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| 1 | 负载肿瘤干细胞膜微粒的DC-CIK/CTL细胞协同西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤作用及其机制显示文摘目的:探讨负载结直肠癌干细胞膜微粒(membrane microparticles,MMPs)DC-CIK与西妥昔单抗(Cetuximab,C225)对EGFR靶向药耐药结直肠癌细胞的靶向协同杀伤作用及其机制。方法:PCR法检测结直肠癌SW480、SW620、HCT116株细胞k-RAS突变状态,无血清悬浮细胞培养法富集SW480、HCT116肿瘤干细胞,RT-PCR检测干细胞标志物Sox-2和Oct-4。提取外周血单个核细胞培养DC与CIK,将结直肠癌干细胞MMPs负载DC后再与CIK共孵育。形态观察及MTT法分别检测DC-CIK/CTL细胞及其培养上清、C225单独和合并处理对SW480、SW620、HCT116及其干细胞的杀伤效应;RT-PCR检测DC-CIK/CTL细胞培养上清、C225单独和合并作用对SW480、SW620、HCT116细胞凋亡相关基因Fas和上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关E-钙黏蛋白和波形蛋白基因的表达,划痕实验测定DC-CIK/CTL细胞培养上清、C225单独及联合作用对结直肠癌细胞侵袭行为影响。结果:SW480、SW620和HCT116细胞均为k-RAS突变型;富集培养获得的结直肠癌干细胞样细胞高表达Sox-2和Oct-4 mRNA。MMPs负载DC-CIK/CTL细胞及其分泌上清与C225对结直肠癌细胞的抑制有协同作用。C225与MMPs负载DC-CIK/CTL上清联合组相对于两者单独作用组能提高Fas与E-钙黏蛋白基因的表达;联合组的迁移率比两者单独作用组小。结论:负载结直肠癌干细胞MMPs的DC-CIK/CTL细胞对EGFR靶向药耐药结直肠癌细胞有体外特异靶向杀伤效应,且与C225显著协同,其发生机制与逆转细胞EMT和诱导细胞凋亡有关。 | 庞翠 王金燕 胡志昊 段琼 李丁 刘文超 张菊 | 2016 | 中国肿瘤生物治疗杂志2016，23，6： | 6 |
| 2 | 结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用显示文摘目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81;采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况;对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞(CSCLC)在软琼脂上的克隆形成能力;采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力;用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)或mitomycin C处理下的生长抑制情况;用MTS法、Annexin V/PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况;MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果:无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因;对5-FU及mitomycin C相对抵抗;在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞,表明这些细胞具有干细胞特性,即为来自于SW620的CSCLC。DHA和(或)EPA作用于SW620CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡,并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论:无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞,它们具有高克隆形成能力及高致瘤性,对化疗药物相对抗拒;DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。 | 方仕 龙健婷 张冰 杨婷 卢味 李鹤平 石汉平 | 2014 | 中国病理生理杂志2014，30，12： | 5 |
| 3 | 恶性胸水培养肿瘤细胞失败原因分析显示文摘目的目前在肿瘤化疗体外药敏及生物免疫治疗中很重要的一个步骤是获取原代肿瘤细胞,通过对培养失败的原因分析,揭示肺部肿瘤细胞原代培养中应注意的问题,以便今后选择正确的培养方法,避免再走弯路.方法无菌条件下取恶性胸水沉渣接种于RPMI Medium 1640,观察细胞生长情况.结果 15例标本培养观察约10 d能见到大量成纤维细胞生长,8例标本曾见到肿瘤细胞生长,但继续培养后肿瘤细胞死亡.8例未见到肿瘤细胞生长.结论胸水采集量不足,沉淀后细胞数量少是失败的最主要因素;未及时送培养;未行冷藏送检;未及时清除成纤维细胞均为失败的重要原因. | 周开华 陈晓丹 宋鑫 | 2011 | 昆明医学院学报2011，32，5： | 2 |
| 4 | 无血清培养基在分离培养肿瘤干细胞研究中的应用显示文摘肿瘤干细胞的分离和鉴定是肿瘤干细胞研究的关键。目前已利用无血清悬浮培养法从视网膜母细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、乳腺癌、肺癌、结肠癌等多种肿瘤中成功分离、富集出肿瘤干细胞,使这些肿瘤干细胞的生物学功能和特性逐渐被认识。本文从无血清培养基的构成及其在眼部和部分全身肿瘤干细胞的分离培养中的应用方面进行综述,以期为眼部肿瘤干细胞的进一步研究提供依据。 | 周蓓清 何彦津 | 2012 | 中华眼科杂志2012，48，9： | 1 |
| 5 | 结肠癌Caco-2细胞株无血清培养技术研究显示文摘目的探索人结肠癌Caco-2细胞株肿瘤干细胞的分选方法。方法应用无血清悬浮培养法培养Caco-2细胞,产生肿瘤细胞球,并对肿瘤细胞球从形态学、分化、自我更新及交替培养等方面进行鉴定。结果 Caco-2细胞在无血清培养基(SFM)中可存活,24 h后可产生少量体积较小松散的悬浮肿瘤球,肿瘤球体积随时间延长而增大;将肿瘤球接种于完全培养基中12 h后细胞贴壁生长,细胞形态与传统培养形成的单细胞层无明显差异,重新消化贴壁细胞后再次悬于SFM中24~72 h后仍可形成悬浮细胞球,其形态与原代相同。结论结肠癌Caco-2细胞在SFM中可生成悬浮肿瘤细胞球,采用无血清悬浮培养法可达到富集肿瘤干细胞的目的。 | 陈小燕 吴应强 赵逵 朱蓉 | 2019 | 现代医药卫生2019，35，2： | 0 |
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