| 1 | CDK2 RNA干扰后HepG2细胞蛋白表达的变化显示文摘目的探讨稳定转染CDK2干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2细胞生物活性及细胞核蛋白质的改变。方法构建稳定转染PGenesil-1-CDK2的HepG2细胞系,MTT法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期的改变。通过RT-PCR和双向凝胶电泳-质谱技术-数据库搜索,比较转染前后CDK2 mRNA的表达和细胞核蛋白质的变化。并通过Western blot法对显著差异蛋白进行验证。结果与空质粒组PHK-siRNA-HepG2细胞和未转染组HepG2细胞相比,PCDK2-siRNA-HepG2组细胞的生长速度减慢(P<0.01),稳定转染CDK2 RNAi组细胞的CDK2 mRNA表达水平显著下降。通过双向电泳-质谱技术得到4个稳定转染CDK2 siR-NA的HepG2细胞不表达的蛋白质,Western blot法证实双向电泳结果的可信性。结论 CDK2干扰RNA可明显降低HepG2细胞CDK2 mRNA的表达,抑制HepG2细胞的增殖,干扰后的HepG2细胞不表达的蛋白质分别是类核糖体蛋白S12、β-肌动蛋白、锌指蛋白276和伴侣蛋白10相关蛋白。 | 商进 王震宇 李君枣 | 2013 | 细胞与分子免疫学杂志2013，29，4： | 3 |
| 2 | 泮托拉唑对二乙基亚硝胺联合四氯化碳诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝细胞增殖的影响显示文摘目的:探讨泮托拉唑对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)联合四氯化碳(carbon tetrachloride,CC14)诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝癌细胞增殖的影响.方法:将78只C57小鼠采用DEN联合CCl_4共同诱导C57BL/6J小鼠肝癌,第9周将制模小鼠随机分为模型组、泮托拉唑低剂量组(40mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg),并开始腹腔注射泮托拉唑,同时取12只正常小鼠为对照.第25周处死小鼠,取正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,肉眼观察拍片,并作HE染色光镜检查.采用生化法检查小鼠血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、尿素(urea)、肌酐(creatinine,Cr)水平;采用Realtime PCR方法来检测正常肝、肝癌及癌旁组织甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、细胞增殖核抗原Ki67,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA的表达,采用Western blot法检测Ki67、PCNA蛋白的表达.结果:小鼠死亡率为21%,成瘤率为100%.肝脏组织巨检:模型组与高低剂量组肝体积增大,表面有大小不等的结节,与模型组比较,高、低剂量组结节个数明显减少.HE染色显示:与模型组比较,高、低剂量组异型增生明显减少.血清生化检测显示:模型组、高、低剂量组血清ALT、AST水平明显高于正常组(P<0.05),高剂量组ALT、AST水平明显低于模型组(P<0.05).RT-PCR结果提示,与正常组相比较,模型组和高、低剂量组AFP、Ki67和PCNA mRNA表达明显增高(P<0.05,F=7.94;P<0.05,F=15.62;P<0.01,F=45.58).与模型组比较,高剂量组Ki67和PCNA mRNA表达降低(P<0.05,F=5.89;P<0.05,F=10.34).Western blot结果显示,与正常肝组织比较,模型组和高剂量组的肝癌及癌旁组织Ki67和PCNA蛋白表达明显增高(P<0.05,F=20.41;P<0.05,F=20.31).与模型组比较,高剂量组肝癌及癌旁组织Ki67和PCNA蛋白表达明显减少(P<0.05,F=16.47;P<0.05,F=12.38).结论:泮托拉唑DEN联合CCl_4诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型肝细胞增殖有抑制作用. | 黎元 金海 文国容 庹必光 | 2015 | 世界华人消化杂志2015，23，1： | 1 |
| 3 | rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡显示文摘rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用,但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确.本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析,对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测;利用qRT-PCR和Western印迹方法,检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况.结果表明,rBTI(2.5μmol/L)与紫杉醇(0.05~0.5μmol/L)联合作用于MCF-7细胞后,能显著抑制其增殖.将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药,诱导了MCF-7细胞凋亡及ROS的产生;同时与rBTI单独作用时相比,联合作用明显上调了p53、Bax的表达,促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位;与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比,两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达.本研究证实,rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生,激活NFκB/p65信号转导途径,协同促进MCF-7细胞的凋亡. | 李玉英 吴燕子 白崇智 崔晓东 王转花 | 2014 | 中国生物化学与分子生物学报2014，30，8： | 0 |
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