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| 1 | 尿蛋白电泳分析和质谱鉴定显示文摘目的探究尿蛋白的最佳沉淀方法 ,且对常规损失蛋白进行鉴定分析。方法采用有机溶剂沉淀法,即用三氯乙酸/90%丙酮法、三氯乙酸/100%丙酮法和90%丙酮法分别沉淀尿液中蛋白质,对90%丙酮法所得到沉淀的可溶部分和不溶部分进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺分离和质谱鉴定。结果 90%丙酮沉淀法获得的尿蛋白量相对较高。将90%丙酮法沉淀的尿蛋白不溶部分和可溶部分进行质谱鉴定,可溶部分得到53种蛋白,不溶部分得到49种蛋白,且不溶部分特有的蛋白包括免疫球蛋白κ轻链基因1-5、谷氨酰氨肽酶、突变体1、芳基硫酸酯酶A前体等14种。结论尿液沉淀的不溶部分中特有蛋白的发现有助于尿液蛋白质组的全谱研究,对临床特异蛋白的检测具有重要意义。 | 王颖 黄勇 张小容 罗高兴 贺伟峰 吴军 | 2016 | 现代医药卫生2016,32,12: | 1 |
| 2 | 利用2DE-MS技术筛选和鉴定大肠癌血清标志物显示文摘目的利用2DE-MS技术对大肠癌患者血清和正常人血清蛋白进行比较分析,筛选和鉴定差异蛋白。方法收集正常人(n=10)和大肠癌患者(n=15)术前血清,进行去除白蛋白和免疫球蛋白及脱盐浓缩预处理,应用2DE-PAGE分离处理后血清蛋白,比较两者的差异蛋白质点,采用MALDI-TOF分析鉴定差异蛋白质。结果血清经预处理后,可提高样品的上样量,2DE-PAGE图谱的蛋白质点数明显增加,水平条带明显减少。大肠癌患者血清中共筛选2个差异的蛋白点,经质谱鉴定为转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)和细胞角蛋白1(cytokeratin-1,CK-1)。其中TTR在大肠癌患者血清中为低表达,而CK-1为高表达。大肠癌患者血清中TTR含量为(245.87±60.72)mg/L,明显低于大肠腺瘤组和正常血清组[分别为(299.53±67.91)、(311.31±67.01)mg/L,P<0.01]。结论 2DE-MS技术是筛选和鉴定疾病血清标志物的良好工具,TTR可能是大肠癌潜在的血清标志物。 | 何渝军 牟芝蓉 黎万玲 刘宝华 吴玉章 | 2012 | 第三军医大学学报2012,34,18: | 1 |
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