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| 1 | 射频消融治疗肝癌对免疫功能的影响显示文摘目的:探讨射频消融对机体免疫功能的影响。材料与方法:将27只荷VX2肝癌新西兰白兔分为射频消融组(10只)、酒精注射组(10只)和实验对照组(7只),观察荷瘤兔实验前后sIL-2R变化。检测20例肝细胞癌(HCC)患者射频消融前后CD4+、CD8+、CD4+?CD8+比值和sIL-2R,并与25名健康体检者进行比较。结果:动物实验表明:射频消融组实验前后sIL-2R无显著变化;酒精注射组和实验对照组实验后sIL-2R显著升高。临床研究表明:20例HCC患者与健康对照者相比CD4+、CD4+?CD8+显著降低,sIL-2R显著增高;射频消融治疗后CD4+、CD4+?CD8+显著升高,sIL-2R显著降低。结论:射频消融治疗肝癌可在一定程度上改善患者的抗肿瘤免疫抑制状态。 | 罗葆明 王军华 潘景升 马健鸿 文艳玲 杨海云 戴晓宁 王捷 陈亚进 | 2002 | 中国临床医学影像杂志2002，13，6： | 19 |
| 2 | 冷循环射频消融治疗肝癌的疗效分析显示文摘目的 探讨冷循环射频消融治疗肝癌的方法、适应症及其疗效。方法 应用冷循环射频消融治疗肝细胞癌患者 168例共 217个病灶,其中第 1组 113例共 147个病灶,肿瘤直径 <3cm;第 2组 35例共 49个病灶,肿瘤直径 3~5cm;第 3组 20例共 21个病灶,肿瘤直径>5cm。观察治疗前后患者丙氨酸转氨酶、甲胎蛋白(AFP)、CD4+、CD8+、CD4+ /CD8+值和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)、二维及彩色多普勒血流显像、超声造影、增强CT/MRI的改变。记录患者治疗后 1、2、3年生存率。结果 第 1组病灶完全坏死率为 89. 1% (131 /147),术后 1个月AFP明显下降,术后 1、2、3年生存率分别为 96. 6% (84 /87)、71. 2% (42 /59)和 63. 0% (17 /27)。第2组病灶完全坏死率为 53. 1% ( 26 /49 ),术后 1月AFP下降,术后 1、2、3年生存率分别为 82. 1% ( 23 /28 )、63. 2% (12 /19)和 44. 4% (4 /9)。第 3组仅 4个病灶 (占 19. 0% )为完全坏死,术后 1个月仅 1例AFP下降至25μg/L以下, 1年生存率 62. 5% (10 /16), 2年生存率 44. 4% (4 /9),存活 3年以上仅 1例(1 /4)。20例肝细胞癌患者与健康对照者相比CD4+、CD4+ /CD8+显著降低,sIL 2R显著增高;治疗后CD4+值升高、CD4+ /CD8+值升高,sIL 2R显著降低。结论 射频消融治疗小肝癌可获显著疗效。 | 罗葆明 杨海云 文艳玲 智慧 马健鸿 潘景升 王军华 | 2005 | 中华超声影像学杂志2005，14，3： | 13 |
| 3 | 热化疗对颌面部鳞癌细胞热休克蛋白70表达的影响显示文摘目的探讨热化疗对颌面部鳞癌细胞热休克蛋白(HSP)70表达的影响。方法12例鳞癌患者给予每周2次,5周10次为1个疗程的热化疗处理。12例患者均静脉注射平阳霉素8mg,43℃微波热疗40min。于患者治疗前及治疗5次后取肿瘤组织制作标本。用SP免疫组织化学法观察肿瘤细胞HSP70的表达。结果热化疗1疗程结束后12例患者肉眼未见明显包块,免疫组织化学染色提示治疗中癌细胞HSP70表达增多。结论热化疗可以明显提高HSP70在肿瘤细胞中的表达,HSP70通过其抗原递呈等系列免疫效应,发挥抗肿瘤作用。 | 王升志 王锂 高向东 成洲 毕洪广 王大章 | 2005 | 华西口腔医学杂志2005，23，4： | 12 |
| 4 | 人肝癌组织中p53与HSP70相互作用的初步研究显示文摘目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用SDS PAGE及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白的存在形式。结果 :用免疫组织化学法检测到 12例肝癌组织中有 3例为双阳性 ,用抗HSP70mAb免疫共沉淀的样品 ,可检测到 p5 3蛋白。用抗p5 3mAb免疫共沉淀的样品也可检测到HSP70蛋白。结论 :人肝癌中p5 3与HSP70以复合物的形式而存在 。 | 崔崇伟 杨守京 刘雁平 刘彦仿 | 2003 | 细胞与分子免疫学杂志2003，19，2： | 12 |
| 5 | 体外构建的HSP70-肝癌抗原肽诱导抗原肽特异性免疫反应显示文摘目的 :研究体外构建的HSP70 肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力 ,为该复合物的临床应用奠定基础。方法 :在体外构建HSP70 肝癌抗原肽复合物 ,联合应用粒 /巨细胞集落刺激因子 (GM CSF)及白介素 4 (IL 4 )直接从志愿者外周血中培养出DC ;以HSP70、HSP70 肝癌抗原肽、抗原肽分别刺激DC ,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,检测其杀伤T2细胞和肝癌细胞系的能力。结果 :HSP70 抗原肽、抗原肽均可诱导CD8+的抗原肽特异性CTL ,而前者的诱导效果更强。结论 :体外构建的HSP70 抗原肽复合物具有免疫原性 ,HSP70可以增强抗原肽诱导特异性免疫反应的能力 ,HSP70 | 郭爱林 隋延仿 曲萍 张立红 叶菁 王小平 | 2001 | 中国免疫学杂志2001，17，11： | 12 |
| 6 | 肝癌热休克蛋白-抗原肽复合物的构建及诱导CTL反应的初步研究显示文摘目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%~80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。应用多肽解离液处理该组份,SephadexG-25柱过滤获得未结合多肽的蛋白分子,使其在体外与肝癌抗原肽SLIVHLNEV结合,构建成热休克蛋白-抗原肽复合物。应用此复合物刺激树突状细胞,激活同源外周血T淋巴细胞产生肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞(CTL),应用MTT法检测其对T2细胞及肿瘤细胞的杀伤活性。结果:所得蛋白经电泳及Westernblot进行蛋白分子量及性质鉴定为热休克蛋白70。SephadexG-25柱双分离法证实应用上述方法成功构建了肝癌热休克蛋白70-抗原肽复合物,用该复合物负荷树突状细胞在体外可以诱导出较强的肝癌抗原肽特异性CTL,可以杀伤负荷有该肽的T2细胞及递呈该肽的肿瘤细胞系。结论:体外构建的热休克蛋白-抗原肽复合物可以增强抗原肽诱导CTL反应能力,热休克蛋白是良好的T细胞免疫佐剂,有可能在肿瘤疫苗治疗中发挥重要作用。 | 郭爱林 隋延仿 张立红 曲萍 王小平 叶菁 | 2001 | 中国肿瘤临床2001，28，10： | 9 |
| 7 | 胃癌Hsp70-肽复合物致敏树突状细胞抗肿瘤作用的研究显示文摘目的探讨胃癌Hsp70-肽复合物致敏树突状细胞(DC)抗肿瘤作用。方法采用GM-CSF,IL-4刺激,培养胃癌患者外周血单个核细胞,增殖产生大量DC,用离子交换层析法从临床胃癌组织中提取Hsp70肽复合物,并行westernbolt鉴定,Hsp70-肽复合物修饰DC,通过细胞因子检测试剂盒对修饰DC上清液进行检测,用DC激活混合T淋巴细胞,观察其对胃癌细胞的杀伤作用。用未被Hsp70-肽复合物修饰DC作对照。结果Hsp70-肽复合物DC分泌IL-12、TNF-α、IL-1β含量分别为(305.02±20.70)pg/ml、(480.61±32.52)pg/ml和(519.60±39.12)pg/ml,而未被Hsp70修饰DC分泌IL-12、TNF-α、IL-1β的含量分别为(3.81±0.84)pg/ml、(3.50±0.21)pg/ml、(50.11±2.86)pg/ml,两者比较,有显著性差异(P<0.01)。Hsp70修饰DC激活的T淋巴细胞后对胃癌细胞的杀伤率为(93.54±8.26)%明显高于对照组的(6.20±0.38)%(P<0.01)。结论胃癌Hsp70-肽复合物致敏DC并激活T淋巴细胞后对胃癌细胞具有很强的杀伤作用。 | 袁庆文 刘学政 刘学农 江平发 | 2005 | 江西医学院学报2005，45，3： | 7 |
| 8 | 射频消融和酒精注射治疗兔肝肿瘤的对比研究显示文摘目的 探讨射频消融和酒精注射治疗兔肝肿瘤对兔免疫功能、肝功能、组织病理学及荷瘤生存期的影响。方法 超声引导下制作VX2 肝肿瘤模型兔 2 1只 ,随机分为 3组 ,分别给予射频消融、酒精注射治疗和实验对照。所有兔在穿刺接种前、手术前及手术后 3周抽外周血测可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)、丙氨酸转氨酶 (ALT) ,记录荷瘤生存期 ,观察肿瘤病理学改变。结果 各组兔接种后 2周与正常兔比较、酒精注射组及实验对照组手术前与手术后 3周比较 ,sIL 2R均显著性升高 ;射频治疗组手术前与手术后 3周比较 ,sIL 2R无变化 ;射频治疗组兔荷瘤生存期比其他 2组长 ,酒精注射组与对照组差异无显著性意义。病理检查 :射频治疗组肿瘤呈凝固性坏死 ,坏死区包括肿瘤区细胞和周围部分正常肝组织细胞 ,酒精注射组病灶内部分肿瘤细胞发生变性甚至坏死 ;酒精注射组术后 3周ALT显著升高 ,射频治疗组则无明显变化。结论 酒精注射加重肝功能损害 ,射频消融不加重肝功能损害 ;射频消融致肿瘤细胞完全坏死 ,酒精注射组肿瘤细胞坏死不完全 ;射频消融组荷瘤兔的生存期较其他两组显著延长 ; | 罗葆明 王军华 马健鸿 潘景升 杨海云 戴晓宁 文艳玲 | 2002 | 中华超声影像学杂志2002，11，10： | 6 |
| 9 | HSP70-Id复合物修饰的树突状细胞体外诱导特异性抗肿瘤作用显示文摘目的观察人慢性B淋巴细胞性白血病(B-CLL)细胞的独特型抗原Id-ScFv与热休克蛋白70(HSP70)形成复合物修饰的树突状细胞(DC)体外诱导特异性抗肿瘤作用,并初步探讨其机制。方法将HSP70与Id-ScFv体外结合形成复合物HSP70-Id,修饰自人外周血单核细胞获取的DC。倒置相差显微镜观察DC的形态特征,流式细胞仪检测修饰前后DC的表型变化,酶联免疫吸咐试验(ELISA)检测DC分泌的白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测修饰的DC对自身淋巴细胞的激活和增殖作用,流式细胞仪检测激活的自身淋巴细胞T细胞亚群的变化,台盼蓝染色法检测其对Daudi、K562和HepG2等细胞的杀伤作用。结果DC体外诱导培养成功,HSP70-Id复合物可使DC成熟,镜下可见典型的DC形态,其CD1a表达率为20%~30%,CD83表达率>72%,CD86和HLA-DR表达显著增加(P<0.05),上清中IL-12、TNF-α亦显著高于DC对照组(P<0.01)。HSP70-Id复合物修饰的DC激活自身淋巴细胞,对Daudi细胞的杀伤率为71.24%,而对K562细胞杀伤作用较弱,对HepG2细胞无明显作用。其淋巴细胞亚群中,CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例均显著增加,分别为56.51%和70.21%,CD4+T细胞/CD8+T细胞比值由空白对照组的1.49倒置为0.81。结论HSP70-Id复合物修饰的DC生物学活性增强,经其刺激后,传代培养的淋巴细胞可产生高效而特异性的抗肿瘤免疫效应,可能是CD4+T细胞、CD8+T细胞及DC协同作用的结果。 | 王志华 叶庆 胡志全 叶章群 余虓 沈关心 | 2006 | 中华肿瘤杂志2006，28，7： | 6 |
| 10 | 水牛热休克蛋白70基因克隆及其表达分析显示文摘【目的】克隆水牛热休克蛋白70基因(HSP70)并进行生物信息学分析,同时明确HSP70基因在水牛成熟卵母细胞(MII期)和2-细胞期胚胎中的表达情况,为研究HSP70在水牛卵母细胞成熟及着床前早期胚胎发育中的作用机理提供理论依据。【方法】根据NCBI已公布的水牛HSP70基因mRNA预测序列(MH814759.1)设计引物,通过RT-PCR克隆水牛HSP70基因,运用DNAStar、MEGA 7.0、TMHMM 2.0及SignalP 4.1 Server等在线软件进行生物信息学分析;同时采用细胞免疫荧光分析HSP70在水牛成熟卵母细胞及2-细胞期胚胎中的表达情况。【结果】水牛HSP70基因编码区(CDS)长度为1926 bp,共编码641个氨基酸残基。克隆获得的水牛HSP70基因序列与NCBI已公布水牛HSP70基因mRNA预测序列(MH814759.1)的相似性高达97.7%;与牛、家犬、山羊、小鼠、绵羊和大鼠的HSP70基因序列具有较高的相似性,其中与牛的相似性高达99.1%。基于HSP70基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示,水牛与牛的亲缘关系最近。水牛HSP70分子量为70.27 kD,分子式为C3088H4967N8670972S15,理论等电点(pI)为5.67,不稳定系数为32.84,属于稳定蛋白;不存在跨膜结构及信号肽,主要定位于细胞质(60.9%)、细胞核(30.4%)及线粒体(8.7%),其亲水性较强;水牛HSP70蛋白结构以α-螺旋和β-折叠为主。HSP70在水牛成熟卵母细胞及2-细胞期胚胎中均有表达,且主要集中在细胞质。【结论】水牛HSP70基因在进化过程中具有高度的保守性,在水牛成熟卵母细胞和着床前早期胚胎中均有表达,且主要集中在细胞质,属于结构型HSP70。 | 汤玉燕 姚顺 濮黎萍 赵秀玲 陈东荣 张鹏飞 张明 | 2021 | 南方农业学报2021，52，9： | 3 |
| 11 | 热休克蛋白gp96的纯化及其对荷肝癌小鼠的治疗作用显示文摘 | 杨威 曹春霞 潘承恩 | 2001 | 中华医学杂志2001，81，24： | 3 |
| 12 | 人舌癌Tca8113细胞热休克蛋白多肽复合物(HSP70-PC)的提取和鉴定显示文摘采用ADP-Agarose亲和层析结合DEAE离子交换对Tca8113细胞的HSP70-PC进行分离纯化。结果显示在NaCl250~350mmol/L浓度处出现一洗脱峰,收集此峰各组分,经10%SDS-PAGE、在相对分子质量70000处可见清晰单一蛋白条带,电泳后于第5峰发现相对分子质量为70000的蛋白,此蛋白被洗脱的盐浓度为NaCl250~350mmol/L,此即为高纯度的HSP70-PC。HSP70获得率为1g湿重的Tca8113细胞能纯化85μg的HSP70-PC。采取低渗匀浆、超速离心、ConA-Sepharose亲和层析、ADP-Agarose亲和层析及DEAE离子交换的纯化方案,可获得高纯度的HSP70-PC。 | 肖林 梁新华 胡静 肖胤 毛祖彝 | 2010 | 实用口腔医学杂志2010，26，5： | 2 |
| 13 | 快速蛋白液相色谱系统纯化肺癌组织热休克蛋白70及其鉴定显示文摘目的:从肺癌组织中纯化并鉴定热休克蛋白70(HSP70),为研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗奠定基础。方法:用组织蛋白裂解液从肺癌组织中提取总蛋白,应用ConA-sepharose亲和层析和快速蛋白液相色谱系统(FR-LC)连续分离、梯度洗脱获得蛋白,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot进行蛋白相对分子质量及免疫原性鉴定。结果与结论:所获蛋白的相对分子质量为70000,经Western-blot鉴定为HSP70。 | 张慧珍 杨继要 范清堂 许东 吴逸明 | 2007 | 郑州大学学报(医学版)2007，42，1： | 2 |
| 14 | 鹅热休克蛋白70的表达提纯与病毒复合物形成的研究显示文摘【目的】为研究HSP70在热应激时的特异性表达、组织中HSP70的分离纯化及其结合抗原肽形成复合物的特性,设计此试验。【方法】选取6w健康五龙鹅60只随机分为3组,对照组鹅不经热处理,试验1组鹅进行1次(42±1)℃、5h的急性热处理后立即宰杀,试验2组鹅经热处理后在正常饲养条件下恢复12h后宰杀。取心脏,常规石蜡切片做免疫组化试验;肝脏用于提纯HSP70。比较处理组鹅心脏HSP70表达的差异,同时对肝脏中HSP70进行分离纯化、鉴定。纯化后的HSP70和人工合成的乙肝病毒前S1多肽相结合形成复合物,以双特异抗体夹心法检测其复合物的形成。【结果】热应激状态下心肌纤维中有广泛的HSP70阳性颗粒,试验1组HSP70表达部位重点在核膜及其周围,阳性细胞率为76.0%,试验2组HSP70表达部位转移到胞膜周围,阳性细胞率为88.4%。通过两套纯化方案纯化蛋白均可得到HSP70纯化物,蛋白纯度分别为85.0%和95.0%,蛋白得率分别为0.115mg·g-1和0.157mg·g-1。一定条件下合成肽与HSP70纯化物形成复合物,双特异性抗体夹心法检测复合物为阳性,复合物效价为1﹕81,表明试验中有复合物的形成。【结论】热应激时HSP70的特异性表达部位,在不同时间有所转移,显示HSP70在细胞保护中可能具有一定的功能。在低压层析条件下可以得到高纯度的HSP70蛋白,相比较而言,分子筛初步分离、ConA琼脂糖层析和ADP琼脂糖层析这一流程的纯化效果更好。在一定条件下,人工合成肽可以与HSP70相结合形成复合物,这将为进一步证明复合物的免疫作用提供试验基础。 | 吴晓平 王宝维 张旭晖 王斌 贾晓晖 张名爱 龙芳羽 杨志刚 王雷 | 2007 | 中国农业科学2007，40，9： | 2 |
| 15 | HeLa细胞HSP-70体外诱导抗瘤免疫活性细胞的研究显示文摘背景与目的:近来的研究证实,动物肿瘤细胞表达的热休克蛋白(heatshokproteinHSP)可携带肿瘤抗原,并能诱导抗瘤特异性T淋巴细胞的免疫应答。本文旨在探讨用HeLa细胞HSP-70多肽诱导的免疫活性细胞(immunecompetentcell,ICC)及其特异性抗肿瘤机制。方法:用热休克处理的HeLa细胞提取的HSP-70多肽剌激正常人外周血单个核细胞(PBMCs),在剌激扩增前后测定T淋巴细胞表型,并测定扩增的免疫活性细胞对HeLa细胞的杀瘤活性。结果:在扩增前后CD3+淋巴细胞百分率为(57.68±1.46)%和(85.73±1.44)%(P<0.002),CD8+淋巴细胞百分率为(23.56±1.86)%和(48.06±1.66)%(P<0.002)。该免疫活性细胞对HeLa细胞和来源于病人的宫颈癌细胞都具有较高的杀伤活性犤(82.69±1.97)%和(62.11±1.61)%犦,而对经HSP-70单抗封闭后的HeLa细胞的杀伤活性犤(31.05±2.09)%犦则明显下降。结论:HeLa细胞HSP-70多肽能有效刺激PBMCs诱导活化免疫活性细胞,该免疫活性细胞具有特异性抗肿瘤作用。 | 韩彩芝 刘京生 许顺江 郑秀芳 魏丽君 | 2002 | 癌症2002，21，10： | 2 |
| 16 | 热休克蛋白70多肽复合物与肿瘤免疫显示文摘 | 胡廷辉 应敏刚 | 2006 | 福建医科大学学报2006，40，3： | 2 |
| 17 | 射频消融联合肝动脉栓塞化疗术在肝癌治疗中的应用进展显示文摘随着微创技术的应用发展,射频消融术(Radiofrequency ablation,RFA)和肝动脉栓塞化疗术(Transcatheter arterial chemoembelization,TACE)成为肝癌治疗的有效途径。RFA通过离子震荡产生高温,破坏肿瘤细胞生物结构,造成肿瘤细胞死亡,并在肿瘤消亡过程中增强细胞免疫,增加抗肿瘤能力。TACE可以有效杀伤癌细胞和阻断肿瘤血液供应,缩小肿瘤。RFA联合TACE,可发挥两者的优势,使〈3—5cm肝癌的5年生存率甚至高于手术切除,并有反复治疗补救不足的可能。 | 李明建 李森 | 2007 | 中国现代普通外科进展2007，10，6： | 1 |
| 18 | 硒酸壳聚糖通过线粒体途径诱导A549细胞凋亡的初步研究显示文摘本文研究了硒酸壳聚糖(SC)对非小细胞肺癌A549增殖抑制及诱导凋亡作用,并进一步研究了SC对其凋亡前后蛋白差异表达。采用MTT法检测了SC对A549细胞的增殖抑制作用;并用激光共聚焦分别观察了Hoechst33342/PI染色后A549细胞形态的变化以及钙黄绿素染色后细胞线粒体MPTP的开放状况;流式细胞仪检测了SC对A549细胞线粒体跨膜电位的影响;利用2-DE结合MALDI-TOF质谱技术检测了细胞凋亡相关蛋白的差异表达。结果表明:SC对A549细胞具有显著的增殖抑制作用,并在一定范围内呈现时间和浓度依赖性;SC可使A549细胞发生形态改变,使细胞变得不规则,染色质固缩和边集;经SC处理后,细胞的线粒体膜通道逐渐开放;经MALDI-TOF鉴定发现了2个差异表达的蛋白,即抗增殖蛋白(prohibitin isoform 1),细胞内热休克蛋白(heat shock protein)。 | 张少净 刘安军 王鹏飞 郑国强 | 2017 | 现代食品科技2017，33，4： | 1 |
| 19 | HSP70在子宫颈鳞癌中的表达及与P53、c-myc表达的关系显示文摘目的 :探讨热休克蛋白 70 (heatshockprotein 70 ,HSP70 )在宫颈鳞癌组织中的表达 ,以及它与抑癌基因p5 3、原癌基因c myc表达之间的关系。方法 :采用免疫组化SABC法检测正常宫颈上皮组织、癌前病变宫颈上皮组织和浸润性宫颈鳞癌组织中HSP70、P5 3蛋白、c myc蛋白的表达 ,并分析其相互关系。结果 :HSP70在正常宫颈上皮组织、癌前病变宫颈组织和浸润性宫颈鳞癌组织中的免疫组化记分呈递增趋势 ,两两相比差异有显著性。HSP70免疫组化记分随鳞癌组织分化程度降低而升高。浸润性宫颈鳞癌中P5 3蛋白阳性组和c myc蛋白阳性组HSP70组织化学记分分别高于P5 3阴性组和c myc阴性组。结论 :HSP70表达与宫颈鳞癌发生发展有关 ,且与较低分化程度有关。HSP70可能通过与P5 3蛋白和c | 乔玉环 李秀芳 史惠蓉 | 2001 | 现代妇产科进展2001，10，6： | 1 |
| 20 | 食管癌细胞株热休克蛋白70肽复合物的提纯及抗肿瘤活性观察显示文摘目的:利用抗体亲和层析法从食管癌细胞内提纯热休克蛋白70肽复合物(heatshockprotein70peptide complexes,HSP70PCs),观察其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对食管癌细胞的杀伤作用。方法:常规方法造成EC109细胞热休克,偶联HSP70抗体的CNBr-Sepharose4B亲和层析柱分离纯化蛋白,SDS- PAGE凝胶电泳、Westernblot检测获得的蛋白;混合淋巴细胞反应检测纯化过程中收集的蛋白粗提液、PBS洗脱蛋白及解吸附剂洗脱蛋白对食管癌细胞的杀伤活性。结果:细胞经热休克作用,裂解后获蛋白粗提液,经亲和层析柱过柱、洗脱后得到的蛋白经电泳鉴定为相对分子质量在70000左右的单一条带,且经Westernblot鉴定可与HSP70单克隆抗体结合,证实为HSP70;MTT法检测解吸附剂洗脱蛋白诱导的CTL对食管癌细胞的杀伤率为(38.10±2.78)%,明显高于蛋白粗提液(22.22±2.54)%和PBS洗脱蛋白(17.46±3.89)%,P均<0.05。结论:利用抗体亲和层析法,能够简便地从热休克处理过的食管癌细胞株中分离纯化HSP70PCs,且所获得的HSP70PCs具有较强的激活CTL杀伤食管癌细胞的生物学活性。 | 周娟 李永欣 孙战强 李静静 刘光辉 祁元明 | 2006 | 郑州大学学报(医学版)2006，41，3： | 0 |
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