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| 1 | 钠碘转运体应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性研究显示文摘目的:探讨杆状病毒介导的人钠碘转运体(human sodium/iodine symporter,hNIS)应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性。方法:通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统包装分别含GFP和hNIS的重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-hNIS),用流式细胞仪检测Bac-GFP对人下咽癌细胞(FaDu)的转导效率,并用间接免疫荧光检测hNIS在FaDu细胞中的定位。进行hNIS介导的碘摄取、动态摄碘和NaClO4碘摄取抑制实验,并检测共转染了Bac-GFP和Bac-hNIS的FaDu细胞中的荧光强度和放射性计数。结果:在丁酸钠的作用下,Bac-GFP在感染复数为400时,对FaDu细胞的转导效率可达95.16%;hNIS可准确定位于FaDu细胞膜上,具备摄碘功能;放射性计数与荧光强度间呈线性正相关(相关系数为0.943),可通过放射性计数的变化来反映荧光强度的变化。结论:杆状病毒对FaDu细胞具有高转导效率,Bac-hNIS可有效介导FaDu细胞的碘摄取,hNIS可用于人下咽鳞癌的显像和诊断。 | 王建章 刘帅 王俊 张美丽 王安琪 张一帆 李彪 蔡昌枰 王士礼 | 2013 | 诊断学理论与实践2013，12，4： | 1 |
| 2 | 双启动子共表达杆状病毒载体的构建和鉴定显示文摘目的 探讨双启动子共表达杆状病毒载体作为双基因传递载体的可行性.方法 利用分子克隆技术将分别由巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)启动子介导下的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和胶质细胞源形神经生长因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)克隆到pFastBac Dual载体中,得到重组质粒pFastBac Dual-CMV-EGFP-CMV-GDNF,并利用Lipofectamine 2000将其转染到HEK293T细胞,通过间接免疫荧光法检测EGFP和GDNF的表达情况.按照Bac-to-Bac杆状病毒表达系统手册进行杆状病毒的包装,将获得的重组病毒Bac Dual-CMV-EGFP-CMV-GDNF转导Hela细胞,通过间接免疫荧光法和Western blot检测EGFP和GDNF的表达情况.结果 重组质粒pFastBac Dual-CMV-EGFP-CMV-GDNF成功构建;重组病毒Bac Dual-CMV-EGFP-CMV-GDNF成功包装;EGFP和GDNF实现了在293T细胞中和Hela细胞中的共表达.结论 pFastBac Dual载体为一个有效的双基因传递载体,为多基因联合治疗提供了一个强有力的病毒载体. | 王建章 王俊 张美丽 王安琪 蔡昌枰 王士礼 张一帆 李彪 刘帅 | 2013 | 国际病毒学杂志2013，20，5： | 0 |
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