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| 1 | 应用液相芯片技术联合多重PCR快速检测四种常见食源性致病菌的研究显示文摘目的建立一种基于多重PCR结合液相芯片技术快速、准确的同时检测沙门菌、副溶血性弧菌、单增李斯特氏菌及肠出血性大肠埃希氏菌的方法。方法建立四种常见食源性致病菌的多重PCR扩增方法,将PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交,利用液相芯片检测仪来检测杂交结果。并对检测方法的灵敏度和特异性进行评价。结果建立了一种特异、快速、准确的检测沙门菌、副溶血性弧菌、单增李斯特氏菌及肠出血性大肠埃希氏菌的液相芯片方法,该方法对于副溶血性弧菌tdh和沙门菌inv A检测的灵敏度为1×104 CFU/ml;单增李斯特氏菌hly A、肠出血性大肠埃希氏菌stx1和stx2检测的灵敏度为1×105 CFU/ml。结果也表明该方法检测的特异性为100%。结论本研究建立的液相芯片检测方法能快速、准确、特异的同时检测沙门菌、副溶血性弧菌、单增李斯特氏菌及肠出血性大肠埃希氏菌四种常见食源性致病菌。 | 金玉娟 陈应坚 甘莉萍 刘渠 杨慧 李静媚 胡春凌 | 2015 | 热带医学杂志2015，15，6： | 15 |
| 2 | 基孔肯亚热、克里米亚-刚果出血热、裂谷热病毒核酸液相芯片检测方法的建立显示文摘目的建立基孔肯亚热、克里米亚-刚果出血热、裂谷热病毒核酸液相芯片检测方法。方法建立探针偶联至荧光微球、多重PCR扩增方法、杂交检测方法,并对所建立的液相芯片检测方法的灵敏度和特异性进行评价。结果建立的液相芯片检测方法能对基孔肯亚热、克里米亚-刚果出血热、裂谷热病毒中的任意1种、任意2种或者3种同时进行筛查检测,基孔肯亚热病毒检测的灵敏度为1×104copies/PCR,克里米亚-刚果出血热病毒检测的灵敏度为1×105copies/PCR,裂谷热病毒检测的灵敏度为1×103 copies/PCR。该方法对汉坦病毒、埃博拉病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、马尔堡病毒的检测结果均为阴性。结论该方法具有高通量、多重检测、快速、敏感、特异的特点,为基孔肯亚热、克里米亚-刚果出血热、裂谷热病毒的筛查检测提供一种新方法。 | 李云峰 石静 马旭 葛藤 蔡鹏 薛芳 | 2015 | 中国国境卫生检疫杂志2015，38，4： | 5 |
| 3 | 丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型检测方法的建立及应用显示文摘目的建立丙型肝炎病毒1a、1b、2a、3a、3b、6a亚型的核酸液相芯片分型检测方法。方法建立PCR扩增及核酸探针偶联方法,将PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交,建立液相芯片检测方法,并对建立的液相芯片检测方法进行灵敏度及特异性评价,应用该方法对93份血清样本核酸进行检测。结果建立的丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型检测方法具有较高的特异性和敏感性,能对6种亚型进行检测和分型,对于HCV 1a、3a和6a亚型核酸液相芯片分型检测方法的灵敏度为1×105copies/PCR;对于HCV-1b、2a和3b亚型核酸液相芯片分型检测方法的灵敏度为1×104 copies/PCR。对93份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点。结论本方法能对丙型肝炎病毒的6种亚型进行同时快速检测,为丙型肝炎病毒的分型检测提供一种新方法。 | 周有良 胡春凌 汪朝晖 任传路 胥萍 陈佩琴 刘惺 | 2014 | 国际检验医学杂志2014，35，13： | 4 |
| 4 | 液相芯片鉴别检测7种出血性大肠埃希菌血清型显示文摘为了建立一种同时检测O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7种血清型的出血性大肠埃希菌的高通量检测方法,通过筛选比对大肠埃希菌O157血清型的fbE基因,O26、O103和O111血清型的WZX基因,O45、O121和O145血清型的WZY基因,设计了针对各个血清型的特异性引物和探针。通过在所有的特异性引物5′端加入超级引物的策略,达到了通过一次PCR反应,同时多重扩增7个血清型的7个目标片段的效果。将加尾多重扩增与液相芯片高通量检测相结合,建立了同时检测7种血清型的出血性大肠埃希菌的液相芯片检测方法,并对方法检测体系及反应条件进行了优化。所建立的7种出血性大肠埃希菌液相芯片检测方法灵敏,其灵敏度与荧光PCR的灵敏度相差100倍。所建立的方法特异,单个血清型的探针与相应的PCR扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于17~63之间。7种血清型的混合探针与各个血清型菌株的PCR与扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于11~23之间,与其他血清型出血性大肠埃希菌和非出血性大肠埃希菌均无交叉反应。试验结果表明,所建立的液相芯片检测大肠埃希菌O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7个血清型的检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可用于主要出血性大肠埃希菌的快速鉴别检测。 | 陶虹 陈兵 孙洁 唐金明 林庆燕 曹琛福 吕建强 杨俊兴 花群义 秦智锋 | 2015 | 动物医学进展2015，36，9： | 2 |
| 5 | 应用液相芯片技术检测多种蚊媒病毒显示文摘目的建立检测多种蚊媒病毒的液相芯片方法。方法从NCBI数据库分别下载乙脑病毒(JEV)、登革病毒(DENV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)、寨卡病毒(ZIKV)、黄热病毒(YFV)、裂谷热病毒(RVFV)基因组序列,比对分析后,在各病毒保守区域分别设计扩增引物和检测探针,以标准品质粒为模板,建立多重PCR扩增体系;将核酸探针偶联至荧光编码微球,建立液相芯片检测方法,并对方法进行评价。结果基于多重PCR和液相芯片技术的常见蚊媒病毒的检测方法能同时对其中任意1种、2种、3种、4种、5种和6种病毒进行检测,具有良好的灵敏性,JEV、DENV、CHIKV、RVFV的灵敏度为1×104拷贝/反应;ZIKV、YFV的灵敏度为1×105拷贝/反应。结论建立的方法能同时快速检测6种常见蚊媒病毒,为蚊媒传染病的预警和控制提供参考。 | 周有良 赵亚峰 孙玉莲 葛斌鹏 杨国平 胡春凌 陈峰 杨庆贵 | 2021 | 中国国境卫生检疫杂志2021，44，4： | 2 |
| 6 | 森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用显示文摘目的建立森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法。方法将病毒抗原包被微球,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法,评价方法的敏感性和准确性。结果建立的液相蛋白芯片检测方法病毒抗体和生物素标记二抗的孵育时间均为1 h,生物素标记羊抗兔Ig G和羊抗人Ig G最佳稀释度分别为1∶200和1∶100,能对3种病毒单一和混合感染准确检测。对295份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点。结论本方法能对3种虫媒病毒同时进行快速检测,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。 | 樊学军 田绿波 石莹 陈肖潇 高国龙 常晓松 杨雨 | 2015 | 现代预防医学2015，42，6： | 1 |
| 7 | 液相芯片法和DNA测序法检测HCV亚型结果的比较显示文摘目的比较液相芯片法和DNA测序法在检测丙型肝炎病毒亚型方面的差异.方法采用液相芯片法和DNA测序法对102例抗-HCV阳性患者的HCV基因型进行检测分型.结果102例抗-HCV阳性患者中,液相芯片法和DNA测序法分别检出阳性76例和79例,阳性率分别为74.51%和77.45%,Χ^2=86.04,P=0.250〉0.05,两者比较差异无统计学意义.液相芯片法检出1b和2a混合感染5例.对于HCV1a、1b、3a、3b、6a,液相芯片法和DNA测序法的检测结果差异无统计学意义,仅对HCV2a,两者比较差异显著.结论在灵敏度方面DNA测序法稍有优势,但比较繁琐,且只能对单-亚型进行分析;液相芯片法能对八种亚型的同时快速检测,有较好的临床应用价值.若两种方法结合使用,可大大提到临床的诊断效率. | 周有良 胡春凌 葛斌鹏 朱玲玲 | 2015 | 中国医疗器械信息2015，21，02Z： | 0 |
| 8 | 液相芯片技术在新冠病毒和流感病毒检测中的应用显示文摘目的 建立一种液相芯片检测方法,用于检测新冠病毒和流感病毒。方法 从NCBI数据库分别下载新冠病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒全基因组序列,在保守区域分别设计扩增引物和检测探针,以各病毒标准品质粒为模板,建立多重PCR扩增体系;将核酸探针偶联至荧光编码微球,建立液相芯片检测体系,并对方法进行评价。结果 基于多重PCR和液相芯片技术建立的新冠病毒和流感病毒的检测方法能够同时检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因和S基因,甲型流感病毒M基因和乙型流感病毒NS基因及人类看家基因ACTB基因。检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因、S基因的灵敏度为1×10^(4)拷贝/反应,甲型流感病毒M基因、乙型流感病毒NS基因的灵敏度为1×10^(3)拷贝/反应;可准确检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因和S基因,甲型流感病毒M基因和乙型流感病毒NS基因及人类看家基因ACTB基因片段,没有出现相互干扰的现象。结论 建立的方法能同时检测新冠病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒,可作为新冠病毒及流感病毒感染的诊断及流行病学调查的方法。 | 周有良 胡春凌 徐俊 陶莉 陈凯 孙玉莲 葛斌鹏 | 2023 | 中国国境卫生检疫杂志2023，46，5： | 0 |
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