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| 1 | 腐烂病菌的GFP标记及其在梨叶片组织中的侵染和扩展观察显示文摘【目的】明确梨腐烂病菌强、弱致病力菌株在梨树叶片组织中的侵染及扩展情况。【方法】利用农杆菌介导的遗传转化(agrobacterium-mediated transformation technique,ATMT)方法对梨腐烂病菌强、弱致病力菌株进行绿色荧光蛋白(green looresent protein,GFP)标记,并筛选出和野生型菌株比较在生长速度、培养特性以及致病力都没有发生显著变化的阳性转化子菌株;利用荧光显微技术观察其在梨树叶片组织中的侵染和扩展,比较强、弱致病力菌株的侵染差异。【结果】强、弱致病力菌株在叶片上侵染存在差异。菌丝主要在叶片的上表皮扩展,菌丝扩展前端的叶片组织颜色发生变化,形成一段变色带,强致病力菌株侵染形成的变色带较弱致病力菌株形成的变色带宽,强致病力菌株菌丝在叶片组织上的分布较稀疏。【结论】梨腐烂病菌菌丝主要在叶片的上表皮组织扩展;强致病力菌株的侵入能力较强,其在叶片上扩展时菌丝分布较稀疏,扩展前端形成的变色带宽。 | 贾娜娜 翟立峰 白晴 陈晓忍 王彩霞 洪霓 王国平 | 2015 | 果树学报2015，32，6： | 6 |
| 2 | 小麦抗赤霉病遗传与机理研究现状与展望显示文摘小麦赤霉病是一种世界性的真菌病害,研究小麦的遗传与机理能为小麦抗赤霉病研究提供理论依据。小麦赤霉病抗性类型可以分为抗侵染(TypeⅠ)、抗扩展(TypeⅡ)、抗脱氧雪镰刀菌烯醇毒素(DON)积累(TypeⅢ)、籽粒抗性(TypeⅣ)、耐病性(TypeⅤ)5种,前两者是目前小麦抗赤霉病研究的主要途径。迄今为止,已定名的抗性基因有7个,为Fhb1~Fhb7,但仅Fhb1和Fhb7被克隆,正在被逐渐应用在小麦抗赤霉病育种中。小麦赤霉病的抗性机理分为被动抗性(形态抗性)和主动抗性(生理抗性)2种。本文主要从小麦赤霉病危害、抗赤霉病主效基因和其他抗赤霉病QTL定位、生理和形态抗性机制研究进展等方面对小麦抗赤霉病的部分研究现状进行总结。提出在抗性基因克隆的基础上,结合细胞生物学、分子生物学,利用基因沉默、基因编辑等方法更进一步地对抗病遗传机制和机理进行研究,为小麦抗赤霉病遗传育种奠定基础。 | 廖森 方正武 张春梅 高德荣 胡文静 | 2021 | 江苏农业科学2021，49，19： | 6 |
| 3 | GFP标记的4种链格孢菌对枣树的侵染研究显示文摘【目的】进一步探寻引起枣缩果病的潜在侵染性病原,为枣缩果病的有效防治提供理论依据。【方法】选取苹果斑点落叶病菌、梨黑斑病菌、马铃薯早疫病菌和番茄黑斑病菌为供试菌株,测定其对潮霉素B的敏感性后再进行GFP标记,并以枣缩果病互隔链格孢菌作为对照,将通过稳定性测试的菌株进行幼果刺伤接种和枣树花期喷雾接种试验,探明它们在枣树上的侵染途径。【结果】苹果斑点落叶病菌、梨黑斑病菌、马铃薯早疫病菌和番茄黑斑病菌对潮霉素B均较敏感,其有效中浓度EC50值分别为1.489、2.241、3.299和2.873μg·m L-1,4种链格孢菌均被GFP成功标记且其稳定性均良好;林间刺伤接种苹果斑点落叶病菌、梨黑斑病菌、马铃薯早疫病菌、番茄黑斑病菌和互隔链格孢菌(对照)的枣果均发病且其症状相同,其发病率分别为75.0%、87.5%、81.3%、83.3%与93.8%;将各处理病果的病组织放在含有10μg·mL-1潮霉素B的PDA培养基上培养后,其均有菌丝生长,且均可观察到带有荧光的菌丝;花期喷雾接种4种链格孢菌和互隔链格孢菌后,枣果均发病,将其病组织分离培养后均有菌丝长出,且在荧光显微镜下均可观察到荧光。【结论】苹果斑点落叶病菌、梨黑斑病菌、马铃薯早疫病菌和番茄黑斑病菌均能侵染枣树,都有可能成为枣缩果病的潜在病原菌,因此,在枣树周围应避免种植上述易被链格孢菌危害的果树和作物,这样可以阻止链格孢菌的侵染。 | 田红雨 史晓梦 张敏 王亚聪 张书蔚 冉隆贤 | 2020 | 经济林研究2020，38，2： | 4 |
| 4 | 小麦矮腥黑粉菌在小麦体内侵染过程的显微观察显示文摘小麦矮腥黑粉菌可导致小麦矮腥黑穗病,是麦类黑粉病中危害最大、极难防治的国际重要检疫性病害之一.本研究结合扫描电子显微镜、透射电子显微镜及激光共聚焦显微镜观察该真菌在小麦(Triticum aestivum)体内的侵染过程.经观察发现,被该真菌侵染后的小麦叶片细胞超微结构发生了显著变化,如叶肉细胞畸形、质膜内陷和断裂、细胞核结构破坏及细胞器的基质电子密度下降;细胞间隙出现空细胞和纤维状膜状物等;菌丝随生长点移动;寄主小麦子房及花药被侵染导致无法成功受精.该真菌侵染小麦后不但影响小麦的正常生理,且在寄主小麦的根、茎、旗叶以及看似正常的成熟籽粒中均发现冬孢子. | 蔚慧欣 高利 沈慧敏 李超 刘太国 刘博 康晓慧 陈万权 | 2016 | 中国科学:生命科学2016，46，5： | 3 |
| 5 | Infection and Colonization of Pathogenic Fungus Fusarium proliferatum in Rice Spikelet Rot Disease显示文摘Rice spikelet rot disease(RSRD), caused by Fusarium proliferatum, is an emerging disease. So far, the effects of diseased rice floral organs as well as the primary infection sites and stages of this pathogen are not determined. We investigated changes in the floral organs, along with the infection processes of the pathogen in plants inoculated with F. proliferatum and labelled with a green fluorescent protein during different growth stages of rice. The results showed that RSRD is not a systemic infectious disease, which has negative effects on the fertility of the infected rice. F. proliferatum caused brown colored anthers, crinkled pistils and ovaries, pollen grain deformities and anther indehiscence. The number of pollen grains on the stigmas decreased significantly in the infected spikelets, and the anther dehiscence and seed-setting rate successively declined by 69% and 73%, respectively, as a result of the infection. The initial infection stage occurred at the pollen cell maturity stage, and the primary invasion sites were determined to be the anthers of rice. It was noted that the pathogen mainly damaged the pollen cells, and with the exception of the filaments, proceeded to colonize the pistils and endosperm. | SUN Lei WANG Ling LIU Lianmeng HOU Yuxuan XU Yihua LIANG Mengqi GAO Jian LI Qiqin HUANG Shiwen | 2019 | Rice science2019，26，1： | 3 |
| 6 | 绿色荧光蛋白基因在小麦禾谷镰刀菌中的表达与鉴定显示文摘为了获得稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的我国代表性小麦禾谷镰刀菌菌株用于小麦抗赤霉病接种鉴定与分析,以禾谷镰刀菌武昌菌株Fg175原生质体为受体,经PEG介导将序列优化的水母GFP基因转入该菌株中,分析鉴定了转基因菌株GFP基因的表达。PCR分析表明,Fg175基因组中整合了GFP基因,Western blot检测到高效表达的GFP特异蛋白;激光共聚焦显微镜及体视显微镜观察进一步证实,转基因菌株Fg175-GFP的分生孢子、菌丝及接种小麦麦穗均可发出清晰的绿色荧光。 | 李和平 张静柏 廖玉才 | 2010 | 麦类作物学报2010，30，5： | 2 |
| 7 | 苦瓜枯萎病原菌的绿色荧光蛋白基因标记显示文摘【目的】苦瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌苦瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.momodicae)侵染引起的一种重要土传病害。为有效防控该病害,对其病原菌进行绿色荧光蛋白基因(gfp)标记,为研究病原菌在苦瓜植株体内的侵染特性提供可视化跟踪检测手段。【方法】采用农杆菌介导的遗传转化方法对苦瓜枯萎病原菌强致病性野生型菌株FJAT-3018进行绿色荧光蛋白基因(gfp)标记,通过对转化子的菌落形态观察、生长速率和致病性测定,筛选出遗传稳定的转化子。【结果】野生型菌株FJAT-3018的转化效率约为14.5个转化子/10^6个孢子。经10次继代培养,筛选获得的转化子在菌落形态、生长速率和致病性方面与野生型菌株FJAT-3018无明显差异,gfp基因在转化子的菌丝体和分生孢子中均能强表达;通过激光共聚焦显微镜扫描跟踪发现,转化子能够在苦瓜植株根部和茎部侵染与定殖。【结论】绿色荧光蛋白基因已成功转入到苦瓜野生型菌株FJAT-3018中,其转化子具有良好的遗传稳定性且致病力不受影响。 | 陈燕萍 刘欣 肖荣凤 朱育菁 林永胜 刘波 | 2020 | 福建农业学报2020，35，11： | 1 |
| 8 | 亚细亚镰孢菌产碱性蛋白酶与致病力的相关性显示文摘选择了6个不同致病力的亚细亚镰孢菌菌株,提取纯化碱性蛋白酶,利用蛋白酶活性电泳的方法对其进行特性分析,研究其致病力与其产碱性蛋白酶的相互关系。亚细亚镰孢菌产生的碱性蛋白酶最适反应温度为30-40℃,最适反应pH值为7.5-8.5,属于丝氨酸蛋白酶类型。菌株致病力强弱与其产碱性蛋白酶活性呈极显著正相关。亚细亚镰孢菌产生的碱性蛋白酶可能与真菌的致病力有关。 | 张旭 马鸿翔 温云平 余桂红 陆维忠 | 2010 | 江苏农业学报2010，26，6： | 0 |
| 9 | Jellyfish Green Fluorescent Protein(GFP) as a Reporter for Fusarium gramminearum Development on Wheat显示文摘The p lasmid pGPDGFP under the control of pgpd A promotor was used together with vector pAN7-1 containing the hygromycin resistance cassette to co-transform protoplasts of HG1, Fusarium graminearum from Hubei Province, China. Twelve out of 14 hygromycin-resistant transformants showed green signal under the UV light and contained one or several copies of gfp, as indicated by Southern analysis of genomic DNA digested with different restriction enzymes and hybridized to the gfp probe. A single gfp copy transformant(HG1C5) was selected for further evaluation of 80 Chinese wheat cultivars or advanced lines. The results showed different resistance type to F. graminearum were observed. GFP signals observed in the rachis and adjacent spikes of 70 Chinese wheat lines such as Chuanchongzu 104 indicated both type I(host resistance to the initial infection by the fungus) and type II(resistance to the spread of FHB symptoms within an infected spike) were not observed. While other 10 lines showed type II resistance to F. gr aminearum with GFP signals only in inoculated spikelets. Development of the mycelium can be intuitively observed and the resistance of wheat to F. graminearum can be identified at 7 days post inoculation(dpi) in this way. The results showed no differences were evaluated between the transformed HG1C5 and the non-transgene artificial inoculation by SAS paired chi-square test and McNem ar's test(P=0.0625). | QI Jun-xian LIU Tai-guo XU Ying CHEN Huai-gu GAO Li LIU Bo CHEN Wan-quan | 2014 | Journal of Integrative Agriculture2014，13，10： | 0 |
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