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| 1 | 碱性橙Ⅱ的酶联免疫检测方法的研究显示文摘建立碱性橙Ⅱ的酶联免疫分析方法。采用戊二醛偶联法将半抗原碱性橙Ⅱ与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)制备免疫抗原碱性橙Ⅱ-BSA和包被抗原碱性橙Ⅱ-OVA。经紫外可见吸收光谱鉴定和大白兔免疫实验证实人工抗原成功合成,并制备抗碱性橙Ⅱ的多克隆抗体,该抗体可检测快速定量食品中的碱性橙Ⅱ,最低检测限为10 pg。该检测方法具有高灵敏度和特异性,可应用于食品中碱性橙Ⅱ检测试剂盒的研制。 | 贡东军 赵志磊 王庭欣 李小亭 吴广臣 | 2013 | 食品研究与开发2013，34，10： | 7 |
| 2 | 雌二醇单克隆抗体制备及间接竞争ELISA检测方法的建立显示文摘为建立敏感、特异、快速的雌二醇(estradiol,E2)残留免疫检测方法,本研究利用雌二醇人工抗原(E2-BSA)免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备特异性雌二醇单克隆抗体,利用高效价、高特异性单克隆抗体建立间接竞争ELISA(ic ELISA)方法。结果显示,试验成功筛选获得一株稳定分泌抗雌二醇抗体的杂交瘤细胞株(3H3),抗体效价可达1∶320 000,利用3H3腹水抗体优化间接竞争ic ELISA反应条件,检测抗体的敏感度,IC50为1.636 ng/m L,IC20~IC80线性范围为0.202~13.281 ng/m L。雌二醇腹水抗体与雌三醇、乙炔雌二醇的交叉反应率分别达0.31%和0.25%,而与雌酮、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、炔雌醚、己烯雌酚、壬基酚的交叉反应率均<0.1%。结果表明,利用本研究制备的单克隆抗体建立雌二醇间接竞争ELISA检测方法,可满足食品中雌二醇残留高灵敏度的检测要求。 | 白宇 胡景炎 许永鹏 何杰 金俊杰 李培德 刘素贞 | 2017 | 中国畜牧兽医2017，44，10： | 6 |
| 3 | 基于免疫分析技术的雌二醇与壬基酚同时检测方法显示文摘本文研究了基于间接竞争酶联免疫分析技术(ELISA)对两种典型内分泌干扰物(雌二醇,壬基酚)的同时检测方法.首先,建立了内分泌干扰物雌二醇和壬基酚单独检测的酶联免疫检测方法,分别得到了雌二醇和壬基酚酶联免疫检测方法的标准曲线.雌二醇的检测限为3.18μg·L^(-1),定量检测区间为4.18—11.98μg·L^(-1);壬基酚的检测限为24.78μg·L^(-1),定量检测区间为36.51—363.43μg·L^(-1).采用优化后的检测条件,进一步设计建立了两种内分泌干扰物的同时检测方法,并测定了清华大学自来水和荷塘水配制的雌二醇和壬基酚加标样品,所有样品的变异系数和回收率分别在2%—14%和85%—116%之间,表明该方法适用于实际水样中雌二醇和壬基酚的同时检测. | 贾文哲 李奕君 张天牧 何苗 汪恂 | 2021 | 环境化学2021，40，4： | 4 |
| 4 | 剑叶龙血素A间接竞争ELISA检测方法的建立显示文摘目的:建立间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于测定剑叶龙血素A(CA)含量.方法:合成半抗原剑叶龙血素A-4'-羧甲基醚(CA-4'-CME),再用碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联制备免疫原(CA-BSA)和包被原(CA-OVA),免疫小鼠制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA法并评估其分析性能.结果:通过紫外扫描分析CA-BSA和CA-OVA的偶联比分别为18∶1和24∶1.抗血清效价最高达到12000.用四参数logistic方程拟合CA标准曲线,在分析范围0 ~0.80 mg·L-1内,相关系数(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,最低检测限0.045 mg·L-1,批内CV≤12.5%,批间CV≤14.7%,回收率92.7% ~ 118.7%,对5种CA类似物的交叉反应率<5.38%.此方法检测龙血竭和龙血竭总黄酮中CA含量分别为1.27%,3.08%.结论:剑叶龙血素A间接竞争ELISA法精密度、准确度和特异性均较好,可方便地用于药物检测和分析. | 沈洲 雷丽云 龙蓉 陈素 刘向明 | 2013 | 中国实验方剂学杂志2013，19，20： | 1 |
| 5 | 应用FITC系统建立雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法显示文摘目的利用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)系统建立人血清雌二醇(estradiol,E_2)直接竞争化学发光免疫分析方法。方法采用兔抗-FITC抗体、FITC-抗-E_2两步包被制备预包被板,采用直接竞争法原理建立E_2化学发光免疫分析检测体系,并对FITC-anti-E_2包被浓度、酶标抗原稀释比例、缓冲体系、反应时间等各种影响因素进行优化。结果本系统线性范围为30~3000 pg/mL,空白检测限4.8pg/mL,定量检测限30 pg/mL,分析内精密度5.6%,批间精密性8.7%,平均回收率95.9%,与雌三醇、睾酮、孕酮均无明显交叉反应,与贝克曼全自动化学发光试剂同时测定164份样本,二者测定结果的相关系数r为0.979。结论成功建立了雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法 ,该方法性能指标优秀,具有一定的临床应用价值。 | 潘国华 | 2019 | 标记免疫分析与临床2019，26，2： | 1 |
| 6 | 水果及环境水样中苯醚甲环唑的高灵敏免疫分析方法研究显示文摘采用辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化四甲基联苯胺(TMB)显色为信号输出系统,结合间接竞争反应模式建立了水果及环境水样中苯醚甲环唑的间接竞争酶联免疫分析方法(ic ELISA)。基于高特异性单克隆抗体,通过逐步优化策略,确定最佳免疫分析条件为:包被原与抗体质量浓度组合为62.5 ng/mL和0.318μg/mL,一抗竞争反应缓冲溶液为含0.05%Tween-20的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBST,pH 7.4),一抗竞争反应时间为20 min,酶标二抗稀释液为0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4),酶标二抗反应时间为30 min。在该条件下,苯醚甲环唑的线性检测范围(IC_(20)~IC_(80))为0.49~3.90 ng/mL,半数抑制浓度(IC_(50))为1.38 ng/mL,检出限(LOD)为0.33 ng/mL。在柑橘、葡萄、香蕉、草莓田水、湖水和河水样品中的平均加标回收率为72.3%~132%,相对标准偏差(RSD)不大于13%,对10种结构和功能类似物的交叉反应率(CR)均小于0.2%。该方法准确可靠,可用于水果及环境水样中苯醚甲环唑的快速筛查和残留检测。 | 陈梓豪 张咏仪 杨金易 曾道平 贺颖 徐振林 王弘 孙远明 沈玉栋 | 2023 | 分析测试学报2023，42，6： | 0 |
| 7 | 龙血素A和龙血素B的酶联免疫检测方法的建立显示文摘建立了龙血素A和龙血素B间接竞争酶联免疫吸附分析方法,并用于测定龙血素A和龙血素B的含量。分别合成龙血素A和龙血素B人工抗原制备其多克隆抗体,建立二者间接竞争酶联免疫吸附分析方法并评估其分析性能。结果表明:抗龙血素A血清和抗龙血素B血清的效价分别达到8 000和30 000;龙血素A和龙血素B的最低检测限分别为3.9ng·mL-1和26.1ng·mL-1,批内精密度分别为CV≤10.7%和CV≤9.9%,批间精密度分别为CV≤11.5%和CV≤12.3%,回收率分别为87.4%~110.8%和109.8%~113.5%,与各自的6种类似物的交叉反应率最大分别为9.20%和3.64%,在4种龙血竭药物中的最大含量和最小含量分别相差4.05倍和3.57倍。龙血素A和龙血素B间接竞争酶联免疫吸附分析方法的检测精密度、准确度和特异性均较好,可快捷有效地用于药物检测和分析。 | 雷丽云 沈洲 龙蓉 陈素 成波 刘向明 | 2014 | 化学与生物工程2014，31，4： | 0 |
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