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1保卫细胞微管骨架参与蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化调节的气孔运动显示文摘【目的】探讨在气孔运动的信息传递通路中,保卫细胞微管骨架与蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化两种因素之间是否存在相互作用,进而深入了解气孔运动机理。【方法】以拟南芥野生型及GFP-α-tubulin-6植株为材料,利用药理学试验、激光共聚焦扫描显微镜观察、免疫印迹等细胞学及生物化学方法研究丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸化对保卫细胞气孔运动及微管骨架的影响。【结果】丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂星型孢菌素(staurosporine,STS)能促进光照下气孔开放,微管特异性抑制剂长春花碱(vinblastine)和微管稳定剂紫杉醇(taxol)分别减弱和增强其作用;1/2A型磷酸酶抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)、花萼海绵诱癌素A(calyculin A,CalA)抑制光照诱导的气孔开放,微管特异性药物长春花碱和紫杉醇又能分别增强和削弱该抑制作用。激光共聚焦扫描显微镜下观察,两种磷酸酶抑制剂OA和CalA处理后,正常开放气孔保卫细胞中整齐有序的辐射状微管数量显著减少,变为以交错网状及解聚态为主;蛋白激酶抑制剂STS处理则增加了辐射状微管的比例。微管特异性药物紫杉醇、长春花碱分别与以上3种抑制剂共同处理,同样能够在一定程度上改变其对保卫细胞微管骨架组织排布的影响。提取保卫细胞原生质体总蛋白进行免疫印迹检测,55 kD分子量处的微管蛋白发生明显的蛋白丝氨酸磷酸化。【结论】蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化可以通过调节保卫细胞微管骨架的动态排布进行气孔运动的信息传递。叶子 黄聪聪 于荣 2012中国农业科学2012,45,21:4
2微管骨架和PP1/PP2A蛋白磷酸酶在ALA-ABA调控苹果叶片气孔运动中的作用显示文摘以苹果离体叶片下表皮为材料,利用不同药剂,结合激光扫描共聚焦显微镜观察和qRT-PCR等技术,从气孔开度、保卫细胞H_2O_2水平和基因表达等方面,研究了微管骨架和PP1/PP2A蛋白磷酸酶在5–氨基乙酰丙酸(ALA)抑制脱落酸(ABA)诱导的气孔关闭过程中的作用及可能的调控机制。结果表明,微管解聚剂长春碱(Vinblastine,VBT)可以消弱ALA对苹果叶片气孔开放的促进效应,而微管稳定剂紫杉醇(Taxol)可以削弱ABA诱导的气孔关闭效应,说明ALA抑制ABA诱导的苹果叶片气孔关闭过程依赖于保卫细胞的微管聚合。与此同时,外源ALA可以逆转ABA对微管蛋白编码基因TUB1、MAP65-1和MAP65-3表达的抑制效应,说明ALA通过促进保卫细胞微管骨架聚合来促进气孔开放。另一方面,PP1/PP2A蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)既能引起微管解聚,也能引起气孔关闭,说明保卫细胞的微管聚合和气孔开放受到PP1/PP2A的正调控;同时,OA促进保卫细胞H_2O_2积累,导致微管解聚和气孔关闭。以上结果表明,ALA可能通过促进苹果叶片保卫细胞PP1/PP2A蛋白磷酸酶活性,抑制ABA诱导的H_2O_2积累,促进微管蛋白基因表达和微管聚合,抑制ABA诱导的气孔关闭,从而为苹果叶片光合气体交换打开气孔通道。这为ALA在农业生产上的应用提供理论依据。熊丽君 安玉艳 汪良驹 2018园艺学报2018,45,11:4
3Quantitative Changes in Microtubule Distribution Correlate with Guard Cell Function in Arabidopsis显示文摘放射状地安排的外皮的微导管是警卫房间的一个突出的特征。我们观察了与共焦的显微镜学表示 GFP 导管素(GFP-TUA6 ) 的警卫房间并且当时,在微导管的外观发现了可认识的变化开或靠近的 stomata (Eisinger 等, 2012 ) 。在现在的学习,荧光分发的分析作为 stomata 在警卫房间以内在微导管捆的山峰紧张显示出戏剧的增加开。这增加随能被归因于 polymerized 导管素的全部的荧光的增加被相关。邻近的人行道房间没在山峰紧张或综合荧光看类似的变化有气孔的孔什么时候变化了。标注 RFP 的结束绑定蛋白质 1 的成像(EB1 ) 和在一样的房间表示的标注 YFP 的导管素表明有种结束的微导管的数字仍然保持不变,尽管 polymerized 导管素的全部的数量是更高的在比在关上的警卫房间开。一起拿,这些结果显示在微导管的变化穿被相关与并且为正常要求警卫房间功能被变化在聚类的微导管或捆绑描绘的组织。William R. Eisinger Viktor Kirik Charlotte Lewis David W. Ehrhardt Winslow R. Briggs 2012Molecular Plant2012,5,3:4
4Interplay between hydrogen sulfide and other signaling molecules in the regulation of guard cell signaling and abiotic/biotic stress response显示文摘Stomatal aperture controls the balance between transpirational water loss and photosynthetic carbon dioxide(CO2)uptake.Stomata are surrounded by pairs of guard cells that sense and transduce environmental or stress signals to induce diverse endogenous responses for adaptation to environmental changes.In a recent decade,hydrogen sulfide(H2S)has been recognized as a signaling molecule that regulates stomatal movement.In this review,we summarize recent progress in research on the regulatory role of H2S in stomatal movement,including the dynamic regulation of phytohormones,ion homeostasis,and cell structural components.We focus especially on the cross talk among H2S,nitric oxide(NO),and hydrogen peroxide(H2O2)in guard cells,as well as on H2S-mediated post-translational protein modification(cysteine thiol persulfidation).Finally,we summarize the mechanisms by which H2S interacts with other signaling molecules in plants under abiotic or biotic stress.Based on evidence and clues from existing research,we propose some issues that need to be addressed in the future.Hai Liu Shaowu Xue 2021Plant Communications2021,2,3:2
5微管骨架与异三聚体G蛋白协同参与ABA诱导的气孔运动显示文摘以拟南芥野生型、G蛋白α亚基缺失突变体(gpa1-3,gpa1-4)及带有GFP-α-tubulin-6标记的gpa1突变体等为材料,利用药理学实验、激光共聚焦扫描显微镜观察、非损伤微测等方法研究在ABA诱导气孔运动的信息传递通路中,异三聚体G蛋白与微管骨架之间的功能关系,深入了解气孔运动机理.结果表明:gpa1突变体叶片蒸腾失水率高于野生型.气孔开度实验中,突变体对ABA抑制气孔开放作用不敏感,但微管特异性解聚剂Oryzalin在一定程度上可恢复其对ABA的响应.Ca^(2+)螯合剂BAPTA-AM与Oryzalin共同处理时,无论野生型还是突变体,ABA的作用均会被进一步削弱.激光共聚焦扫描显微镜下观察,ABA处理后,野生型保卫细胞中辐射状规则排布的微管比例急剧下降,解聚态微管大幅度增加;gpa1突变体没有出现如此明显的动态转换,仍多停滞在聚合态.ABA与BAPTA-AM共同处理,野生型植株不同微管排布类型的保卫细胞所占比例随之发生显著改变,gpa1突变体无明显变化.非损伤微测实验发现,突变体中ABA抑制光下保卫细胞Ca^(2+)外流作用不明显,但再加以微管解聚剂Oryzalin处理,Ca^(2+)外流即明显下降.以上结果显示,在G蛋白介导的ABA抑制气孔开放信号通路中,下游有保卫细胞微管骨架和Ca^(2+)的共同参与.王未 赵思爽 王攀 席小慧 于荣 2017科学通报2017,62,32:1
6星形胶质细胞主要细胞骨架研究的最新进展显示文摘星形胶质细胞(Astrocyte,Ast)是中枢神经系统的主要细胞成分之一.约占正常成人中枢神经系统细胞总数的40%,其功能日益受到重视。其细胞骨架主要由微丝(MF)、微管(MT)和中间纤维(IFs)3种蛋白质组成,其细胞骨架的复杂变化在中枢神经系统的生理和病理变化中发挥重要作用,本文就生理病理条件下Ast细胞骨架的复杂变化(细胞骨架的生物学特性、信号转导途径、细胞骨架的构建与其在临床疾病中变化等工作一综述。苑召虎 吴炳义 2012中华神经医学杂志2012,11,9:1
7Photomorphogenesis——from One Photoreceptor to 14:40 Years of Progress显示文摘Winslow R. Briggs Chen-Tao Lin 2012Molecular Plant2012,5,3:1
8拟南芥微管结合蛋白WDL3参与ABA诱导的气孔关闭过程显示文摘以拟南芥WDL3RNA干扰株系(WDL3RNAi)和Tubulin5A-YFP植株等为材料,从叶片的失水率、气孔开度、保卫细胞微管骨架动态排布以及Ca^(2+)流动等不同角度探究在脱落酸(abscisic acid, ABA)诱导的气孔关闭信号通路中,微管结合蛋白WDL3与微管骨架以及Ca^(2+)之间的功能关系,深入了解气孔运动机理.结果表明:(1)相同条件下,WDL3RNAi的叶片蒸腾速率明显慢于野生型.(2)气孔开度实验中,WDL3RNAi对ABA信号比野生型更敏感,气孔关闭更快;微管稳定剂紫杉醇(Paclitaxel)可部分阻碍ABA的作用,微管解聚剂黄草消(Oryzalin)则进一步促进ABA诱导的气孔关闭,但WDL3 RNAi与野生型之间仍存在显著差异;激光共聚焦扫描显微镜观察发现, ABA条件下WDL3 RNAi保卫细胞内微管解聚明显加快,微管成束程度(bundling)显著降低.(3)胞内Ca^(2+)螯合剂BAPTA与ABA共同处理,野生型和WDL3RNAi的气孔关闭均受到不同程度的抑制,关闭减缓,处理前后差异显著.亚细胞结构观察发现, BAPTA阻碍了ABA引起的保卫细胞微管解聚,但WDL3 RNAi与野生型相比,依然维持相对较高的微管解聚比例.此外,非损伤微测技术检测发现,ABA引起的保卫细胞Ca^(2+)内流在WDL3RNAi中较野生型的流速更快,流量加大,显示Ca^(2+)在该信号通路中具有重要作用.综上实验结果表明,微管结合蛋白WDL3通过与微管骨架及Ca^(2+)相互作用参与ABA诱导的气孔关闭过程.席小慧 王攀 王朝阳 于荣 2019科学通报2019,64,1:0
9杨树微管功能研究植物表达载体构建及验证显示文摘[目的]分别构建84K杨的微管蛋白TUA5和TUB16与红色荧光蛋白mCherry融合的植物过表达载体,瞬时表达验证载体在植物体内表达后的荧光信号,为研究杨树微管功能奠定基础。[方法]以毛果杨微管蛋白TUA5和TUB16的基因序列为模板,设计84K杨的皿5和7TZB76基因的引物,提取野生型84K杨的RNA并反转录成cDNA,同源克隆得到84KTUA5和84KTUB16基因,分别连接在pCAMBIA 1300载体mCh-ep荧光标签的N,端和C端,转化到大肠杆菌TOP10感受态细胞中,通过菌落PCR和测序鉴定获得阳性单克隆,并通过电击法将重组质粒转化到农杆菌GV3101中,瞬时转化烟草后进行荧光观察。[结果]克隆得到了84KTUA5和84KTUB16基因,成功与pCAMBIA 1300-mCherry载体连接,烟草瞬时表达荧光观察结果显示:仅目的基因与mCherry标签C,端相连的融合蛋白能够成功表达,且荧光明显。[结论]成功构建了84K杨皿5和TUB16基因与pCAMBIA 1300-mCherry的融合表达载体,为进一步研究杨树微管功能提供了背景材料。罗莹 张建国 刘晓霞 饶国栋 陆海 2020林业科学研究2020,33,1:0
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