母中的多拷贝整合表达及表达条件优化显示文摘【背景】天蚕素抗菌肽是目前研究最清楚、效果最显著的抗菌肽,实现工业化生产为其在农业、养殖业中的应用奠定了基础。【目的】获得一株高效生产天蚕素AD的基因工程菌株。【方法】构建重组载体pGAPZαA-CAD通过电击转化至PichiapastorisX33中,表达天蚕素AD基因并获得X33/GCAD菌株;构建重组载体pUCGAP-CAD导入至X33/GCAD菌株中。pGAPZαA-CAD是以博来霉素为抗性筛选标签被整合到P.pastoris X33的GAPDH启动子区域,pUCGAP-CAD是以遗传霉素为抗性筛选标签被整合到P.pastoris X33的非翻译rDNA区域,最终获得一株高效表达天蚕素AD的酵母菌株X33/GUCAD。【结果】通过质谱分析鉴定X33/GUCAD表达的抑菌物质为天蚕素AD,通过发酵条件的优化,表明X33/GUCAD菌株在以甘油为碳源和以蛋白胨、酵母提取物为有机氮源的情况下具有较强表达天蚕素AD的能力。【结论】较高的拷贝数更有利于提高天蚕素AD的产量,此工程菌株在后期发酵过程中稳定性较好,适于工业化生产。 | 牛军波 薛林贵 吴娟丽 陈熙明 李娟 王霞 刘阳 Emaneghemi Brown | 2020 | 微生物学通报2020，47，5： | 1 |
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