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| 1 | 电针耳穴防治大鼠老年性耳聋的实验研究显示文摘目的探讨电针对大鼠老年性聋的防治作用及机制。方法 36只Wistar大鼠按月龄分为三组:青年组(3~4月龄);老年组(20~22月龄);电针干预老年组(20~22月龄),电针刺'翳风'、'听会'两穴位。通过检测听性脑干反应(ABR)阈值,观察各组听力变化;采用耳蜗基底膜铺片,显微镜下观察毛细胞形态学的变化;免疫组织化学方法检测活化型半胱天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)在耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)中的表达。结果老年组大鼠ABR阈值明显高于青年组(P<0.05),电针干预老年组ABR阈值明显低于老年组(P<0.01)。显微镜下显示青年组耳蜗内外毛细胞排列整齐有序,无明显毛细胞缺失;老年组毛细胞破坏严重,细胞间边缘不清楚,有明显外毛细胞缺失;电针干预老年组耳蜗外毛细胞损伤及缺失现象较老年组轻。免疫组化结果显示:青年组大鼠耳蜗螺旋神经节细胞未见明显冬氨酸蛋白酶-3阳性染色,老年组的耳蜗螺旋神经节细胞可见明显冬氨酸蛋白酶-3阳性染色,电针干预老年组的耳蜗螺旋神经节细胞冬氨酸蛋白酶-3表达较老年组显著降低。结论针刺听会和翳风两穴位可减轻大鼠耳蜗毛细胞损伤,缓解细胞的凋亡,在一定程度上可起到防治大鼠老年性耳聋的作用。 | 张博 胡治华 | 2018 | 贵州医药2018，42，6： | 4 |
| 2 | 锰诱导体外培养耳蜗毛细胞的损伤与凋亡研究显示文摘目的探讨锰诱导体外培养耳蜗毛细胞损伤与凋亡的关系。方法将出生3天的新生Sprague Dawley大鼠的耳蜗器官体外培养,将贮存浓度为100m M氯化锰用SFM稀释到终浓度为1m M,3m M,5m M后进行体外染毒处理耳蜗基底膜。应用鬼笔环肽染色特异性显示耳蜗毛细胞的静纤毛,同时用β-Tubulin对神经纤维进行染色,用TUNEL试剂盒;Cleaved caspase-3抗体对耳蜗基底膜进行染色,在激光共聚焦显微镜下分别观察耳蜗基底膜的毛细胞,神经纤维。结果耳蜗基底膜培养24小时,1m M氯化锰对耳蜗毛细胞及神经纤维损伤甚微,差异无统计学意义(P>0.05),内,外毛细胞排列整齐规律,听神经纤维分布均匀,成束排列。最高浓度5m M氯化锰处理24小时后对神经纤维造成明显的损害,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。当浓度逐渐增加,损伤愈加显著并呈浓度依赖性。2m M氯化锰处理,对耳蜗基底膜底转损伤较中转、顶转明显。不同浓度氯化锰处理24小时TUNEL染色阳性细胞随着氯化锰浓度的增加而增多;Cleaved caspase-3染色阳性细胞亦随着氯化锰浓度的增加而增多。结论通过大鼠耳蜗器官体外培养方法,发现氯化锰会造成毛细胞缺失,神经纤维变细变少,而这种损伤的机制与细胞凋亡密切相关。 | 李丹 王卫龙 卢连军 张建彬 米文娟 邱阳 陈俊 宋勇莉 田克勇 唐晓旭 | 2016 | 中华耳科学杂志2016，14，2： | 3 |
| 3 | 细胞色素C在老年SD大鼠耳蜗不同阶段凋亡坏死毛细胞中表达的变化显示文摘目的:观察细胞色素c在老年SD大鼠不同阶段凋亡、坏死毛细胞中表达的变化,探讨老年大鼠耳蜗毛细胞死亡的机制。方法:16只SD大鼠分组:青年组8只,2~3月龄;老年组8只,24~26月龄。应用电位反应测听仪检测不同频率短纯音(4、8、16、32和40kHz)诱发的青年组和老年组大鼠双侧ABR。听觉功能测试后,解剖取出双耳听泡,分离耳蜗基膜。分别用细胞核DNA染料碘化丙锭染色不同月龄大鼠耳蜗基膜细胞核,细胞色素C免疫荧光染料标记大鼠耳蜗基膜细胞的细胞色素c蛋白,荧光显微镜下观察不同月龄大鼠耳蜗基膜细胞荧光染色的变化。结果:老年组大鼠的不同频率ABR阈值均高于青年组(P〈0.01)。微弱拘细胞色素c荧光标记物存在于青年组大鼠耳蜗基膜毛细胞质(细胞膜的内侧,线粒体存在部位),增强的细胞色素C免疫反应物存在于老年组大鼠耳蜗基膜细胞。细胞色素c阳性反应见于:①细胞核型不变;②碘化丙锭染色略有加深,细胞核型不变;③细胞核轻微核固缩;④核肿胀的毛细胞。相反,部分核固缩≤3/4核的毛细胞细胞色素C阳性反应物减少或消失,核缺失区域的毛细胞未见细胞色素c阳性反应物。老年大鼠耳蜗基膜凋亡毛细胞线粒体释放的细胞色素c存在核内转移现象。结论:细胞色素c免疫荧光染色为老年耳蜗基膜毛细胞退行性变早期的细胞生物学标记之一。细胞色素C向细胞核内的转移,可能与老年大鼠耳蜗凋亡毛细胞染色质凝聚相关。 | 杨卫平 | 2014 | 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志2014，28，1： | 3 |
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