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| 1 | α硫辛酸通过抑制miR-29b表达保护成纤维细胞避免氧化损伤显示文摘目的探讨α硫辛酸(ALA)保护成纤维细胞避免氧化损伤的作用机制。方法将成纤维细胞经过ALA(200μmol/L)预处理2h后,再用H2O2(50μmol/L)孵育12h。应用噻唑蓝(MTT)法观察细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Caspase-3活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定miR-29b表达,Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果ALA显著逆转H2O2诱导的成纤维细胞活性下降、细胞凋亡增加和Caspase-3活性上升(P〈0.05),同时显著下调H2O2处理细胞的miR-29b表达水平。miR-29bmimic转染细胞可逆转ALA对H2O2诱导的成纤维细胞的保护作用,引起细胞活性下降、凋亡增加和Bcl-2蛋白表达上调(P〈0.05)。结论ALA通过抑制miR-29b表达保护成纤维细胞避免氧化损伤。 | 吴军 汤慧芹 刘群 干定云 谢菁 | 2016 | 临床内科杂志2016，33，9： | 11 |
| 2 | α-硫辛酸对小鼠卵巢颗粒细胞氧化应激损伤和凋亡的影响显示文摘目的探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响。方法收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力,采用Trizol法提取各组细胞的RNA,进行RT-PCR法检测α-硫辛酸对caspase-3和caspase-9基因的表达情况的影响,同时利用细胞免疫荧光和ELISA法检测caspase-3和caspase-9蛋白表达,并分析α-硫辛酸降低细胞凋亡的作用。结果分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞α-硫辛酸添加后,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P<0.05);经过RT-PCR扩增技术获得长度为180bp的特异性caspase-3产物,获得长度为152bp的特异性caspase-9产物,α-硫辛酸添加可显著性降低caspase-3和caspase-9mRNA的表达(P<0.05);免疫荧光细胞化学染色显示颗粒细胞caspase-3和caspase-9蛋白阳性染色定位于细胞胞质,分别呈现绿色荧光和红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;ELISA结果显示α-硫辛酸添加后caspase-3和caspase-9酶活性显著下调(P<0.05)。结论小鼠颗粒细胞培养过程中添加α-硫辛酸可明显改变细胞抗氧化能力,对卵巢颗粒细胞培养过程中的氧化应激诱导的细胞凋亡起到一定的保护作用。 | 马会明 张永芳 王蒙蒙 李昕 王永峰 田洪成 裴秀英 王燕蓉 | 2016 | 西安交通大学学报(医学版)2016，37，1： | 4 |
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