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| 1 | 鸡β-防御素2在大肠杆菌中的串联表达及抗菌活性分析显示文摘利用基因串联技术表达鸡β-防御素2(AvBD2)重组蛋白,分析其生物结构活性以及蛋白表达量变化。构建了重组串联表达载体p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并将其转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达融合蛋白,经镍柱纯化后进行Western-blot检测、Tricine-SDS-PAGE分析和MALDI-TOF-MS质谱分析。结果显示,单表达工程菌和串联表达工程菌均在9500 u处有特异性条带;采用BCA法测得的单、串联表达工程菌纯化后的蛋白质量浓度分别为0.258和0.769 mg/m L;通过凝胶成像系统分析,单表达工程菌中目标蛋白的表达量约占上清总蛋白的10.3%,而串联表达的约占上清总蛋白的18.3%;MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,单、串联表达蛋白产物的分子质量分别为4 300、7 811 u;琼脂孔穴扩散抑菌法检测证明纯化蛋白对多种微生物具有不同的抗菌活性。 | 石水琴 魏海婷 祁克宗 涂健 吕小龙 刘红梅 薛挺 周秀红 | 2016 | 中国兽医科学2016，46，4： | 4 |
| 2 | “自身模板引物”PCR法构建蟋蟀神经肽Grb-AST_7基因串联体(英文)显示文摘[目的]通过改进的'自身模板引物'PCR法构建Grb-AST7基因串联体。[方法]根据蟋蟀神经肽Grb-AST7氨基酸序列设计合成2条引物,运用改进的'自身模板引物'PCR法进行拼接。[结果]通过拼接,获得了全长570bp、含17个拷贝的Grb-AST7基因串联体。拼接条件以拼接时间20min,25μlPCR体系中含2μl模板引物较合适。[结论]该研究为下一步进行基因表达及其生物学活性分析奠定了基础。 | 查笑君 马伯军 潘建伟 黄俊生 | 2010 | Plant Diseases and Pests2010，1，2： | 0 |
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