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| 1 | 苦荞查尔酮合酶基因CHS的结构及花期不同组织表达量分析显示文摘采用同源克隆、染色体步移和RT-PCR技术,首次克隆到苦荞查尔酮合酶基因(CHS)的全长DNA序列和cDNA开放阅读框(ORF)序列.序列分析表明,苦荞CHS DNA序列(GU172165)全长1 632 bp,含1个445 bp的内含子;cDNA编码区(HM852753)全长1 188 bp,编码395个氨基酸,命名为FtCHS.生物信息学分析表明,FtCHS和推导的氨基酸序列与其它植物CHS基因同源率在95%以上,含有CHS多基因家族的标签序列(GFGPG)、活性位点、底物结合口袋位点和环化反应口袋位点.半定量RT-PCR分析苦荞花期FtCHS空间表达模型表明,其表达量未成熟种子>叶>茎>花>根>成熟种子,与苦荞芦丁含量的分布基本一致,具有组织特异性。 | 吴琦 李成磊 陈惠 邵继荣 赵海霞 苟琳 | 2010 | 中国生物化学与分子生物学报2010，26，12： | 13 |
| 2 | 杧果查尔酮合成酶基因(CHS1)的克隆与表达分析显示文摘【目的】克隆鉴定杧果CHS基因,分析其功能,明确杧果不同组织器官中CHS基因表达情况。【方法】以海南种植的6个杧果种的叶片总DNA和c DNA为模板,进行同源性PCR扩增,然后克隆到p MD18-T载体上,进行测序;通过生物学软件预测分析CHS基因编码的蛋白质;运用半定量PCR分析CHS基因表达情况。【结果】测序得到6个杧果种CHS基因c DNA全长为1 173 bp,CHS基因含有2个外显子和1个内含子。基于c DNA序列的NJ系统发育树显示,其与普通杧果(Mangifera indica)CHS1基因同源性最高。CHS1基因半定量表达显示杧果不同器官均表达CHS1基因,但在叶片和花中的表达量较高。【结论】克隆了杧果查尔酮合成酶1(CHS1)基因,半定量分析了杧果不同器官中CHS1基因的表达差异,为下一步研究提高CHS1基因的表达量奠定了基础。 | 梅志栋 张贺 刘晓妹 黄建峰 蒲金基 | 2015 | 果树学报2015，32，6： | 9 |
| 3 | 荞麦分子遗传学研究进展显示文摘近年来生物技术使荞麦的分子遗传学研究取得了长足的进步,为进一步对荞麦分子遗传学进行研究,从种间亲缘关系、种质资源遗传多性性、遗传图谱构建、农艺性状及相关基因定位、基因克隆及功能研究、基因组测序等6个方面对荞麦分子遗传学研究进展进行了综述,提出了荞麦分子遗传研究中存在的问题,并对其发展趋势进行了展望。 | 黎瑞源 石桃雄 刘筱嘉 陈庆富 | 2014 | 黑龙江农业科学2014，，11： | 8 |
| 4 | 二型花柱植物金荞麦的繁殖生态学研究显示文摘通过野外实验观察和人工控制套袋等方法,从金荞麦的花部基本特征、开花动态、花粉胚珠比(P/O)、花粉活力、柱头可授性、杂交指数、套袋实验及访花昆虫等方面对其繁殖生态学进行了研究。结果显示:(1)金荞麦在同一居群中同时具有长柱型(L-型)和短柱型(S-型)两种花型,短花柱花直径(7.25±0.11mm)显著大于长花柱花直径(6.79±0.11mm),长花柱花的柱头和花药高分别为3.39±0.04mm和1.80±0.02mm,短花柱花的柱头和花药高则分别为1.89±0.04mm和3.19±0.06mm,表现出互补式雌雄异位的花部特征。(2)金荞麦8~10月开花,单花序的花期为15~23d,单花的花期为1~3d,开花进程中,内轮雄蕊先散粉,外轮雄蕊后散粉;S-型花的花粉活力高于L-型花的花粉活力,但其单花花粉量低于L-型花,显示了两种花型的自我调控机制。(3)套袋实验表明,金荞麦自花自交不亲和,但具有型内和型间亲和性,L-型和S-型花的P/O值分别为810±40.48和526.5±42.24,表明其繁育系统为兼性异交,需要传粉者,但L-型花更倾向异交。(4)金荞麦的主要访花昆虫为膜翅目(Hymenopter-a)、双翅目(Diptera)、鳞翅目(Lepidoptera)、半翅目(Hemiptera)和蜻蜓目(Odonata)19个科37种昆虫,其中,两种花型拥有12种共同的访花昆虫,L-型花访花昆虫14种,S-型花访花昆虫35种,表明S-型花对昆虫具有更强的吸引力。研究表明,金荞麦是典型的二型花柱植物,虽然具有严格的自交不亲和性,但显示一定的型内亲和性。 | 张万灵 周兵 肖宜安 闫小红 张争光 李晓红 | 2013 | 西北植物学报2013，33，3： | 7 |
| 5 | 两种策略分别克隆紫花苜蓿光敏色素A、B基因显示文摘短日照是苜蓿秋眠性的主要影响因子,故苜蓿秋眠被认为是一种光周期反应。光敏色素是光周期反应的主要受体,因而探究光敏色素与苜蓿秋眠性之间的关系可能是揭示苜蓿秋眠性机理的有效途径之一。紫花苜蓿光敏色素A、B基因尚未被克隆,本研究采用2种不同的试验策略,分别以mRNA和基因组DNA为起点,根据比较基因组学原理和生物信息学方法,利用RACE和染色体步移等手段,克隆得到了紫花苜蓿光敏色素A全长和光敏色素B近全长基因序列,为进一步探讨两者在苜蓿生长发育,特别是苜蓿秋眠性的光周期调控机制中的作用奠定了基础,并为克隆紫花苜蓿其他未知基因等研究提供思路和参考。 | 李平 杨玲玲 陈其新 史莹华 严学兵 陈占宽 王成章 | 2011 | 草业学报2011，20，6： | 4 |
| 6 | 青花菜BoCHS2基因的克隆、表达和反义载体的构建显示文摘根据前期的研究结果设计PCR引物,从青花菜(Brassica oleracea var.italica)叶片基因组DNA和cDNA中克隆到了查尔酮合成酶基因,定名为BoCHS2。BoCHS2的基因组DNA全长为1267bp,具一个长度为85bp的内含子,基因编码区全长为1182bp,编码393个氨基酸。基因序列已提交至NCBI,登录号为HQ189776。与BoCHS相比,在核苷酸和氨基酸组成上的差异分别为27bp和8个氨基酸。RT-PCR结果表明,在霜霉菌诱导下,叶片和子叶中BoCHS2的表达量增加。将BoCHS2片段反向插入到带有绿色荧光蛋白基因的pCAMBIA1300载体中,成功构建了植物反义表达载体。 | 蒋明 苗立祥 钱宝英 魏冬梅 | 2011 | 核农学报2011，25，3： | 4 |
| 7 | 苯丙氨酸与UV-C对苦荞芦丁含量影响及相关基因表达分析显示文摘【目的】克隆与苦荞芦丁生物合成相关基因序列,探讨外源前体物质及UV-C辐射条件下芦丁含量及基因表达水平的影响,为分子选育高芦丁含量荞麦品种奠定基础。【方法】基于简并引物结合3′RACE的方法,克隆苦荞芦丁合成途径相关基因;高效液相色谱(HPLC)测定持续添加外源苯丙氨酸(L-phenylalanine,Phe)前体(1、2、4 mg.L-1)1—5 d和辐射时间(1、3、5、7 h)UV-C处理条件下叶片芦丁含量的变化,qRT-PCR分析相关基因表达水平。【结果】Phe(4 mg.L-1)处理1 d,芦丁含量(26.15 mg.gFW-1)为未处理对照(12.55 mg.gFW-1)的2倍;UV-C辐射3 h,芦丁含量(17.36 mg.gFW-1)明显高于对照;克隆到3个基因FtCHS,FtF3H和FtFLS-like,qRT-PCR分析表明Phe(1 mg.L-1)处理4 d,FtCHS相对表达量为对照的4.84倍,Phe(4 mg.L-1)处理5 d,FtF3H相对表达量为对照的1.06倍,Phe(2 mg.L-1)处理5 d,FtFLS-like相对表达量为对照的3.90倍;UV-C辐射1—3 h,FtCHS、FtF3H和FtFLS-like相对表达量分别高于对照。而FtFLS-like基因,仅在UV-C辐射1 h,相对表达量升高为对照的127.71倍。【结论】添加不同浓度Phe前体及不同时间UV-C辐射,芦丁含量变化及与芦丁合成相关基因表达量存在差异,为进一步探讨芦丁生物合成途径及影响因素奠定基础。 | 孙朝霞 侯思宇 杨武德 | 2011 | 中国农业科学2011，44，23： | 4 |
| 8 | OjCHS原核表达载体的构建及重组蛋白的纯化显示文摘查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)是类黄酮生物合成过程中的第一个关键酶,也是限速酶,它直接影响并限制类黄酮的合成与积累。在克隆得到日本蛇根草CHS基因(Oj CHS)基础上,将该基因插入原核表达载体pET-28a,完成重组表达质粒pET28a-CHS的构建。随后,利用冻融法将上述质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞中用于重组蛋白的表达。选择不同IPTG浓度、诱导温度及诱导时间对重组菌进行诱导,确定了可溶性重组蛋白的最佳诱导表达条件。最后,通过洗脱、纯化、透析与浓缩完成重组蛋白的纯化。结果显示,成功构建原核表达载体pET28a-CHS,可溶性重组蛋白最佳诱导条件为:IPTG浓度0.45 mmol·L-1,25℃下诱导12 h。最后大量制备并纯化获得符合预期大小的可溶性蛋白,为深入研究Oj CHS的生物学功能奠定了基础。 | 孙威 林建 申欢 彭贵 鞠志刚 马玲 乙引 | 2018 | 安徽农业大学学报2018，45，6： | 3 |
| 9 | 紫花苜蓿几丁质酶ClassⅠ基因cDNA全长克隆及序列分析显示文摘依据NCBI中已登录的截形苜蓿(Medicago truncatula)几丁质酶基因的一段EST序列(GenBank登录号:AF167323)设计引物,以紫花苜蓿(Medicago sativaL.)为试验材料,利用RACE技术进行cDNA全长克隆。利用生物信息学软件对该序列进行分析得知:该基因全长1 132 bp,其中含有1个930 bp的开放阅读框,编码309个氨基酸。分子质量为33.538 ku,等电点pI为5.258,是一个酸性蛋白且分泌到胞外。将该基因命名为MsChiⅠ(GenBank登录号为HM224449)。聚类分析显示:它与其他已知植物ClassⅠ类几丁质酶基因具有高度的同源性;结构分析表明:该蛋白的二级结构中α螺旋、延伸链、β转角和无规则卷曲分别占25.89%、10.68%、4.21%、59.22%;功能分析可知:该蛋白为亲水性非跨膜蛋白,属于几丁质酶第19家族。 | 伊亚莉 关宁 张文娟 王涌鑫 苗丽宏 李聪 | 2011 | 江苏农业科学2011，39，2： | 1 |
| 10 | 黑稻CHS基因外显子Ⅱ部分序列遗传变异分析显示文摘以汉中栽培2种黑稻(黑丰,黑米B)和1种白稻(香粘)为材料,根据水稻查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因DNA序列的保守区域设计3对引物,进行PCR扩增,获得CHS外显子Ⅱ部分序列,测序并与籼稻CHS基因(X 89589.1)比对,发现有13处SNP,这些SNP可能是黑稻种子黄酮类物质含量差异的重要原因之一。稻和其他植物CHS基因外显子Ⅱ序列的进化分析表明,CHS基因虽然整体上反映进化关系,但由于不同基因的进化历史不同,因此单独用CHS基因的进化树来反映物种的进化关系是不确切的,而应尽量选择多位点进行研究。研究结果为高黄酮类物质含量的黑稻育种和黑稻CHS基因在分子系统分类方面提供了必要数据。 | 邓文辉 张涛 吴三桥 李新生 | 2011 | 种子2011，30，9： | 1 |
| 11 | 金荞麦ISSR-PCR反应体系的建立与优化显示文摘为金荞麦品种ISSR指纹图谱建立、新品种选育、数量性状基因定位等工作提供科学依据,以金荞麦为材料,通过单因素试验和正交试验对影响ISSR-PCR反应体系的主要成分进行了优化,建立了稳定、可重复的金荞麦ISSR-PCR扩增反应体系。在20μL的反应体系中10×PCR buffer(不含Mg2+)2.0μL,2U Taq DNA聚合酶0.1μL,0.25mmol/L dNTPs 2.5μL,20ng/μL基因组DNA 1.0μL,2.5mmol/L Mg2+1.2μL,100μmol/L引物0.6μL,去离子水12.6μL。 | 王安娜 邓蓉 张定红 | 2012 | 贵州农业科学2012，40，6： | 1 |
| 12 | NO信号分子及其在植物抗病反应中的作用研究综述显示文摘NO是一种重要的信号分子,在植物抗病反应中起重要作用,可提高抗氧化酶活性,激发苯丙烷代谢途径,刺激植物过敏反应的发生。植物体内NO产生途径有NOS产生途径、NR途径、非酶促途径3种。本文进行了综述。 | 王晨 | 2019 | 现代园艺2019，0，11： | 1 |
| 13 | 马蹄查耳酮合酶基因的克隆及其在鲜切马蹄中的表达分析显示文摘以鲜切马蹄为试材,利用RT-PCR和RACE技术克隆马蹄CHS基因全长序列,并对该基因进行生物信息学分析及表达分析,以期为该基因的功能研究提供参考依据。结果表明:在马蹄中克隆到CHS全长cDNA序列,基因命名为CwCHS。CwCHS基因全长1 519bp,编码394个氨基酸。CwCHS蛋白分子式为C1 927H3 072N526O568S21,分子量为43.37kDa。该蛋白质包含3个保守结构域,含有5个酪蛋白激酶Ⅱ识别位点、1个蛋白激酶C识别位点、6个N-豆蔻酰化位点和1个糖基化位点,其二级结构以α-螺旋为主。多重比对结果表明,CwCHS具有高度保守的酶活性位点,并与其它植物的CHS蛋白有很高的同源性。系统进化分析表明CwCHS与菠萝CHS蛋白亲缘关系较近。荧光定量PCR分析结果表明鲜切马蹄贮藏过程中CwCHS表达量快速上升,水杨酸处理显著抑制了CwCHS的表达。试验发现,CwCHS的表达水平与鲜切马蹄黄化关系密切。 | 宋慕波 帅良 李淋 方方 陈振林 段振华 | 2018 | 北方园艺2018，，22： | 1 |
| 14 | 汉中地区不同黑稻品种查尔酮合成酶基因的遗传变异分析显示文摘为汉中黑稻起源及其花青苷合成机制提供分子遗传依据,通过分析汉中地区8个黑稻品种和其他植物查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因序列,利用PCR扩增8个黑稻品种查尔酮合成酶基因并测序,使用DNAMAN和MEGA5.0软件分别对水稻的CHS基因外显子序列进行比对和不同物种间的聚类。结果表明:水稻种内存在4个多态位点,8种黑稻中存在3个多态位点,比对CHS氨基酸序列,仅黑宝品种存在1个氨基酸突变。经聚类分析,8种黑稻亲缘关系最近,与籼稻聚为一类,然后与粳稻聚在一起,禾本科植物CHS同源性很高。结论:CHS是一个古老的基因,可作为种属鉴定的参考基因,CHS虽是花青苷合成的限速酶基因,但其序列的变异可能与黑稻花青苷的合成无相关性。 | 李蕊清 刘欢 田蕾铭 路宏朝 张力瑞 张辉 张涛 | 2016 | 贵州农业科学2016，44，3： | 0 |
| 15 | 金荞麦叶片光合响应特征及光合参数日变化显示文摘目的:研究金荞麦叶片光合响应特征及光合参数日变化与环境因子之间的相互关系。方法:利用便携式光合测定仪测定金荞麦叶片光合参数日变化和光响应曲线。结果:金荞麦叶片净光合速率日变化、气孔导度日变化均呈双峰曲线,有明显的光合午休现象;净光合速率数值分别为19.13,16.54μmol·m-2·s-1,谷底出现在14:00左右,净光合速率值为15.04μmol·m-2·s-1,约为最大峰值的78.62%,此时出现了较为明显的光合午休现象。净光合速率(Pn)与主要影响因子光合有效辐射(PAR),蒸腾速率(Tr),气孔导度(Gs)呈正相关,与大气CO2浓度(Ca),胞间CO2浓度(Ci)呈负相关。结论:金荞麦为气孔限制型植物,Pn存在明显的光合午休现象,光合有效辐射、蒸腾速率、气孔导度、大气温度是影响金荞麦叶片Pn的主要影响因子。 | 安衍茹 胡本祥 彭亮 王媛媛 黄涛 赵停 李洁 罗露 曹福麟 | 2018 | 中国实验方剂学杂志2018，24，19： | 0 |
| 16 | 元宝枫CHS基因片段的克隆及序列分析(英文)显示文摘[目的]对元宝枫叶片查尔酮合成酶(CHS)基因片段进行克隆及序列分析。[方法]以元宝枫的红叶新品系1~6号为试材,采用CTAB法提取其夏季与秋季叶片总RNA,搜索Gen Bank数据库中已报道的CHS基因序列,BLAST比对,然后用DNAMAN、Primerpremier5软件设计兼并引物来扩增其目的片段,采用RT-PCR方法扩增CHS基因片段并连接到p MD18-T载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序。[结果]得到一段1 365 bp的序列,序列分析表明,该片段编码365个氨基酸,与鸡爪槭、毛果槭的查尔酮合成酶(CHS)基因核苷酸序列同源性在90%以上。[结论]该研究首次从元宝枫中克隆出了CHS基因,为有效利用该基因奠定了基础。 | 马立敏 丰震 齐新玲 | 2016 | Agricultural Science & Technology2016，17，7： | 0 |
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