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| 1 | 农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究显示文摘【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术,为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法】本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记,利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测,通过检测线T信号值与质控线C信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品,研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检测技术进行方法学考核,以花生、稻米、植物油等为例,进行实际样品检测,并与HPLC法进行结果比对。【结果】在花生、稻米、植物油等农产品实际样品检测中,本研究建立的时间分辨荧光免疫层析检测技术检测黄曲霉毒素B1得到检测限均为0.3μg·kg-1,线性范围分别为0.8—25、0.8—15和0.8—30μg·kg-1。上述3种农产品对应的标准曲线的线性方程分别为y=0.238x+0.654(R2=0.992)、y=0.321x+0.811(R2=0.990)和y=0.146x+0.173(R 2=0.993),标准偏差分别为0.024、0.039和0.021。该方法的批内准确度和精密度添加回收试验结果表明,添加回收率在81.0%—113.0%,变异系数在7.2%—14.2%;批间准确度和精密度试验结果显示,添加回收率在75.8%—114.9%,变异系数在7.7%—15.3%。说明该检测技术批内、批间均具有良好的准确度和精密度。该方法与HPLC法检测结果相比,相对误差小于10%,说明黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析技术与行业标准方法检测结果具有良好的一致性。【结论】时间分辨荧光免疫层析检测技术灵敏度高、线性范围宽,重复性和稳定性好,是一种适合中国国情的实用快速检测技术,具有广阔的应用前景。 | 张兆威 李培武 张奇 丁小霞 | 2014 | 中国农业科学2014，47，18： | 30 |
| 2 | 时间分辨荧光在免疫分析中的应用进展显示文摘时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)是依赖于稀土元素独特的荧光性质而发展起来的一种免疫检测技术,它集合了放射免疫技术、酶联免疫技术以及普通荧光免疫技术的优点,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好,且线性范围宽,荧光寿命长,操作简单和非放射性等特点,在免疫分析领域展现了良好的应用前景。围绕时间分辨荧光在免疫分析中的最新研究进展,介绍了几种常见的用于TRFIA的材料,阐述了TRFIA在免疫诊断、食品检测、环境监测等方面的应用,并对其发展方向和应用前景进行了展望。 | 李媛 毛翔 胡军 杨海 王怀记 | 2021 | 公共卫生与预防医学2021，32，3： | 8 |
| 3 | 环境相关浓度MC-LR作用对营养生长期水稻生长和抗氧化酶活性的影响显示文摘以水稻为受试生物,考察暴露浓度为0、0.1、1、10、50μg·L-1的MC-LR分别水培暴露7、15、20、34 d对水稻生长和根部部分酶活性的影响,考察指标包括水稻的株高、根长、鲜重、光合作用系统以及根系中过氧化物酶、谷胱甘肽酶、蛋白磷酸酶和丙二醛活性。34 d实验结束后,相比对照组,0.1、1μg·L-1MC-LR作用下水稻根长分别增加了6.94%和6.06%,而50μg·L-1MC-LR作用下水稻根长显著减少了8.71%。MC-LR暴露能显著诱导水稻抗氧化系统部分关键指标(如POD和GSH),并且随着暴露时间的延长,诱导作用更加明显。0.1μg·L-1MC-LR暴露20、34 d后,相对于对照组POD分别抑制了58.51%和8.09%。50μg·L-1MC-LR暴露34 d后,POD、GSH和PP分别降低了38.52%、45.86%和52.51%。上述结果表明长期暴露在环境相关浓度下的MC-LR可能会对陆生植物产生毒性效应。 | 张敏敏 姜锦林 周军英 单正军 卜元卿 续卫利 | 2014 | 农业环境科学学报2014，33，12： | 4 |
| 4 | 微囊藻毒素-LR的生物素-亲和素-时间分辨荧光免疫分析法显示文摘目的运用生物素-亲和素信号放大系统,建立高灵敏的微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测方法。方法采用5μg/ml二抗Ig G包被板,样品中的MC-LR与生物素-MC-LR半抗原(1∶300)竞争限量抗MC-LR抗体(1∶1 000),用铕标记的链霉亲和素示踪,采用TRFIA法检测水样中的MC-LR含量。结果在0.1~5 ng/ml的线性范围内,得到MC-LR-TRFIA的回归方程为y=-29 132x+38 057,r=0.991 5。方法的灵敏度为0.02 ng/ml,平均回收率为80.2%~102.0%,批内和批间的RSD分别为4.3%~8.1%和9.9%~15.2%。该方法检测MC-LR与MC-YR和MC-LF的交叉率均小于10%。结论基于生物素-亲和素信号放大系统的MC-LR-TRFIA方法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于水中MC-LR浓度的检测。 | 张艺 黄飚 金坚 陈蕴 赵春城 张珏 | 2015 | 环境与健康杂志2015，32，1： | 4 |
| 5 | 太湖水体微囊藻毒素-LR及相关因子时空分布显示文摘目的掌握太湖水体中微囊藻毒素(MC-LR)及相关因子的时空分布,为太湖周边城市安全供水提供基础数据。方法 2010年1月-2011年12月,在太湖水体中设置15个采样点,每月采集一次样品,采用高灵敏时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测各样品中MC-LR的浓度,同时监测藻类密度、水温、高锰酸盐指数、氨氮、叶绿素a等指标。结果太湖水体中MC-LR浓度高峰出现在11月份,枯水期浓度(0.129±0.024μg/L)显著高于丰水期(0.087±0.008μg/L)(t=25.71,P=0.0012),北部(0.150±0.028μg/L)和西部(0.121±0.014μg/L)的平均浓度均显著高于东部(0.077±0.015μg/L)、南部(0.076±0.014μg/L)和中部(0.075±0.012μg/L)(均P<0.001);而藻类密度以9月份最高,丰水期浓度[(913±548)万个/L)]高于枯水期[(467±170)万个/L](t=10.71,P=0.0054),南部[(1 061±409)万个/L]和中部[(1 039±556)万个/L]均显著高于西[(580±216)万个/L]、北[(618±306)万个/L]和东部[(572±218)万个/L](均P<0.001)。结论太湖水体中MC-LR污染存在时间和地域差异,和藻类密度的变化趋势并不一致。应加强监测以保证供水安全。 | 周伟杰 丁新良 黄春华 陈晓峰 钮伟民 | 2016 | 实用预防医学2016，23，9： | 4 |
| 6 | 时间分辨荧光免疫分析在环境中的应用进展显示文摘时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)作为一种新型的超微量分析技术,不断应用于环境痕量分析领域,在检测环境中的有机污染物、生物毒素等方面发挥了重大作用。该文论述了近年来开发的TRFIA新系统,阐述了TRFIA在检测环境中的药物残留、生物毒素及化工试剂等方面的研究进展,并在此基础上对其应用前景进行了分析,展望了其在检测新兴有机污染物方面的巨大潜力。 | 吕梦雨 牛晓君 彭志芳 胡蹦 荣天悦 | 2019 | 环境科学与技术2019，42，8： | 3 |
| 7 | 微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化显示文摘目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法(AlphaLISA),用以检测水体中微囊藻毒素(MC)-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006~5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。 | 张艺 黄飚 钮伟民 赵灿培 金坚 | 2014 | 中国药理学与毒理学杂志2014，28，3： | 2 |
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