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| 1 | 细胞壁多糖水解酶及其在非粮生物质原料转化中的应用与研究进展显示文摘可再生生物能源在经济和环境的可持续性发展等方面具有潜在的巨大优势,然而生物能源工业化生产还面临着原料的选择和预处理等难题.对于解决这些难题,预处理技术特别是细胞壁多糖水解酶在非粮燃料乙醇(第1.5代和2代燃料乙醇)的生产过程中发挥了关键作用.本文主要综述了细胞壁多糖水解酶的特征及其在非粮燃料生物质原料转化中的应用,介绍了细胞壁多糖主要成分纤维素、半纤维素和果胶的结构特征,细胞壁多糖水解酶预处理安全、低能耗、成本低、设备简单以及环境友好等优势和多样性特点,及其在非粮燃料乙醇生产中的应用现状,总结了细胞壁化学结构研究、催化过程模型建立、分子水平及计算机科学水平等方面的新技术在该领域的应用.最后对细胞壁多糖水解酶的研究方向提出展望,我国已致力于第1.5代和2代燃料乙醇的研究,并将细胞壁多糖水解酶应用于非粮燃料乙醇工业化的生产. | 黄玉红 靳艳玲 方扬 赵海 | 2013 | 应用与环境生物学报2013，19，5： | 2 |
| 2 | 拟康氏木霉egl基因的克隆及在酿酒酵母中的分泌表达显示文摘从拟康氏木霉3.3002基因组中克隆了内切葡聚糖酶EGI基因,该基因全长1566bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸。编码蛋白EGI的N端为22aa组成的信号肽,其后依次为催化结构域、连接肽和结合结构域。采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因egI,并将其成熟肽编码序列插入酿酒酵母分泌型表达载体pYEα中,构建成pYEα-Peg1重组质粒,转化酿酒酵母。重组转化子经β-半乳糖诱导,检测表达产物的分子大小以及酶活,结果表明,转化子在刚果红平板上可产生明显的水解圈;酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EG I并分泌到胞外;SDS-PAGE电泳显示EGI蛋白分子量比预期目的蛋白稍偏大。 | 陶芳 王旭 江海洋 范军 朱苏文 程备久 | 2011 | 激光生物学报2011，20，6： | 1 |
| 3 | 新鞘氨醇杆菌属9-1的纤维素酶基因Nspcel8A的克隆表达与酶学特性显示文摘木质纤维素转化成燃料酒精是缓解能源和环境危机的途径之一。降低将木质纤维素转化成生物燃料的生产成本,需要提高纤维素酶产量或筛选到具更高酶活性的纤维素酶。新鞘氨醇杆菌(Genus Novosphingobium)属于鞘氨醇杆菌科(Sphingomonads),该科的细菌新陈代谢多样化,能够降解有机化合物,也可应用于木质素的降解,但目前新鞘氨醇杆菌属细菌的纤维素酶基因的研究未见报道。本研究对新鞘氨醇杆菌属细菌菌株9-1的纤维素酶基因Nspcel8A进行了克隆表达和酶学特性鉴定。Nspcel8A含有属于糖基水解酶家族8的催化结构域。该酶在大肠杆菌中实现了异源表达并获得了表达产物。Nspcel8A对羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose, CMC)的最适作用pH值和温度分别为4.0和40℃,Nspcel8A具有良好的pH值稳定性,在pH值3.5~11.0范围内放置24 h后能够保持60%以上的酶活力。Nspcel8A对CMC的K_(m)值为10 mg/mL,V_(max)为14μmol·min^(-1)·mg^(-1)。底物特异性测试显示Nspcel8A对CMC有最高的酶活力(8.40 U/mg),但对不可溶纤维维如磷酸膨胀纤维素和Avicel只有较低的酶活力或没有酶活。高效液相色谱法分析显示Nspcel8A不能降解纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖,能把纤维五糖部分降解成纤维二糖和纤维三糖,能把纤维六糖降解为纤维二糖、纤维三糖和纤维四糖,并以纤维三糖为主。以上结果显示Nspcel8A是一个内切葡聚糖酶,由于它不能水解结晶纤维素,说明它不是Novosphingobium sp.9-1主要的纤维素降解酶。 | 卢春艳 覃洁 李明栋 冯家勋 段承杰 | 2021 | 基因组学与应用生物学2021，40，4： | 1 |
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