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1PCR技术检测麻风分枝杆菌进展显示文摘麻风病是一个严重的公共卫生问题,由于麻风分枝杆菌不能体外培养,控制疾病传播主要依靠早期诊断。临床诊断主要依据抗酸染色结果和临床体征,但抗酸染色方法敏感性低。本文就PCR技术尤其是巢式PCR和实时定量PCR检测麻风分枝杆菌的可行性和应用作一综述。温艳 谷俊朝 2012中华实用诊断与治疗杂志2012,26,9:3
2单管巢式实时PCR检测麻风杆菌方法的建立及初步应用显示文摘目的:明确单管巢式实时 PCR 检测麻风杆菌的特异性、灵敏性和重复性。方法:以麻风杆菌 hsp18基因为靶基因设计引物和探针,建立单管巢式实时 PCR 方法检测麻风杆菌并与抗酸染色及普通 PCR 进行特异性和灵敏性的比较。结果:单管巢式实时 PCR 检测下限为2.1 fg 质粒 DNA,普通PCR 为21 fg 质粒 DNA,敏感性高10倍;与8种非麻风杆菌无交叉反应;批内相对标准偏差(RSD)为0.24%~1.08%,批间 RSD 为0.09%~2.8%。对比检测54例麻风疑似标本中,抗酸染色、普通 PCR 和单管巢式实时 PCR 的敏感性分别为81.3%(26/32)、87.5%(28/32)和96.9%(31/32)。结论:单管巢式实时 PCR 特异性强、敏感性高且重复性好。覃晓琳 黄进梅 薛耀华 曾维英 吴兴中 欧江丽 蓝银苑 唐三梅 方铭恒 百顺 郑和平 2014中国麻风皮肤病杂志2014,30,10:2
3建立实时定量PCR检测临床样品中的麻风杆菌DNA显示文摘目的探讨建立实时定量PCR检测麻风病的方法,评价该方法对于麻风病的诊断价值。方法用17种可培养的分枝杆菌和4种常见球菌和杆菌检测RT-PCR的特异性,并系列稀释已知量的菌液至10-9以检测RT-PCR的敏感性。临床标本40例,包括TT 2,BT 17,BL 17,LL 1,I 3例。其中取皮损组织26份,常规组织液27份及血液样品34份。结果 RT-PCR最低检测限约为4.9个麻风菌/反应,17种其他分枝杆菌和4种细菌常见球菌和杆菌DNA均未扩增出RLEP片段。检测皮损、组织液和血液三种标本,发现皮损标本中麻风菌量最多;BI值与皮损中麻风菌DNA的Ct值之间存在负性相关,提示RT PCR可作为参考值用于定量患者麻风菌载量。结论用RLEP RT-PCR定量麻风菌细菌负荷,该方法敏感性高、特异性强,具有临床参考价值。邢燕 温艳 袁联潮 刘健 张颖 李桓英 2014中国热带医学2014,14,10:1
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