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1离体昆虫细胞对AcNPV和BmNPV的敏感性测定与分析显示文摘采用来源于3个目14种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcNPV(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus)和家蚕核型多角体病毒BmNPV(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus)进行敏感性测定。试验结果表明:各昆虫细胞系对两种病毒的敏感性不同,来源于双翅目及直翅目的细胞系均不能被这两种病毒感染;AcNPV可侵染来源于鳞翅目的Sf21、Sf9、HighFive、RIRI-PX及HZ,宿主范围较广;而BmNPV仅能侵染BmN细胞,宿主专一。AcNPV对Sf9细胞的感染率最高,接种病毒10 d后感染率平均达84.0%,而RIRI-PX的AcNPV病毒产量最高,形成的多角体数目为43.9PIBs/感染细胞。接种BmNPV10 d后,BmN的感染率为72.2%,形成的多角体数目为23.1.PIBs/感染细胞。张欣 冯颖 丁伟峰 马涛 2011林业科学研究2011,24,3:2
2PRRSV E蛋白的表达及检测抗体胶体金试纸的研制显示文摘为了建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,试验采用RT-PCR扩增ORF5基因,克隆至原核表达载体pET-28a上,诱导重组质粒转化菌表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况,Western-blot检测表达蛋白免疫活性,亲和层析纯化表达蛋白。用SPA标记胶体金,分别以纯化E融合蛋白和羊抗猪抗体为检测线和质控线制备胶体金试纸,用所研制的试纸检测猪血清样品40份,并与IDEXX ELISA试剂盒的检测结果进行比较。结果表明:成功表达E融合蛋白,表达蛋白具有良好的反应原性,纯度为90%;制备的胶体金试纸与IDEXX ELISA试剂盒检测符合率为92%。说明该种方法可检测PRRSV抗体。杨欢 吴天成 刘禹 郑鑫 崔焕忠 2014黑龙江畜牧兽医2014,,5:1
3PRRSV重组M蛋白表达及胶体金试纸的制备显示文摘为建立PRRSV抗体的检测方法,通过扩增PRRSV ORF6基因,将其克隆至pET-28a(+)中,IPTG诱导重组质粒转化菌表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,表明重组质粒能够表达目的蛋白;经亲和层析纯化表达蛋白,以SPA标记胶体金,用纯化M融合蛋白和羊抗猪抗体为检测线和质控线研制胶体金试纸,检测猪血清样品,比较与IDEXX ELISA试剂盒检测结果的符合率。结果表明,表达蛋白具有良好的反应性,制备的胶体金试纸与IDEXX ELISA试剂盒检测符合率为89%,该方法为PRRSV抗体的检测提供了快速简便的方法。张辉 崔焕忠 杨欢 吴天成 马思慧 兰海楠 杨艳红 付志玲 刘禹 郑鑫 2014中国兽药杂志2014,48,1:0
4猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白与糖蛋白的表达纯化及鉴定显示文摘为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(N)和糖蛋白(E),试验通过RT-PCR反应获得ORF7和ORF5基因片段,分别克隆至原核表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况,Western blotting检测表达蛋白的免疫活性,采用亲和层析对表达蛋白进行纯化。结果表明,成功表达N和E融合蛋白,Western blotting结果表明表达蛋白具有良好的反应原性,纯化蛋白的纯度分别为89%和90%。融化蛋白的表达为PRRSV的分子生物学功能研究和测定抗体检测方法的建立奠定了基础。张辉 崔焕忠 兰海楠 杨艳红 付志玲 郑鑫 2014中国畜牧兽医2014,41,3:0
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