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1实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系显示文摘目的:建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方法:以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序列分别设计引物和探针,以其他多种转基因产品和非转基因小麦为对照进行特异性实验,以B73-6-1样品模拟制备10个含量梯度的添加样品进行灵敏度实验。结果:本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏度可达到0.01%(m/m)。结论:该方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确地鉴定转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系。曹际娟 徐君怡 曹冬梅 张丕桥 栾凤侠 刘洋 2014食品科学2014,35,8:7
2耐盐小麦中TaSC基因启动子的克隆及调控功能分析显示文摘高盐是小麦的主要非生物胁迫因子之一,发掘小麦耐盐品种中的相关基因,分析其调控机理,有助于解析小麦耐盐性机制。本文利用TAIL-PCR和电子克隆的方法,从耐盐小麦RH8706-49中克隆了耐盐基因Ta SC的启动子序列,命名为ProTaSC。该DNA序列中存在多个顺式作用元件,包含与非生物胁迫响应有关的ABA响应元件(ABRE)和MYB蛋白结合位点(MBS)各1个。以GUS为报告基因,对克隆的启动子序列及不同长度的5′端缺失片段的表达活性分析表明,克隆的全长片段及2个5′端缺失的片段(681 bp和1096 bp)均能启动GUS表达,而小于等于343 bp的片段不具备启动功能,说明ProTaSC中从-681位到–343位核苷酸之间的区域为核心启动子区。在ProTaSC:GUS转基因拟南芥的根、叶片、花药、萼片及成熟角果的果荚壳中均检测到GUS蛋白,而在主茎、花瓣、幼果和种子中没有检测到GUS,表明ProTaSC是组织表达特异性启动子。对ProTaSC:GUS转基因拟南芥在NaCl(200 mmol L^(-1))和ABA(10μmol L^(-1))胁迫处理后的GUS定量分析表明,ProTaSC是受NaCl和ABA显著诱导表达的功能序列。焦博 柏峰 李艳艳 路佳 张肖 曹艺茹 葛荣朝 赵宝存 2018作物学报2018,44,4:3
3转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测显示文摘转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明:Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。冯翠莲 万玥 冯小艳 王俊刚 赵婷婷 王文治 沈林波 张树珍 2021热带作物学报2021,42,9:3
4转基因作物安全评价的检测技术显示文摘转基因作物的生物安全问题已成为全球的关注焦点,世界各国和各国际组织相继制定了相关的法律法规来加强转基因作物的安全管理。转基因作物的安全问题需要对其进行转基因生物安全评价,而转基因作物的检测评价技术是判定转基因作物是否安全的关键。笔者综述了当前转基因作物的主要检测技术和安全评价技术,重点阐述了非目标的组学技术包括转录组学、蛋白质组学和代谢组学,在转基因作物的非预期影响的安全评价中的应用。易小平 谭燕华 彭存智 谢翔 贺萍萍 2015热带生物学报2015,6,1:2
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