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| 1 | 鸽骨骼肌卫星细胞的分离、培养及成肌特性显示文摘【目的】探讨白羽王鸽Columba livia骨骼肌卫星细胞的分离、培养和鉴定的方法,建立完整的家鸽骨骼肌卫星细胞的培养体系。【方法】选择孵化16 d的鸽胚作为试验材料,采用组织块贴壁法和胶原酶消化法分离胸肌的骨骼肌卫星细胞并绘制其生长曲线。待卫星细胞分化出肌管后,采用免疫荧光法检测肌球蛋白重链(MyHC)的表达;在细胞分化出肌管前、后分别提取总RNA,采用RT-qPCR方法检测Desmin、Pax7、MyoG和MyoD1基因在细胞分化出肌管前、后的相对表达量。【结果】组织块贴壁法和胶原酶法均能成功地分离出骨骼肌卫星细胞,其生长曲线呈'S'型;该细胞经含体积分数为20%FBS的DMEM高糖培养液培养7 d后视野中出现大量明显可见的肌管,成肌特异性标志MyHC表达呈阳性。RT-qPCR结果表明,Desmin和MyoG基因分化后的相对表达量分别是分化前的5.68和10.38倍,而Pax7和MyoD1基因分化前的相对表达量分别是分化后的7.01和5.51倍。【结论】建立了鸽骨骼肌卫星细胞的培养体系,为今后进行家鸽肌肉发育的研究提供细胞模型。 | 林正浩 王讯 李晓开 罗毅 | 2019 | 华南农业大学学报2019，40，1： | 7 |
| 2 | Ⅱ型胶原水凝胶-细胞复合物在软骨损伤中的应用显示文摘背景:体外实验显示,Ⅱ型胶原能诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化,但有关Ⅱ型胶原水凝胶制备及其在软骨运动损伤中的修复尚缺乏报道。目的:观察Ⅱ型胶原水凝胶-细胞复合物在软骨损伤修复中的作用。方法:取30只新西兰大白兔,建立软骨损伤模型,造模后随机分为2组,每组15只,实验组于软骨损伤处植入Ⅱ型胶原水凝胶-骨髓间充质干细胞复合物,对照组植入Ⅱ型胶原水凝胶。植入后4,8周,取材软骨损伤部位,进行苏木精-伊红染色及甲苯胺蓝染色。结果与结论:(1)实验组:植入后4周,苏木精-伊红染色结果可见炎性细胞浸润,以巨噬细胞为主,存在少量中性粒细胞;甲苯胺蓝染色未见阳性。植入后8周,苏木精-伊红染色下可见大量软骨细胞增殖,有成软骨和肌管形成,并且可见血管再生;甲苯胺蓝染色接近正常组织;(2)对照组:植入后4周,苏木精-伊红染色可见损伤周围间质水肿明显,损伤骨骼肌细胞核消失,存在大量炎性细胞浸润;甲苯胺蓝染色未见阳性。植入后8周,苏木精-伊红染色下可见少许成软骨细胞形成,纤维组织增多;甲苯胺蓝染色未见阳性;(3)结果表明:Ⅱ型胶原水凝胶-细胞复合物修复软骨损伤具有良好的成软骨能力。 | 施翔 | 2016 | 中国组织工程研究2016，20，38： | 2 |
| 3 | 钙调蛋白介导内质网应激相关自噬促进肌修复显示文摘目的探究钙调蛋白在骨骼肌损伤内质网应激相关性自噬中的作用及机制。方法制备小鼠肌损伤内质网应激(ERS)模型,采用钙调蛋白激动剂/拮抗剂干扰该信号;同时体外以衣霉素化学诱导C2C12细胞分化的肌管发生ERS,继而添加钙调蛋白干扰剂刺激。检测未折叠蛋白反应(UPR)标志物mRNA和UPR通路关键分子蛋白表达水平,以及ERS诱导自噬相关蛋白的表达。结果肌损伤后,肌内UPR标志物(BiP、XBP1-S和ATF6)mRNA显著上调(P<0.05),ERS激活的UPR关键通路分子eIF2α、IRE1α和ATF6蛋白活性显著上调(均P<0.05),自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ增加,采用钙调蛋白激动剂CALP1可增强此反应。结论钙调蛋白参与了未折叠蛋白反应,并可能通过调节ERS相关性自噬促进骨骼肌损伤修复过程。 | 史丹丹 贺细菊 卢敏 刘幸卉 王汉琴 | 2021 | 华中科技大学学报(医学版)2021，50，6： | 0 |
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