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| 1 | 樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析显示文摘樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c DNA,命名为Pcc HE(Gen Bank登录号:MH119084)。Pcc HE基因c DNA全长为964 bp,由5'-UTR、3'-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;Pcc HE蛋白序列含有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于Pcc HE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测Pcc HE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;Pcc HE在5龄3 d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达。上述结果表明,Pcc HE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。 | 浦月霞 刘龙山 龚美霞 冉艳萍 贾雪峰 黄景滩 宋宪军 安春梅 唐顺明 | 2018 | 蚕业科学2018，44，3： | 2 |
| 2 | 昆虫孵化酶的研究进展显示文摘昆虫孵化酶对生长发育具有重要作用。昆虫种类繁多,而鳞翅目昆虫大多是植食性,为害各种植物。文章针对昆虫孵化机制、昆虫孵化酶的酶学特性及其昆虫孵化酶基因的研究进展进行了综述,为孵化酶在农业害虫生物防治上的应用提供一定的理论基础。 | 浦月霞 刘龙山 龚美霞 冉艳萍 兰艳妮 唐顺明 | 2017 | 广西蚕业2017，54，3： | 1 |
| 3 | 琥珀蚕孵化酶基因AaHE的克隆及启动子活性分析显示文摘【目的】琥珀蚕Antheraea assama具有典型的野蚕特征,蚕卵孵化不齐,严重影响琥珀蚕的室内规模化饲养。本研究旨在探究对琥珀蚕卵孵化起关键作用的孵化酶(hatching enzyme)基因及其启动子序列特征,为进一步选择合适的抑制剂或促进剂调节琥珀蚕卵的孵化奠定基础。【方法】采用RACE技术克隆琥珀蚕孵化酶基因的cDNA全长序列,对基因序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR检测琥珀蚕孵化酶基因在琥珀蚕不同发育天数卵中及5龄第3和4天幼虫不同组织(丝腺、马氏管、头、中肠、脂肪体、表皮、血液、精巢和卵巢)中的表达情况;采用染色体步移克隆琥珀蚕孵化酶基因的启动子序列,构建昆虫细胞重组表达载体转染家蚕Bombyx mori BmN细胞,检测琥珀蚕孵化酶基因启动子活性。【结果】获得了琥珀蚕孵化酶基因AaHE(GenBank登录号:KT336227.1)全长cDNA序列,长993 bp,编码294个氨基酸,预测蛋白质分子质量为33.7 kD,理论等电点为5.17。AaHE氨基酸序列含有一个信号肽和一个ZnMc结构域,AaHE是一种含有HExxH锌结合位点的锌依赖性蛋白水解酶,该类酶既是肽酶,同时又是一种消化酶。AaHE在琥珀蚕孵化前的卵及5龄幼虫中肠中特异性高表达,分别与AaHE的肽酶和消化酶的属性相吻合。AaHE启动子核心区存在多个转录因子结合位点,这可能与转录因子参与调节AaHE的表达有关。启动子活性分析表明,AaHE启动子在家蚕BmN细胞中能够启动EGFP基因的表达,具有明显的启动子活性。【结论】AaHE是锌依赖性蛋白水解酶,其启动子核心区存在多个转录因子结合位点。本研究为选择合适的抑制剂或促进剂调节琥珀蚕卵的孵化率提供了参考。 | 陈安利 董占鹏 唐顺明 刘增虎 李涛 廖鹏飞 李琼艳 | 2021 | 昆虫学报2021，64，6： | 0 |
| 4 | 野蚕基因克隆研究进展显示文摘野蚕是重要的吐丝类鳞翅目昆虫,在不同的功能和抗性上表现优势。本文概述了野桑蚕、柞蚕、蓖麻蚕、柳蚕及其他野蚕基因的克隆研究进展,阐明了部分野蚕基因的特性及表达情况,比对野蚕和家蚕的氨基酸序列,分析亲缘关系,以便开展目标明确的分子育种,缩短育种进程,并且对野蚕基因克隆研究发展前景进行分析和展望,作为进一步研究的参考。 | 浦月霞 冉艳萍 杨东英 龚美霞 刘龙山 唐顺明 | 2018 | 广西蚕业2018，55，2： | 0 |
| 5 | 家蚕追寄蝇孵化酶的基因克隆与特性分析显示文摘家蚕追寄蝇寄生于家蚕幼虫引起的蝇蛆病危害蚕业生产。为从分子水平研究家蚕追寄蝇的孵化机制,以发育1.5 d的蝇卵为材料,结合RACE技术获得家蚕追寄蝇孵化酶基因的全长cDNA,命名为EsHE(GenBank登录号:ON042475)。EsHE基因cDNA全长1 507 bp,包含159 bp 5′UTR、412 bp 3′UTR和936 bp的完整ORF,编码311个氨基酸;EsHE蛋白序列含有孵化酶特征序列HELMHVLGFMHE(锌结合基序)和YDYGSVMHY(Met-转角基序);系统进化树分析显示,家蚕追寄蝇与丝光绿蝇的孵化酶亲缘关系最近。qRT-PCR检测EsHE基因在家蚕追寄蝇卵期的表达模式,发现在卵产后36 h EsHE表达量开始大幅上升,至孵化前的48 h达到最高水平;且在3龄幼虫中肠组织高水平表达。这些结果暗示EsHE与家蚕追寄蝇的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。通过以家蚕追寄蝇基因组DNA为模板扩增发现,EsHE基因含有1个内含子(2 638 bp)和2个外显子(第1外显子1 005 bp,第2外显子502 bp),基因结构与铜绿蝇、丝光绿蝇HE相似。上述研究结果为进一步阐明家蚕追寄蝇孵化分子机理奠定了基础,为以孵化相关基因作为靶点的杀虫剂研究开发提供了理论基础。 | 王闪闪 浦月霞 Zufan Bekele Kassa 王耒耒 徐娇 刘吉银 王梅仙 朱娟 沈兴家 沈中元 唐顺明 | 2022 | 蚕业科学2022，48，5： | 0 |
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