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1Tiam1表达与胃癌侵袭转移关系的临床和实验研究显示文摘目的检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)在正常胃黏膜组织、胃癌组织以及胃癌细胞系中的表达,探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法(1)应用免疫组化SABC法检测60例胃癌及正常胃黏膜组织中Tiam1蛋白的表达并分析其与胃癌临床病理参数间的关系。(2)应用逆转录PCR和SABC免疫组化技术分别检测Tiam1mRNA与蛋白在胃癌MKN45细胞(MO)及其高(MH)、低(ML)侵袭转移亚株中的表达,分析其与胃癌细胞侵袭转移能力的关系。结果(1)Tiam1蛋白在正常胃黏膜组织中阴性表达显著低于癌组织(0vs78.3%),两者差异有统计学意义(P<0.01),且随胃癌组织分化程度的降低、浸润深度的增加、TNM分期的升高及伴有淋巴结转移,Tiam1蛋白染色阳性率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。但Tiam1蛋白表达水平与胃癌患者的性别、年龄、部位及癌肿大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Tiam1mRNA和蛋白在胃癌MKN45细胞高侵袭转移亚株中的表达均较其在MKN45细胞及低侵袭转移亚株中的表达为强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Tiam1表达与胃癌侵袭转移能力呈正相关,且其有可能成为反映胃癌恶性生物学行为的一种新型标志物。朱金明 余佩武 2006临床与实验病理学杂志2006,22,1:9
2组织蛋白酶B与胃肠道肿瘤显示文摘肿瘤的发生是一多阶段、多步骤的过程。近年的研究发现组织蛋白酶B与肿瘤的转移密切相关,并认为组织蛋白酶B是评价肿瘤预后的一项非常有价值的指标。本文就组织蛋白酶B的生物学特性、它在肿瘤转移过程中的作用及与胃肠道肿瘤的关系作一综述。蒯小玲 2002国外医学(消化系疾病分册)2002,22,2:5
3组织蛋白酶B酶联免疫吸附测定方法的建立显示文摘背景:组织蛋白酶B(CB)与恶性肿瘤的分期、转移和预后关系密切。目的:建立CB酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便评价肿瘤患者血清CB含量与预后的关系。方法:将含有CB cDNA的重组痘苗病毒转染Hela细胞,表达目的蛋白重组CB;经Western blot分析和制备型电泳纯化后,免疫新西兰大白兔,获得CB多克隆抗体。纯化后的抗体一部分作为固化抗体,另一部分用辣根过氧化物酶标记:棋盘滴定法确定工作浓度。结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白。制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白。重组CB免疫动物后,可获得高效价的CB多克隆抗体,用以制备相应的固化抗体和酶标抗体检测CB。结论:用重组CB免疫动物后可获得相应抗体,以建立CB检测的ELISA方法。蒯小玲 萧树东 刘文忠 任卫平 童菊芳 2002胃肠病学2002,7,6:3
4重组组织蛋白酶B的表达和纯化显示文摘背景:研究表明组织蛋白酶B(CB)与肿瘤转移相关。目的:用基因工程技术生产大量重组CB,为研究CB的生物学特性和制备CB抗体供临床检测作准备。方法:用重组痘苗病毒转染真核细胞,采用真核表达目的蛋白CB,用聚丙烯酚胺凝胶电泳和免疫印迹法鉴定目的蛋白。根据CB的分子量和等电点,用制备型电泳纯化蛋白。结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白,产量为0.12mg/10_8 细胞。重组CB的分子量(31kDa和25kDa)、等电点(4552~5.588)和免疫原性与天然CB一致。制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白。结论:运用痘苗病毒真核表达系统可以高效表达CB。蒯小玲 萧树东 任卫平 童菊芳 刘文忠 2002胃肠病学2002,7,5:3
5胃癌细胞株恶性生物学表型与Tiam 1表达关系的研究显示文摘目的:检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)在胃癌细胞中的表达,并分析与其增殖活性及侵袭、移行能力的关系。方法:采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高(MH)、低(ML)黏附亚株。应用RT-PCR和定量细胞ELISA技术分别检测Tiam 1 mRNA与蛋白在M0、ML和MH细胞中的表达;应用流式细胞仪和Boyden小室分别测定M0、ML和MH细胞的增殖周期及体外侵袭、移行能力,并分析其与Tiam 1表达间的关系。结果:MH细胞中Tiam 1 mRNA(Rv=0·855±0·051)与蛋白(RD=1·262±0·165)的表达以及其增殖指数(PI=58·06±5·41)和体外侵袭、移行能力(24·33±8·02,52·00±14·53)均较M0细胞(Rv=0·759±0·047,RD=0·911±0·104,PI=42·30±3·68,11·67±3·79,26·00±9·54)和ML细胞(Rv=0·743±0·039,RD=0·892±0·101,PI=35·96±3·32,9·67±3·06,23·67±8·50)强,且差异有统计学意义,P<0·05;但在M0、ML细胞间差异无统计学意义,P>0·05。Tiam 1表达水平与胃癌细胞的增殖活性及体外侵袭、移行能力呈正相关,P<0·05。结论:Tiam 1表达水平升高有可能促进胃癌细胞增殖活性及侵袭、移行能力的增强。朱金明 余佩武 赵永亮 2008中华肿瘤防治杂志2008,15,7:2
6Tiam 1反义寡核苷酸转染对胃癌细胞体内外侵袭转移能力的影响显示文摘背景与目的:作为细胞骨架结构调节因子,T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)与胃肠道肿瘤侵袭转移密切相关。本研究应用反义寡核苷酸(ASODN)转染技术,特异抑制胃癌细胞中Tiam 1表达,进而观察对胃癌细胞体内、外侵袭转移能力的影响。方法:采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高侵袭转移亚株(MH)。以脂质体介导将Tiam 1 ASODN转染至MH细胞中,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及定量细胞ELISA技术分别检测Tiam 1 mRNA和蛋白的表达。应用Boyden小室及裸鼠接种法分别观察ASODN转染后MH细胞在体内、外侵袭转移能力方面的改变。结果:应用0.43μmol/L Tiam 1 ASODN转染能特异性抑制胃癌MH细胞中Tiam 1 mRNA和蛋白表达(0.162±0.018,0.982±0.119),与脂质体转染组(0.789±0.054,1.237±0.108)、正义寡核苷酸(SODN)-脂质体转染组(0.754±0.039,1.234±0.103)、未转染组(0.801±0.065,1.290±0.182)相比,分别约为后三者的20.2%-21.5%、76.1%-79.6%(P〈0.05)。ASODN转染组细胞的体外侵袭、移行能力(10±3、21±9)较SODN转染组(27±10、56±13)、未转染组(26±6、53±12)明显受抑制(P〈0.05),同时ASODN转染组细胞在裸鼠体内的肺转移率(1/5=20%)也较SODN转染组(4/5=80%)、未转染组(4/5=80%)显著下降(P〈0.05)。结论:特异性ASODN转染可有效抑制Tiam 1在胃癌细胞中的表达并削弱其体内、外侵袭转移能力。朱金明 余佩武 赵永亮 2007中国癌症杂志2007,17,10:1
7T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1反义寡核苷酸转染对胃癌细胞形态及侵袭移行能力的影响显示文摘目的观察T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)反义寡核苷酸(ASODN)转染对胃癌细胞形态及体外侵袭、移行能力的影响。方法采用层黏连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高侵袭转移亚株(MH)。以脂质体介导将Tiam 1 ASODN转染至MH细胞中,并应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)及流式细胞技术分别检测Tiam 1 mRNA和蛋白的表达。采用苏木精-伊红染色、细胞骨架蛋白染色、扫描电镜技术及Boyden小室法分别观察转染与未转染MH细胞在形态学及体外侵袭、移行能力方面的变化。结果与对照组相比,应用0.43μmol/L Tiam 1 ASODN转染可特异性抑制胃癌MH细胞中Tiam 1 mRNA和蛋白的表达(P〈0.01)。Tiam 1 ASODN转染MH细胞较未转染MH细胞的体外侵袭、移行能力显著下降(P〈0.05或P〈0.01),同时转染MH细胞较未转染MH细胞膜表面突起及伪足变稀疏或缩短、细胞骨架结构紊乱程度降低、斑点状肌动蛋白小体减少。结论特异性ASODN转染可有效抑制Tiam 1在胃癌细胞中的表达并削弱其体外侵袭、移行能力,这可能是通过调整胃癌细胞骨架结构重组、降低其变形、游走能力而实现的。朱金明 余佩武 吴淼 李翠芳 2007中华胃肠外科杂志2007,10,5:1
8Tiam 1与胃癌细胞侵袭转移及与裸鼠移植瘤形成的关系显示文摘目的检测胃癌细胞中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)的表达,并分析其与胃癌细胞离体、在体侵袭转移能力的关系。方法采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高(MH)、低(ML)黏附亚株。应用RT-PCR和定量细胞ELISA技术分别检测Tiam 1 mRNA与蛋白在M0,ML,MH细胞中的表达;应用Boyden小室法测定M0,ML,MH细胞的离体侵袭移行能力,并分析其与Tiam 1表达的关系。应用裸鼠接种法观察M0,ML,MH细胞的在体成瘤及转移能力。结果MH细胞中Tiam 1 mRNA(RV=0.855±0.051)与蛋白的表达(RD=1.262±0.165)以及其离体侵袭转移能力(24.33±8.02,52.00±14.53)、在体裸鼠肺转移率(4/5=80%)均较M0细胞(RV=0.759±0.047,RD=0.911±0.104,11.67±3.79,26.00±9.54,2/5=40%),ML细胞(RV=0.743±0.039,RD=0.892±0.101,9.67±3.06,23.67±8.50,1/5=20%)为强,统计学差异显著(P<0.05),但在M0,ML细胞间无统计学差异(P>0.05);Tiam 1表达水平与胃癌细胞的侵袭转移能力呈完全及高度正相关(P<0.05)。结论Tiam 1表达水平升高有可能促进胃癌细胞侵袭转移能力的增强。朱金明 余佩武 赵永亮 2007中国普通外科杂志2007,16,9:1
9T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1反义核酸抑制胃癌细胞侵袭黏附的研究显示文摘T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)是与胃癌侵袭转移密切相关的细胞骨架调节因子。我们采用反义技术抑制胃癌高侵袭转移细胞株中Tiam 1的表达,并观察对其体外黏附和侵袭、移行能力的影响。朱金明 余佩武 赵永亮 2007中华实验外科杂志2007,24,10:1
10Tiam 1表达下调对胃癌细胞骨架及裸鼠体内成瘤转移影响的观察显示文摘目的:观察T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)反义寡核苷酸(ASODN)转染对胃癌细胞骨架及裸鼠体内成瘤转移能力的影响。方法:采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株中筛选获得高侵袭转移亚株(MH)。以脂质体介导将Tiam1ASODN转染至MH细胞中,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及定量细胞ELISA技术分别检测Tiam 1 mRNA和蛋白的表达。采用细胞骨架蛋白染色及裸鼠接种法分别观察Tiam1ASODN转染后MH细胞在骨架结构和裸鼠体内成瘤转移能力方面的变化。结果:应用0.43μmol/LTiam 1 ASODN转染可特异性抑制胃癌MH细胞中Tiam 1 mRNA和蛋白表达(0.162±0.018,0.982±0.119),与脂质体转染组(0.789±0.054,1.237±0.108)、正义寡核苷酸(SODN)-脂质体转染组(0.754±0.039,1.234±0.103)、未转染组(0.801±0.065,1.290±0.182)相比,分别为后3者的20.2%~21.5%、76.1%~79.6%(P=0.000、0.037)。同时ASODN转染组细胞在裸鼠体内的肺转移率25%(2/8)也较未转染组88%(7/8)、正义寡核苷酸组75%(6/8)显著下降(P=0.039),且其胞膜表面突起及伪足变稀疏或缩短、骨架结构紊乱程度减轻。结论:特异性ASODN转染可有效抑制Tiam 1在胃癌细胞中的表达并削弱其体内侵袭转移能力,这可能是通过调整胃癌细胞骨架结构重组,降低其变形、游走能力而实现的。朱金明 余佩武 赵永亮 2008中华肿瘤防治杂志2008,15,23:0
11不同亚型胃癌细胞株裸鼠移植瘤中组织蛋白酶B的表达显示文摘目的:研究组织蛋白酶B(CB)在裸鼠移植瘤中的表达及其与不同亚型胃癌细胞株体内成瘤性的关系。方法:以体外层粘素(laminin)粘附法筛选获得的两株MKN45胃癌细胞亚株:对层粘素高粘附力(Lm+)的细胞亚株和低粘附力(Lm-)的细胞亚株建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,应用免疫组化及原位杂交方法观察荷瘤组织中CB的表达情况。结果:Lm+细胞株瘤块与周围组织粘连较Lm-瘤块明显。免疫组化和原位杂交均显示移植瘤组织中的CB表达增强,且Lm+瘤块的表达强于Lm-瘤块,以肿瘤边缘表达最强。结论:CB在胃癌细胞株移植瘤中的表达增强,尤以Lm+细胞株为著,其表达上调可能与癌细胞株的体内侵袭行为有关。华静 任卫平 陆伦根 刘颐 彭延申 萧树东 2002胃肠病学2002,7,3:0
12反义抑制Tiam 1对胃癌细胞形体重塑影响的实验研究显示文摘目的观察T淋巴细胞瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)反义寡核苷酸(ASODN)转染对胃癌细胞形体重塑的影响。方法采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高侵袭转移亚株(MH)。以脂质体介导将Tiam1ASODN转染至MH细胞中,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞技术分别检测Tiam1mRNA和蛋白的表达。采用HE染色、细胞骨架蛋白染色及扫描电镜技术观察转染与未转染MH细胞在形态学方面的不同。结果与未转染组相比,应用0.43μmol/L Tiam 1 ASODN转染可特异性抑制胃癌MH细胞中Tiam 1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);转染MH细胞的膜表面突起及伪足变稀疏或缩短,细胞骨架结构紊乱程度降低,斑点状肌动蛋白小体减少。结论特异性ASODN转染可有效抑制Tiam1在胃癌细胞中的表达及胃癌细胞形体重塑,这可能对胃癌细胞的侵袭转移产生影响。朱金明 余佩武 李翠芳 吴淼 赵永亮 2008中国普外基础与临床杂志2008,15,1:0
13T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1的表达及骨架结构差异与胃癌细胞恶性行为的关系显示文摘本研究通过检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam-1)在具有不同侵袭转移能力胃癌细胞中的表达,初步探讨了其与胃癌细胞恶性行为的关系,并对与之相关的形态结构学特点作了初步分析。朱金明 余佩武 赵永亮 2008中华普通外科杂志2008,23,1:0
14T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行能力的相关性研究显示文摘目的:检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam 1)在胃癌细胞株中的表达并分析其与胃癌细胞侵袭、移行能力的关系。方法:采用层黏连蛋白黏附法,从胃癌MKN-45细胞株(MO)中筛选获得高黏附亚株(MH)和低黏附亚株(ML)。应用RT-PCR和SABC免疫组化技术分别检测Tiam 1 mRNA与蛋白在MO、ML、MH细胞中的表达。应用Boyden小室测定MO、ML、MH细胞的体外侵袭、移行能力并分析其与Tiam1表达间的关系。结果:胃癌MKN-45细胞高黏附亚株(MH)的体外侵袭、移行能力均较MKN-45细胞(MO)及其低黏附亚株(ML)为强(P<0.05),但MO与ML细胞间无差异(P>0.05)。Tiam 1 mRNA和蛋白在MH细胞中的表达均较其在MO和ML细胞中的表达为强(P<0.05),但在MO与ML细胞中的表达无差异(P>0.05)。Tiam 1蛋白和mRNA表达水平与胃癌细胞体外侵袭、移行能力呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论:Tiam 1基因表达水平升高有可能促进胃癌细胞侵袭、移行能力的增强。朱金明 余佩武 李翠芳 赵永亮 2007中国现代普通外科进展2007,10,3:0
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