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| 1 | 阿尔茨海默病基因与自噬的研究进展显示文摘阿尔茨海默病(AD)是老年人中最常见的退行性疾病。尽管AD的病因尚不清楚,但大量证据支持淀粉样蛋白级联假说有关AD发病机制的主流学说。因此,靶向淀粉样蛋白已成为最有希望的治疗方法。自噬广泛存在于真核细胞中,能清除异常构型蛋白质并消化受损和多余的细胞器,以帮助细胞应对代谢应激(如低氧、营养缺乏等),对病理生理状态下维持细胞内稳态有重要意义。自噬体聚集和溶酶体障碍等自噬功能失调与AD密切有关。最近对AD的全基因组关联研究已经确定了与AD相关的新基因数量。在AD中,鉴定的许多基因与自噬功能障碍有关。由于自噬被认为是AD的主要致病机制之一,所以有必要讨论AD相关基因是怎样与自噬相关联的。 | 何永利 陈阳美 | 2018 | 重庆医学2018，47，35： | 1 |
| 2 | 稳定表达人BACE1启动子及荧光素酶报告基因HEK293细胞株的建立显示文摘目的对人β位点裂解酶-1(BACE1)基因核心启动子进行克隆,构建携带BACE1基因启动子的荧光素酶报告载体,筛选稳定表达细胞株并分析其转录活性。方法提取人胚肾HEK293细胞基因组DNA,以其为模板,PCR扩增BACE1核心启动子(-691^+67)并克隆至荧光素酶报告载体pGL4.21中,构建BACE1基因启动子荧光素酶报告载体pGL4.21-BACE1,将其转染HEK293细胞(无启动子的pGL4.21载体作阴性对照),利用嘌呤霉素筛选稳定表达株后检测其转录活性。结果成功扩增到758bp的BACE1核心启动子,pGL4.21-BACE1载体经双酶切鉴定正确;HEK293细胞被该载体转染后经嘌呤霉素筛选得到6株稳定表达BACE1启动子的细胞株,其转录活性分别是对照组(HEK293/pGL4.21)的(134.7±22.3)、(634.0±13.9)、(437.6±6.1)、(805.5±5.5)、(492.8±59.1)、(1 021.1±46.6)倍(P=0.001)。结论成功构建了人BACE1基因启动子荧光素酶报告载体。 | 邓常青 朱炳林 龙艳 罗伟 陈国俊 | 2017 | 重庆医学2017，46，3： | 0 |
| 3 | 体外磁共振观察胎鼠神经干细胞的标记显示文摘背景:神经干细胞移植后的细胞存活、识别和迁移需动态监控。目的:通过体外磁共振技术对胎鼠神经干细胞体外标记,为神经干细胞在神经系统修复中的应用提供依据。方法:采用胎鼠神经干细胞的分离与培养标记、染色剂鉴定及神经干细胞的活性检测,构建大鼠脑缺血再灌注模型,采用超顺磁性氧化铁颗粒体外标记胎鼠的神经干细胞并移植至模型大鼠左侧脑内,未标记的胎鼠神经干细胞移植至右侧脑中,对标记的细胞进行普鲁士蓝染色,观察其定植和迁移情况,并通过磁共振示踪动态的监测神经干细胞在活体移植之后的信号改变情况。结果与结论:超顺磁性氧化铁颗粒体外标记胎鼠神经干细胞的方法效率达95%以上,电镜结果显示超顺磁性氧化铁颗粒体外标记胎鼠的神经干细胞内含铁颗粒,且集中在溶酶体和内涵体当中,磁共振结果显示胎鼠标记的神经干细胞呈现低信号改变,细胞活性的影响与未标记组差异无显著性意义,但标记的胎鼠神经干细胞T2WI与T2*WI信号降低。证实超顺磁性氧化铁颗粒体外标记胎鼠的神经干细胞可高效表达,磁共振的监控可以用于神经干细胞的活体示踪。 | 郑兆凤 王荣芳 王琦 | 2015 | 中国组织工程研究2015，19，32： | 0 |
| 4 | 人HSP75基因重组腺病毒载体构建及在C17.2神经干细胞的表达显示文摘目的构建HSP75基因重组腺病毒载体,观察HSP75蛋白在C17.2神经干细胞中的表达。方法采用PCR方法从含人HSP75基因质粒中扩增HSP75基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点区域,构建重组穿梭质粒p HBAd-MCM-HSP75-GFP,在LipofiterTM转染试剂的介导下与腺病毒辅助骨架质粒p HBAd-BHGloxΔE1,3 Cre共转染HEK293细胞,整合包装成重组腺病毒,TCID50法测定病毒滴度。使用荧光显微镜、流式细胞仪和Western blotting观察重组腺病毒在C17.2细胞中的感染情况及HSP75蛋白的表达水平。结果通过酶切鉴定、测序、PCR鉴定,HSP75基因已正确插入穿梭质粒中,并与病毒骨架质粒整合包装成重组腺病毒;重组腺病毒滴度为1.0×1010PFU/ml;Western blotting检测,转染后的神经干细胞表达HSP75蛋白。结论 HSP75重组腺病毒载体成功构建,对C17.2神经干细胞具有较高的表达效力。 | 王艳 陈庆状 蒋德旗 李明星 贾思远 朱宁 王勇 | 2015 | 中国康复理论与实践2015，21，3： | 0 |
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