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| 1 | 间充质干细胞成骨分化中多种调控因子的交互作用及其机制显示文摘间充质干细胞(MSCs)分化为成骨细胞是骨代谢和骨修复的重要环节,其机制复杂。目前研究发现骨形态发生蛋白(BMP)、成纤维细胞生长因子(FGF)、Wnt、Hedgehog、NELL1、胰岛素样生长因子(IGF)和Notch等多种信号分子参与调控MSCs的成骨分化过程。这些信号分子自身都被证明具有较强的促进MSCs成骨分化的能力。它们能通过特异性配体激活相应受体,从而开启胞内特异的信号转导通路,促进成骨相关基因的转录、翻译过程。同时,各个信号通路之间又形成复杂的调控网络,彼此影响,共同调控MSCs的成骨分化过程。对这些信号通路相互作用机制的深入研究对于推动骨组织工程发展及治疗骨代谢疾病有重要意义。 | 陈晓婷 高艳虹 | 2017 | 上海交通大学学报(医学版)2017,37,5: | 6 |
| 2 | 神经生长因子增强骨形态蛋白-9诱导鼠胚胎成纤维细胞成骨分化的作用显示文摘目的研究神经生长因子(NGF)对骨形态发生蛋白-9(BMP-9)诱导鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)成骨分化的影响。方法构建重组腺病毒转染MEFs,分为NGF组、BMP-9组及NGF联合BMP-9组(联合组),以绿色荧光蛋白(GFP)处理为对照组。采用细胞化学染色以及读数检测各组第3,5天碱性磷酸酶(ATP)活性变化,RT—PCR检测第9天骨桥素(OPN)mRNA表达水平,Westernblot、免疫细胞化学检测各组第9天OPN蛋白表达水平;茜素红染色检测各组第14天钙盐沉积水平。结果BMP-9组ALP活性升高,但NGF组ALP活性无明显变化,联合组ALP活性明显强于NGF组或BMP-9组。对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPNmRNA表达水平分别为0.92±0.03,1.28±0.04,0.94±0.03,1.62±0.04(F=214.60,P〈0.01).与BMP-9组比较,联合组OPNmRNA相对表达水平明显升高(t=10.569,P〈0.05)。Westernblot检测结果显示,对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPN蛋白相对表达水平分别0.604-0.05,0.844-0.03,0.55±0.05,1.274-0.05(F:162.50,P〈0.01),与BMP-9组比较,联合组OPN蛋白相对表达水平明显升高(t=11.778,P〈0.05)。免疫组织化学染色结果显示,对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPN蛋白相对表达水平相对密度分别为3.63±0.17,6.27±0.30,3.86±0.18,10.16±0.18(F=602.60,P〈0.01),与BMP-9组比较,联合组OPN蛋白相对表达水平明显升高(t=22.280,P〈0.05)。联合组钙盐沉积水平明显高于BMP-9组或NGF组。结论NGF能协同增强BMP-9诱导MEFs的成骨分化作用。 | 皮昌军 邹翔 张然熙 吴念 何百成 邓忠良 陈亮 | 2016 | 中华创伤杂志2016,32,2: | 5 |
| 3 | 壳聚糖/海藻酸钠水凝胶顺序释放BMP/WNT信号通路激活剂促成骨细胞分化的体外实验研究显示文摘目的:通过组织工程策略构建顺序释放骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)和WNT信号通路激活剂的双层复合材料,并研究其在体外对成骨细胞分化的作用。方法:用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法和茜素红染色法分别检测BMP信号通路激活剂他克莫司(tacrolimus,FK506)和WNT信号通路激活剂6-溴靛玉红-3-肟(6-bromoindirubin-3-oxim,BIO)对前成骨细胞系MC3T3-E1增殖活性和成骨向分化的影响,筛选出最合适的药物浓度;制备壳聚糖/海藻酸钠支架材料,采用称量法测定材料的降解曲线,制备内层壳聚糖载BIO、外层海藻酸钠载FK506的支架材料,采用紫外分光光度计测定药物的释放;制备内外单载不同药物的支架材料,用ALP染色法和茜素红染色法检测载药复合材料对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨向分化的作用,应用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测载药支架材料对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响。结果:在适宜范围内,FK506处理的细胞早期ALP活性较BIO处理的细胞更强,且FK506促进ALP活性最适合的质量浓度为2.0μg/mL;茜素红染色结果表明,BIO在0.1μmol/L时,细胞表现出更强的钙结节形成能力。支架材料缓慢稳定降解至第35天,期间FK506和BIO顺序释放,药物在14 d内基本释放完毕。应用载药材料浸提液ALP染色的支架材料和茜素红染色结果显示,内载BIO外载FK506的实验组相比较于其他组表现出更强的成骨向分化能力;RT-qPCR结果显示,内载BIO外载FK506的支架材料能够显著促进成骨相关基因Runx2和OCN的表达。结论:以壳聚糖/海藻酸钠为支架材料,内层壳聚糖载WNT信号通路激活剂BIO,外层海藻酸钠载BMP信号通路激活剂FK506,两者顺序释放,即先激活BMP信号通路,后激活WNT信号通路,能够在体外促进MC3T3-E1细胞的成骨向分化,为临床治疗骨缺损,促进骨再生提供新思路。 | 王晓 郝新青 王小萌 闫广兴 叶佳朋 齐春光 孙宏晨 史册 黄洋 | 2021 | 口腔颌面外科杂志2021,31,1: | 4 |
| 4 | Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化显示文摘目的探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达;流式细胞术检测细胞转染效率;Westernblot法、免疫荧光技术及实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测缝隙连接蛋白43(Cx43)、肌钙蛋白T(cTnT)、GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌细胞增强因子2C(MEF2C)的表达。结果经HEK293细胞扩增可得到高滴度的重组腺病毒;转染C3H10T1/2细胞3周后,Wnt3a组Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表达量与空白组比较无明显差异;Wnt3a联合BMP9组的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表达量显著高于空白组、GFP组和Wnt3a组,与单独BMP9组相比无显著性差异。结论Wnt3a不能单独诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化;Wnt3a联合BMP9可诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化。 | 刘书霞 耿雪静 房松华 陈沅 | 2015 | 细胞与分子免疫学杂志2015,31,4: | 2 |
| 5 | Wnt3a在慢性牙周炎中的表达及临床意义显示文摘目的探讨Wnt3a在慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达及其与附着丧失的关系。方法选择15例慢性牙周炎患者(牙周炎组)和15例牙周健康者(对照组),临床检查记录2组的探诊深度和附着丧失水平,采用RT-PCR和Western-Blot检测牙龈组织中Wnt3a的表达水平,并分析Wnt3a蛋白表达与附着丧失的相关性。结果牙周炎组的探诊深度高于对照组(mm:7.93±1.56 vs 1.83±0.37),其临床附着丧失为(7.76±1.34)mm,而对照组的口腔检查中未见临床附着。与对照组比较,牙周炎组的牙龈组织中Wnt3a m RNA(0.49±0.03 vs 0.36±0.04)和蛋白的表达水平(0.57±0.14 vs 0.43±0.17)均较低(t分别为12.015和2.381,P<0.05)。并且,附着丧失的程度与牙周炎患者牙龈组织中Wnt3a蛋白的表达呈负相关(r=-0.564,P=0.028)。结论 Wnt3a在慢性牙周炎中表达下调,与慢性牙周炎的附着丧失有密切关系,可能在慢性牙周炎的骨吸收中起到了一定的作用。 | 程焕芝 高秀秋 | 2015 | 天津医药2015,43,8: | 2 |
| 6 | β-catenin慢病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究显示文摘【目的】构建β—catenin慢病毒载体,转染骨髓间充质干细胞并予以鉴定。【方法】β—catenin曼病毒载体转染骨髓间充质干细胞,在倒置荧光显微镜下观察转染效率,并进行RNA提取及PCR扩增,检测目的基因表达情况,进行CCK—8实验检测转染后细胞的增殖活性。【结果】当感染复数为25时,感染后96 h观察干细胞的感染效率大约为80%。PCR检测到β—eatenin的mRNA在骨髓间充质干细胞中过表达。慢病毒对细胞的增殖有一定的抑制作用,但β—catenin对细胞增殖有促进作用。【结论】β—catenin慢病毒载体成功转染大鼠骨髓间充质干细胞,为进一步研究β—catenin在MSCs中的作用奠定了基础。 | 申坤灵 樊毫军 丁辉 吕琪 刘子泉 董文龙 | 2014 | 武警后勤学院学报(医学版)2014,23,6: | 2 |
| 7 | PRP联合盐酸川芎嗪对BMSCs体外增殖及向成骨细胞分化的影响显示文摘目的通过将不同比例的富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)与盐酸川芎嗪联合用于人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),观察不同比例对其体外增殖及其向成骨细胞分化的影响。方法选取我院住院并签订知情同意书的患者为研究对象,抽取已签订知情同意书的患者静脉血50m L,分别二次离心法制备PRP,进行血小板计数分析。根据骨髓间充质干细胞培养是否加入药物为分组依据,分成A、B、C、D四组,A组为对照组,培养液中不加入药物,其余三组分别将体积分数为15%、30%、50%的PRP与80%盐酸川芎嗪按照1∶1.5混合加入骨髓间充质干细胞的培养液中,检测细胞的增殖状况,细胞达到80%融合,消化收集细胞;计数确定各组细胞培养情况,确定加入PRP和盐酸川芎嗪组对细胞培养的影响。对加入PRP和盐酸川芎嗪组培养的细胞进行成骨诱导,确定其成骨分化特性。结果各组PRP+盐酸川芎嗪促进MSCs增殖优于对照组。达到80%融合时间更短。随着PRP浓度增加细胞增殖效率显著增加。结论 PRP与盐酸川芎嗪对BMSCs的体外增殖有促进作用,与PRP体积分数和作用时间呈正相关关系。 | 李树臣 尚绪山 李东 陈民 龙荫生 | 2015 | 生物骨科材料与临床研究2015,12,5: | 1 |
| 8 | 间充质干细胞源性外泌体促进骨再生修复的研究进展显示文摘间充质干细胞源性外泌体(Mesenchymal Stem Cell Exosomes,MSC-Exos)在介导骨组织再生修复中发挥重要作用。除了通过激活Wnt/β-catenin信号通路参与骨再生修复外,MSC-Exos还参与免疫调节,积极促进骨组织再生微环境的建立。本文旨在对MSC-Exos在骨再生修复过程中的调控作用及可能机制予以综述,为骨相关疾病的研究及治疗提供新的思路。 | 达丽隽 宋飞雪 滕元君 王遵林 李恩喜 刘进进 | 2023 | 生物医学转化2023,4,2: | 0 |
| 9 | 吡格列酮对小鼠成骨细胞增殖和凋亡的影响显示文摘目的:观察吡格列酮(PIO)对小鼠成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:将小鼠成骨MC3T3-E1细胞分为对照组和不同浓度(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)PIO组,药物作用一定时间后,MTT法检测各组细胞的增殖活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率,western blotting检测Wnt信号通路亡相关蛋白[β-catenin、GSK-3β和磷酸化(p)-GSK-3β]的表达情况。结果:20μmol/L和40μmol/L PIO作用于MC3T3-E1细胞24 h和48 h,均可抑制细胞的增殖活性(均P<0.05);干预细胞24 h后,20μmol/L和40μmol/L PIO组的细胞凋亡率明显高于对照组和10μmol/L PIO组(均P<0.05);western blotting结果显示,PIO作用24 h时可使β-catenin蛋白的表达下调,p-GSK-3β蛋白的表达上调(均P<0.05)。结论:PIO可以抑制小鼠成骨细胞增殖,促进小鼠成骨细胞的凋亡,该作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来完成的。 | 卢宇 费小蔷 | 2017 | 广西医科大学学报2017,34,9: | 0 |