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| 1 | 兔出血症病毒主要结构蛋白基因的克隆、原核表达及其免疫原性鉴定显示文摘本试验采用RT-PCR方法扩增了兔出血症病毒(rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)衣壳蛋白VP60基因。PCR产物纯化后连接T载体,提取质粒后,进行序列测定,将测序正确的纯化产物双酶切,克隆入原核表达载体pET28b(+)中,构建原核表达载体。将鉴定正确的重组质粒转化表达宿主菌E.coli RosettaTM,用IPTG诱导培养重组表达菌。经SDS-PAGE分析,在分子质量62.0ku处可见明显的表达带,经Western blotting检测,约在62.0ku处出现特异性的反应带。结果表明,表达蛋白具有良好的抗原性。 | 隋慧 | 2012 | 中国畜牧兽医2012，39，5： | 5 |
| 2 | 兔病毒性出血症病毒抗体间接ELISA检测方法的建立显示文摘建立一种检测兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法。对RHDV陕西分离株VP60基因进行原核表达,Western blot分析表达产物的免疫反应性;以纯化的蛋白为包被抗原建立ELISA方法,并对反应条件进行优化。结果表明,VP60蛋白在大肠杆菌中成功表达,产物约为42.34 ku的融合蛋白,具有良好的反应原性;优化的ELISA最佳工作条件为:重组抗原包被浓度2.9μg/mL,37℃2 h后4℃过夜,1%BSA 37℃封闭2 h,待检血清37℃孵育1 h,酶标抗体1∶10 000稀释,37℃作用1 h,37℃显色5 min,临界值为0.340;建立的ELISA方法特异性强、重复性好、敏感性高;临床检测180份样品,与血凝抑制试验的符合率为74.1%,与商品化试剂盒检测结果符合率为94.8%。该方法可用于临床样品的大批量检测。 | 邱立 郝华芳 王兴龙 陈胜利 王佳 | 2013 | 畜牧与兽医2013，45，1： | 3 |
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