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| 1 | CRISPR/Cas9 and Genome Editing in Drosophila显示文摘Recent advances in our ability to design DNA binding factors with specificity for desired sequences have resulted in a revolution in genetic engineering, enabling directed changes to the genome to be made relatively easily. Traditional techniques for generating genetic mutations in most organisms have relied on selection from large pools of randomly induced mutations for those of particular interest, or time-consuming gene targeting by homologous recombination. Drosophila melanogaster has always been at the forefront of genetic analysis, and application of these new genome editing techniques to this organism will revolutionise our approach to performing analysis of gene function in the future. We discuss the recent techniques that apply the CRISPR/Cas9 system to Drosophila, highlight potential uses for this technology and speculate upon the future of genome engineering in this model organism. | Andrew R.Bassett Ji-Long Liu | 2014 | Journal of Genetics and Genomics2014，41，1： | 32 |
| 2 | CRISPR/Cas技术研究进展显示文摘准确的基因编辑技术对生物学研究和作物改良有重要意义,并且是基因疾病的潜在治疗途径。成簇规律间隔短回文重复序列/成簇规律间隔短回文重复序列关联蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins,CRISPR/Cas)技术是近两年出现的一种定点基因组编辑新工具,具有灵活、高效、廉价且易于操作等优点,迅速超越以往技术,成为最炙手可热的定点基因编辑工具,目前已广泛应用于细菌、哺乳动物细胞、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、线虫(Caenorhabditis elegans)、果蝇(Drosophila melanogaster)以及拟南芥(Arabidopsis thaliana)和水稻(Oryza sativa)等各类细胞和斑马鱼(Brachydanio rerio)生物体中。此外,CRISPR/Cas技术在功能基因筛选、转录调控、表观遗传调控以及DNA成像等领域也有广阔的应用前景。CRISPR/Cas技术必将改变生物学研究方法,推动生物技术的发展。本文对CRISPR/Cas系统的作用机制、特异性及其改进方法进行了概述,并追踪了该系统的最新研究进展,讨论了该技术的发展前景及面临的挑战,以期为该领域的研究和应用提供一些有益参考。 | 常振仪 严维 刘东风 陈竹锋 谢刚 卢嘉威 吴建新 唐晓艳 | 2015 | 农业生物技术学报2015，23，9： | 20 |
| 3 | CRISPR/Cas9系统的分子机制及其在人类疾病基因治疗中的应用显示文摘CRISPR/Cas系统是广泛存在于细菌和古生菌中的适应性免疫系统,用来抵抗外来病毒或质粒的入侵。近几年,由Ⅱ型CRISPR/Cas适应性免疫系统改造而来的CRISPR/Cas9基因组编辑技术蓬勃发展,被广泛地应用于生命科学研究的各个领域,并取得了革命性的变化。文章主要综述了CRISPR/Cas9基因组编辑技术的起源与发展及在生命科学各研究领域的应用,重点介绍了该系统在人类疾病基因治疗方面的最新应用及脱靶效应,以期为相关领域的科研人员提供参考。 | 璩良 李华善 姜运涵 董春升 | 2015 | 遗传2015，37，10： | 16 |
| 4 | 基因编辑技术及其在中国的研究发展显示文摘基因编辑技术是一种能够对生物体的基因组及其转录产物进行定点修饰或者修改的技术,早期基因编辑技术包括归巢内切酶、锌指核酸内切酶和类转录激活因子效应物。近年来,以CRISPR/Cas9系统为代表的新型技术使基因编辑的研究和应用领域得以迅速拓展。本文对基因编辑技术的原理、技术发展及其应用进行了阐述,对我国在基因编辑机制研究及技术发展、基因编辑动植物模型构建、基因治疗等领域的研究进展进行了回顾,并对基因技术的发展前景及趋势进行了展望。 | 陈一欧 宝颖 马华峥 伊宗裔 周卓 魏文胜 | 2018 | 遗传2018，40，10： | 14 |
| 5 | CRISPR/Cas9技术在微生物研究中的应用进展显示文摘CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR associated proteins)系统是在细菌和古生菌中发现的一种RNA指导的降解入侵病毒或质粒DNA的适应性免疫系统。由II型CRISPR/Cas系统改造而成的CRISPR/Cas9技术已经被开发成一种强大的基因组编辑和表达调控工具,并且广泛应用于基因功能研究、代谢工程和合成生物学等领域。本文从CRISPR/Cas9系统的发现过程、分类、作用原理、在微生物研究中的应用进展等方面进行总结,并展望了该技术的应用前景。 | 张昆 陈景超 李祎 刘磊 王海磊 | 2018 | 微生物学通报2018，45，2： | 13 |
| 6 | CRISPR/Cas9技术在植物基因功能研究和新种质创制中的应用与展望显示文摘基因组定点编辑是利用人工核酸酶,对复杂生物基因组特定位点快速而精确地进行遗传改造的一项新技术.尤其是最近从细菌和古细菌的获得性免疫防御反应中改造而来的CRISPR/Cas9系统,因其简单、廉价、高效以及通用的特性,目前已经广泛地应用于植物、动物、微生物等各种生物体和细胞的基因功能和应用研究中.CRISPR/Cas9系统的原理在于其携带的Cas9核酸酶—RNA导向的ds DNA结合蛋白,能够在靶位点对双链DNA进行定点切割,随后引发的非同源末端连接或者同源重组修复,导致了靶位点DNA的缺失、插入、替换甚至染色体大片段重排.本文对CRISPR/Cas9技术的作用机理和应用进行概括,侧重于模式植物和农作物的最新进展,探讨这一新型基因组定点编辑技术在植物基因功能研究和新种质创制中的进一步发展. | 严芳 周焕斌 | 2016 | 中国科学:生命科学2016，46，5： | 12 |
| 7 | CRISPR/Cas基因组编辑技术研究进展及其在植物中的应用显示文摘基因组编辑技术利用人工核酸酶以精准和可预测的方式来快速改造和修饰基因组,加速了基础研究和植物育种的进程。近年来兴起的II型CRISPR/Cas9基因组编辑技术成功应用于多种动植物中。CRISPR/Cas9系统在可定制的小型非编码RNA的指导下定向切割基因组DNA双链,并通过非同源末端连接(NHEJ)和同源重组(HDR)机制进行基因修饰,从而实现基因组靶标基因的定点改造。本综述介绍了CRISPR/Cas系统的结构及作用原理,讨论了CRISPR/Cas9系统的靶点效率、脱靶效应以及Cas9突变体的筛选,并对CRISPR/Cas9系统的表观遗传调控进行了分析。最后我们详细阐述了CRISPR/Cas9技术在植物中的最新应用进展,并对CRISPR/Cas9系统的发展和应用前景进行了展望,希望为开展植物基因组编辑方面的研究工作提供参考。 | 丁莉萍 张杰伟 马艳 陈亚娟 王宏芝 魏建华 | 2019 | 植物生理学报2019，55，4： | 11 |
| 8 | CRISPR-Cas基因组改造技术研究进展显示文摘CRISPRs-Cas系统是一种细菌获得性免疫系统,为一段规律成簇间隔短回文重复,保护细菌和古生菌免遭病毒、质粒等的入侵。这种免疫系统是由一种小RNA和多结构域蛋白质/蛋白复合物构成,其作用机理可能与真核生物的RNA干扰过程类似。这个系统已发展为一种高效、特异、操作简单易行的基因修饰工具,与TALEN、ZFN相比,CRISPR-Cas系统的出现使得基因编辑变得更加有效和简易,具有更大的潜力。CRISPR/Cas系统已成功应用到细胞、干细胞、小鼠、斑马鱼及植物等多种生物,显示了其强大的基因编辑优点。综述了CRISPR-Cas系统的技术原理及其在生物学研究中的应用最新研究进展,并探讨了该技术的发展前景。 | 颜雯 李海涛 向华 王晓虎 | 2014 | 广东农业科学2014，41，2： | 10 |
| 9 | 基因组编辑技术研究进展显示文摘利用基因组编辑技术可以对生物基因组特定位点进行人工修饰,研究相关基因的功能,进而应用于基础研究和临床治疗方面。序列特异性的DNA结合结构域与非特异性的DNA修饰结构域组合而成的人工酶是基因组编辑工具的重要组成部分。主要介绍了锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)、归巢核酸内切酶(Meganucleases)和成簇间隔短回文重复(CRISPR)4种基因组编辑技术的特点、原理、构建方法及应用,为相关的研究和应用提供参考。 | 吴璐 王磊 任远 原辉 | 2014 | 生物技术通报2014，30，11： | 9 |
| 10 | CRISPR/Cas9系统的脱靶效应显示文摘在细菌中发现的免疫系统CRISPR/Cas9,已经成为最有效的基因工程编辑工具,甚至大有希望可以治疗人类遗传性疾病。但是CRISPR/Cas9系统在使用时会产生严重的脱靶问题,导致假表型和错误的解释。提高与靶点结合的高效率,同时减少脱靶效应,将是今后CRISPR/Cas9技术的挑战。综述关注与CRISPR/Cas9脱靶效应相关的内容,总结了影响其靶点专一性的因素,减少CRISPR/Cas9脱靶效应的可行性方法和设计工具等,供大家学习讨论。 | 尹珅 贺桂芳 赖方秾 谢凤云 马俊宇 | 2016 | 生物技术通报2016，32，3： | 8 |
| 11 | CRISPR/Cas9基因编辑在三维基因组研究中的应用显示文摘CRISPR/Cas9系统在基因编辑方面具有巨大优势,能够低成本、可编程、方便快捷地用于动物、植物以及微生物的基因组靶向编辑和功能改造。三维基因组学是近年来兴起的一门研究染色质高级结构动态调控及基因组生物学功能的交叉学科。在三维基因组研究中,通常采用对DNA片段进行基因编辑以模拟基因组结构性变异,标记特定DNA片段,进而研究调控元件对于基因调控、细胞分化、组织发生、器官形成、个体发育的影响,最终阐明三维基因组的组装调控机制和生物学功能。因此,CRISPR及其衍生技术为研究三维基因组提供了极好的遗传学工具。本文主要综述了CRISPR片段编辑及其衍生技术在三维基因组调控与功能研究中的应用,以期为后续研究工作提供理论参考以及新的研究思路。 | 刘沛峰 吴强 | 2020 | 遗传2020，42，1： | 8 |
| 12 | CRISPR/Cas9基因编辑技术在肿瘤免疫治疗中的应用显示文摘近年来肿瘤免疫治疗因其显著疗效和创新性备受关注,是肿瘤治疗中最具有前景的研究方向之一。CRISPR基因编辑系统的发展以及其在多领域的延伸应用让研究者看到了它的巨大潜力,在肿瘤免疫治疗研究中也显示出广泛的应用前景。在过继性细胞治疗中,CRISPR/Cas9可对TCR-T和CAR-T细胞的内源性TCR以及HLA-Ⅰ分子的基因进行敲除得到通用型效应细胞;在基于免疫检查点阻断的治疗中,其为免疫检查点的抑制和阻断提供了一种新的方法;同时在抗体靶向疗法中,CRISPR/Cas9技术在候选靶点筛选及简化抗体制备流程中有着重要应用。CRISPR从各方面极大地推动了肿瘤免疫治疗的研究,本文将对CRISPR/Cas9基因编辑系统在肿瘤免疫治疗方面的应用进行介绍。 | 龚晨雨 陈昭 邵红伟 张文峰 | 2018 | 中国免疫学杂志2018，34，1： | 8 |
| 13 | 基于CRISPR-Cas9技术的基因治疗研究进展显示文摘CRISPR-Cas9系统是细菌在与噬菌体抗争的进化过程中产生的一种抵御外源DNA入侵的机制,能有效识别并剪切外源DNA。基于其识别切除外源DNA的原理,CRISPR-Cas9系统被开发成为新一代基因编辑工具。与ES打靶、ZFN、TALEN等技术途径相比,CRISPR-Cas9系统操作简便、效率高、成本低,有着极其广阔的应用前景。本文整理了近年内有关CRISPR-Cas9系统的最新文献报道,对该系统工作原理以及针对基因治疗的研究进展进行综述。 | 詹长生 夏小雨 | 2016 | 生物工程学报2016，32，7： | 7 |
| 14 | Application and future perspective of CRISPR/Cas9 genome editing in fruit crops显示文摘Fruit crops, including apple, orange, grape,banana, strawberry, watermelon, kiwifruit and tomato, not only provide essential nutrients for human life but also contribute to the major agricultural output and economic growth of many countries and regions in the world. Recent advancements in genome editing provides an unprecedented opportunity for the genetic improvement of these agronomically important fruit crops. Here, we summarize recent reports of applying CRISPR/Cas9 to fruit crops,including efforts to reduce disease susceptibility, change plant architecture or flower morphology, improve fruit quality traits, and increase fruit yield. We discuss challenges facing fruit crops as well as new improvements and platforms that could be used to facilitate genome editing in fruit crops, including d Cas9-base-editing to introduce desirable alleles and heat treatment to increase editing efficiency. In addition, we highlight what we see as potentially revolutionary development ranging from transgene-free genome editing to de novo domestication of wild relatives. Without doubt, we now see only the beginning of what will eventually be possible with the use of the CRISPR/Cas9 toolkit. Efforts to communicate with the public and an emphasis on the manipulation of consumerfriendly traits will be critical to facilitate public acceptance of genetically engineered fruits with this new technology. | Junhui Zhou Dongdong Li Guoming Wang Fuxi Wang Merixia Kunjal Dirk Joldersma Zhongchi Liu | 2020 | Journal of Integrative Plant Biology2020，62，3： | 7 |
| 15 | 植物CRISPR基因组编辑技术的新进展显示文摘在过去的4年中,CRISPR/Cas9基因组编辑技术成为生命科学领域的革命性工具,为植物学基础研究和农作物遗传改良提供了高效、快速而又廉价的遗传操作工具。利用CRISPR/Cas9系统可以实现精准的knock-out和knock-in等遗传操作,也可用于靶向激活或抑制基因的表达。在CRISPR/Cas9被广泛地用于基因组编辑的同时,它的编辑能力、效率和精确度也在不断地改进和完善,特别是CRISPR/Cpf1系统的发掘和单碱基编辑技术的创建,使CRISPR系统正逐步成为一个理想的遗传工程技术平台。此外,利用CRISPR/Cas9技术改良的农作物品种也已经涌现,这必将推动精准基因组编辑技术在农作物遗传改良中的应用和发展。 | 李红 谢卡斌 | 2017 | 生物工程学报2017，33，10： | 6 |
| 16 | 基因编辑新技术CRISPR-Cas系统研究及应用进展显示文摘CRISPR-Cas系统是由规律成簇间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas protein)构成,该系统作为原核生物获得性的“免疫系统”,在细菌和古细菌抵抗外来遗传物质的过程中发挥着重要作用。近年来,CRISPR-Cas系统因其在结构上的特殊性以及功能上的特异性正逐渐成为研究的热点,研究人员根据CRISPR-Cas系统的作用机制将其改造为基因编辑工具和基因表达调节工具广泛应用于各个领域。本文将对CRISPR-Cas系统的发现、结构、作用机制及应用进行综述。 | 康细林 储丹丹 单斌 | 2020 | 国外医药(抗生素分册)2020，41，1： | 6 |
| 17 | CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术及其在作物品种改良中的应用显示文摘基因组编辑技术是用特殊的核酸酶对基因组进行精准修饰的一种新兴技术。2013年研究人员发现了CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统,将其中的CRISPR/Cas9系统成功改造成RNA引导的核酸内切酶,发展了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术。该技术能够对包括植物在内的几乎所有物种的基因组进行高效、精准的定点修饰,而且程序简易、操作方便灵活,加速了遗传工程、功能基因组学的研究,给生命科学的各个领域带来了革命性变化。本综述回顾了CRISPR/Cas9的出现、改进与发展,简述了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术的作用机理,归纳总结了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术在作物品种改良、提高作物品质和产量中的应用,最后,分析了该技术在作物品种改良中的发展前景及应用价值,以期为合理利用该技术进行种质创新、品种改良提供理论依据。 | 平文丽 李雪君 林娟 丁燕芳 孙焕 孙计平 | 2016 | 中国农学通报2016，32，5： | 4 |
| 18 | CRISPR/Cas9体系的多元化发展和应用显示文摘CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR associated)系统是细菌和古细菌抵御外源病毒、外源质粒入侵的适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9技术是继锌指核酸酶(Zinc-finger nuclease,ZFN)和转录激活样效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)后出现的第3代基因定点编辑技术,具有高特异性、高效性、易操作和低成本等优点,受到国内外研究工作者的青睐。本文对CRISPR/Cas系统的分类和结构以及作用机制进行了概括,总结了CRISPR/Cas系统的多元化发展,新型CRISPR体系的探索研究,近年来研究者为了使该技术特异性提高、脱靶效率降低、打靶范围扩大而开展的PAM(protospacer adjacent motif)识别区扩展、gRNA优化设计、Cas9蛋白质结构加工等一系列工作,展现了现有CRISPR/Cas9技术的改造性应用以及在动物建模、人类基因治疗、全基因组筛选和动物育种材料研制等多个科研领域的广泛性应用,并对该项技术的应用前景和研究方向进行了展望。本综述详尽描述了该技术的基本情况,为相关科研工作者对该技术的进一步研究和应用提供参考。 | 葛陆星 康健 董翔宸 张涌 权富生 | 2017 | 农业生物技术学报2017，25，6： | 4 |
| 19 | 靶向核酸酶介导基因编辑技术的发展显示文摘对目标基因组位点进行靶向修饰一直是基因工程研究的重点。靶向基因编辑技术能够有效地用于建立动物和细胞疾病模型、培育动植物新品种,并具有治疗遗传疾病的重大潜力。近年来靶向核酸酶技术取得了重大的进展,逐渐成为基因编辑的主流工具。综述了锌指核酸酶(ZFN)、类转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)、规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR/Cas)这三大靶向基因编辑系统的原理和研究进展,并讨论了其局限性和未来的发展方向。 | 项光海 王皓毅 | 2015 | 生命科学2015，27，1： | 4 |
| 20 | 细菌中CRISPR/Cas系统的应用和优化显示文摘成簇规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)系统在近年来得到越来越广泛的应用。相比传统的基因组编辑技术,CRISPR/Cas系统具有编辑效率高、特异性强、花费低、对实验技术要求低等优势。其中Ⅱ型和Ⅴ型CRISPR/Cas系统分别仅需要单个Cas9蛋白和单个Cpf1蛋白作为切割双链DNA的工具,因此特别受到研究者们的青睐。目前CRISPR/Cas9技术已成功应用于斑马鱼、小鼠、人类细胞等真核生物的基因组编辑中,并取得一系列重要成果,但在细菌领域进行的相关研究并不多。文中将简单描述CRISPR/Cas系统及其作用机制,重点介绍该系统的优化以及近年来其在细菌学领域所取得的进展。 | 傅俊豪 杨发誉 谢海华 谷峰 | 2019 | 生物工程学报2019，35，3： | 4 |
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