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| 1 | 不同标记方法对大鼠骨髓间充质干细胞标记的研究显示文摘目的观察Hoechest33342、BrdU、DAPI对大鼠BMSCs标记情况,比较其标记效果的差异性;培养转基因绿色荧光小鼠的BMSCs,观察细胞生长情况和其荧光持续时间,比较其与荧光标记后的干细胞之间的优越性。方法贴壁筛选提取大鼠BMSCs,培养至第三代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI标记大鼠BMSCs,检测标记后的大鼠BMSCs增殖率,显微镜下观察其荧光持续时间;观察转基因绿色荧光小鼠BMSCs在培养的不同时间段的细胞形态、荧光持续时间以及同上边3种标记方法比较的优缺点。结果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于对BMSCs的标记;BrdU标记过程较长,在前期不存在荧光猝灭缺点,标记后经过荧光免疫组化处理后可见阳性细胞,Hoechest33342、DAPI标记过程较短,荧光持续时间较长,但此过程中必须避光,对操作带来了一定的困难。3种方法标记后对细胞增殖率无影响;转基因小鼠BMSCs生长较大鼠干细胞生长较慢,其优点是不用标记且荧光持续时间较长,用于细胞追踪研究更为方便可行。结论干细胞有多向分化的潜能,因此有很好的研究价值和应用价值,对干细胞进行标记,为干细胞迁移、归巢机制的研究提供更好的研究平台。 | 谢兴文 侯费祎 李宁 李盛华 宋敏 | 2013 | 中国骨质疏松杂志2013，19，2： | 1 |
| 2 | 鼠重组腺病毒介导的骨形成蛋白-9转染大鼠牙囊干细胞的实验研究显示文摘目的:探讨鼠重组腺病毒介导的骨形成蛋白9基因转染大鼠牙囊干细胞的可行性及其转染后的成骨作用,以获得可用于牙周骨组织再生工程的基因修饰的种子细胞。方法:取大鼠下颌骨,解剖显微镜下体外分离培养纯化鉴定牙囊干细胞,腺病毒介导的骨形成蛋白9基因转染第三代牙囊干细胞,并设立空白对照组,绿色荧光病毒组(GFP组)。通过观察细胞形态及生长曲线变化,荧光显微镜及RT-PCR检测转染后骨形成蛋白9基因mRNA的表达,碱性磷酸酶及钙茜素红染色测定转染后牙囊干细胞的成骨活性。结果:与未转染对照组比较,转染组细胞转染2周后形成钙化结节,停滞期延长,数量轻度下降,倍增时间延长。牙囊干细胞转染骨形成蛋白9基因后12 h后即有荧光表达,转染3,6,9,12 d后骨形成蛋白9mRNA均呈阳性表达且逐渐增强,未转染对照组呈阴性。转染组碱性磷酸酶活性随转染时间的延长呈升高趋势,ALP染色及茜素红钙结节染色为阳性:未转染对照组碱性磷酸酶染色及钙茜素红染色均呈弱阳性表达,转染组显著高于未转染组。结论:鼠重组腺病毒介导的RBMP-9基因可以成功地转染大鼠牙囊干细胞,转染后牙囊干细胞高表达骨形成蛋白9,且具有明显的成骨作用。 | 杨霞 李丛华 叶国 邓锋 罗进勇 周兰 | 2012 | 激光杂志2012，33，4： | 1 |
| 3 | 地塞米松与血管内皮生长因子共同促进骨髓间充质干细胞形成毛细血管样结构的研究显示文摘目的:观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在地塞米松(dexamethasone,DEX)和血管内皮生长因子(vascular en-dothelial growth factor,VEGF)组成的培养液中是否能形成毛细血管样结构。方法:将BMSCs在加入DEX(10-8mol/L)和VEGF(10μl)形成的微环境中培养12天,采用光镜和透射电镜观察血管样结构的形成情况;将BMSCs培养12天后与海藻酸钠凝胶混合后移植入Wistar大鼠体内让其继续生长,10天后取材,采用组织切片HE染色观察血管的生成情况。结果:透射电镜可观察到数个细胞通过紧密连接围成一个环状、类似于血管样结构;组织切片HE染色显示生成了原始血管腔。结论:DEX和VEGF形成的微环境可以使BMSCs分化后形成毛细血管样结构,并在活体动物体内进一步形成原始血管腔。为骨组织工程化血管形成提供了一条新的途径。 | 徐杰 王嫣 罗月苹 向波 周兰 陈文直 | 2012 | 激光杂志2012，33，4： | 0 |
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