共被期刊论文引用了2次
您的检索式：您选中1篇文献正在查看引证文献汇总
|
|
|
题名
|
作者
|
年代
|
出处
|
被引量
|
| 1 | 栽培种花生AFLP标记体系的优化及多态性引物筛选显示文摘为建立并优化适合花生的EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ内切酶组合的AFLP标记技术体系,本试验对花生基因组DNA大样提取方法、双酶切反应、连接体系、预扩增和选择性扩增等影响因素进行反复调试与优化,并对适合花生AFLP分析的引物组合(E/M)进行多态性筛选。结果表明,高质量的模板DNA提取采用改进的SDS-CTAB法,DNA样品的浓度在150~200 ng·μL^(-1),37℃双酶切3.0 h,接头浓度为50pmol·μL^(-1),T4-DNA连接酶浓度为10 U·μL^(-1),16℃连接10 h。以2×Es Taq MasterMix(含有Es Taq DNA Polymerase,3 mmol·L^(-1)MgCl_2和400μmol·L^(-1)d NTP)作为PCR反应原料,其中,预扩增反应体系为50μL,预扩增引物(E00和M00)的浓度为50 ng·μL^(-1),预扩增产物最适稀释倍数为20倍;选择性扩增反应体系为20μL,扩增产物中加入10μL Loading Buffer,经95℃变性10 min后,立刻转移到冰浴中冷却备用。最终,从225对AFLP引物组合中,筛选出稳定且多态性丰富的42对引物组合,可用于后期作图群体基因型检测和种质资源遗传多样性分析。本研究结果为下一步构建花生高密度遗传连锁图谱和开展分子标记辅助育种奠定了基础。 | 王亮 杨鑫雷 GETAHUN Addisu 崔顺立 穆国俊 刘立峰 李自超 | 2017 | 核农学报2017，31，11： | 5 |
| 2 | 向日葵Pst Ⅰ和Mse Ⅰ内切酶组合AFLP标记体系的建立及引物筛选显示文摘为建立并优化适合向日葵的Pst Ⅰ和Mse Ⅰ组合的AFLP技术体系,为下一步构建遗传连锁图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础,对向日葵基因组DNA提取方法、酶切连接体系和选择性扩增程序的影响因素进行优化,并对适合向日葵AFLP分析的引物组合进行筛选。结果表明,模板DNA的提取采用改进CTAB法,酶切连接采用一步法反应14 h,在选择性扩增体系20μL中,Mg2+和d NTP浓度分别为2 mmol/L和0.3 mmol/L,选扩引物的浓度为0.6 mmol/L,预扩增产物最适稀释倍数为30倍。同时筛选出了稳定且多态性丰富的48对适合向日葵AFLP分析的引物组合。 | 张永虎 侯建华 吕品 于志贤 | 2014 | 科技导报2014，32，36： | 1 |
您所在的机构暂未开通此部分的功能，请联系管理员