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| 1 | BMP-2和FGF-2对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响显示文摘目的:观察骨形成蛋白(BMP-2)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响。方法:取3-18月雄性C57BL/6J小鼠(共50只)的骨髓细胞,分离贴壁培养后,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为MSCs后,再进行贴壁培养24h后,分别在成骨细胞诱导培养液中加入100μg/LBMP-2和0.5nmol/LFGF-2持续诱导7、14、21d后,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测,Vonkossa染色以及茜素红染色,并用递转录荧光定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因(Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin)的表达情况。结果:BMP-2刺激组的ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx2/cbfa1,ALP,collage-1,osteocalcin的mRNA呈高表达;FGF-2刺激组的ALP活性以及钙化结节也高于对照组,Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin的mRNA表达量也高于对照组,但不如BMP-2明显。结论:BMP-2和FGF-2在不同程度上促进体外培养的小鼠MSCs向成骨细胞方向分化。 | 张为西 陈松林 姚晓黎 卢锡林 周琛 冷雁 Xingming Shi | 2008 | 细胞与分子免疫学杂志2008，24，11： | 25 |
| 2 | BMP-2和p38MAPK在小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用显示文摘目的观察骨成型蛋白(BMP)-2和p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离和扩增小鼠BMSC,分为对照组、BMP-2组及阻断剂组,其中BMP-2组加入BMP-2,阻断剂组加入SB203580(p38MAPK通路阻断剂)和BMP-2。测定碱性磷酸酶(ALP)活性、钙沉积量、p38MAPK表达。结果与对照组相比,BMP-2组BMSC中ALP活性和钙沉积量增加(P<0.01),p38MAPK表达较早出现。阻断剂组p38MAPK表达明显延迟,与对照组相似。结论 BMP-2可通过p38MAPK通路促进BMSC向成骨细胞分化。 | 孙欣 曾荣 郭伟韬 肖启贤 王斌 黄云 林颢 | 2012 | 广东医学院学报2012，30，1： | 8 |
| 3 | 增强型绿色荧光蛋白基因转染小鼠骨髓间充质干细胞的研究显示文摘目的:以重组腺病毒(Ad)为载体,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染至小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)中,为MSCs体内示踪提供实验基础。方法:用全骨髓细胞贴壁法分离纯化小鼠MSCs并体外扩增、鉴定,以重组绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-EGFP)转染,并用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染率,CCK-8法检测转染细胞的增殖活性。结果:转染后10h MSCs开始表达荧光,6~8天达高峰,转染率可达92.3%,28天仍有表达;转染细胞的增殖活性和未转染细胞无统计学差异。结论:Ad-EGFP能高效、安全的转染mMSCs。 | 宁昌 胡锴勋 余长林 | 2011 | 中国美容医学2011，20，2： | 5 |
| 4 | 胎儿骨髓间充质干细胞生物学特性的研究显示文摘目的:分离培养胎儿骨髓间充质干细胞(fetus mesenchymal stem cells,fMSCs),分析其基本的生物学特征,如形态特征、增殖特性、细胞表型和多向分化潜能以及核型分析等,为其临床应用提供理论依据。方法:淋巴细胞分离液分离胎儿骨髓MSCs,在相同条件下分别考察各代细胞形态、生长、表面标记的变化情况,并进行不同生长时期的核型分析、细胞周期检测等。结果:在扩增过程中,MSCs的增殖能力随着代数增加而降低。在扩增至第3代时,MSCs表现出较高的纯度,表达CD29、CD44、CD105、CD166,不表达CD34、CD45。10代之前核型未发生变异,仍具成骨成脂分化能力,细胞周期分析显示其仍具有干细胞特性。结论:在体外培养条件下,10代以前的细胞生长性状稳定,可作为组织工程等临床应用的良好对象。 | 许茹 夏文杰 叶欣 项鹏 付涌水 罗广平 | 2009 | 实用医学杂志2009，25，12： | 4 |
| 5 | 角化细胞生长因子对骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肺泡上皮细胞的实验研究显示文摘目的观察角化细胞生长因子(KGF)对体外小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向肺泡上皮细胞诱导分化的影响。方法建立体外非接触共培养诱导小鼠MSCs向肺泡上皮细胞分化的实验模型,并在培养液中加入KGF(10μl/ml),小鼠分4组(6只/组),实验组A:MSCs(1×105)单独培养组+KGF;实验组B:MSCs+正常肺组织悬液(1×105)+KGF;实验组C:MSCs+损伤肺组织悬液+KGF;实验组D:MSCs+损伤肺组织悬液(1×105)。共同培养8 d,应用激光共聚焦显微镜和RT-PCR检测共培养体系下室MSCs中的SP-C和AQP5的表达情况。结果实验组C于共培养的d 8,较其它实验组的AQP5 mRNA的表达量明显增多(5550.00±244.39vs1650.17±184.02,1600.83±193.00,2890.00±179.09,P均<0.05);于共培养的d 5,与实验组A相比差异也有统计学意义(1743.17±228.41vs1482.00±156.11,P<0.05)。只有实验组C和D表达SP-C,且实验组C各培养时间点的SP-C的mRNA的表达量均较实验组D明显增多(2632.50±231.11vs1599.00±158.95;3976.67±221.81vs2066.83±101.31;5388.33±347.96vs3893.17±178.61,P均<0.01)。结论KGF可以进一步促进体外小鼠MSCs诱导分化为肺泡上皮细胞。 | 王艳 杨志军 封志纯 | 2009 | 中国输血杂志2009，22，8： | 3 |
| 6 | mdx小鼠与C57小鼠骨髓基质细胞体外分化能力的比较显示文摘背景:肌营养不良症是一种渐进性致死性X连锁隐性遗传性肌肉疾病,目前无特效治疗。肌营养不良症模型鼠(mdx小鼠)的骨髓基质细胞增殖及定向分化能力是否正常,自身骨髓移植是否合适还有待研究。目的:观察mdx小鼠骨髓基质细胞体外培养时的增殖及多向分化能力。方法:取mdx小鼠与C57小鼠胫股骨骨髓基质细胞体外培养,经吉姆萨染色后观察其形成成纤维细胞集落形成单位的能力;通过不同诱导液使骨髓基质细胞定向分化为成骨、成脂、成肌细胞,观察其形态学特性;并分别用Vonkossa染色、油红O染色、免疫荧光检测desmin阳性细胞对已分化细胞进行鉴定和分化率比较;培养1周时,提取分化细胞总RNA,反转录后,用real-time PCR检测各分化细胞相关基因表达。结果与结论:mdx小鼠骨髓基质细胞形成的成纤维细胞集落形成单位数目和体积均小于C57小鼠。其成骨、成肌分化的效率均明显低于C57小鼠(P<0.01),两种小鼠的骨髓基质细胞成脂分化效率差异无显著性(P>0.05)。real-time PCR检测结果显示,与C57小鼠相比,mdx小鼠的骨髓基质细胞成骨、成肌基因表达均有不同程度下降,而成脂基因表达无明显差异。结果提示,mdx小鼠的骨髓基质细胞体外培养时的增殖及定向分化能力较C57小鼠下降,与Dystrophin基因缺失有关,mdx小鼠自体骨髓移植将会受限。 | 冷雁 张为西 周琛 郑振扬 张成 | 2010 | 中国组织工程研究与临床康复2010，14，36： | 2 |
| 7 | mdx小鼠骨骼肌组织成肌、成脂、成骨基因的特异性表达显示文摘背景:干细胞移植是治疗肌营养不良症的有效方法之一,但移植的干细胞在病理骨骼肌中成肌表达较低。目的:通过比较mdx小鼠和C57小鼠的骨骼肌形态及成肌、成脂、成骨基因表达的差异,探讨mdx小鼠骨骼肌病理改变的可能机制。方法:取mdx小鼠与C57小鼠的骨骼肌组织行冰冻切片,苏木精-伊红染色和Vonkossa染色观察两种小鼠肌肉组织的形态特征;提取mdx小鼠和C57小鼠骨骼肌组织总RNA,real-timePCR检测成肌、成脂、成骨相关基因的表达。结果与结论:mdx小鼠骨骼肌有肌纤维坏死和再生,伴有轻度脂肪、纤维结缔组织增生,Vonkossa染色可见钙结节沉积,而C57小鼠的骨骼肌细胞形态清晰,核位于细胞周边。与C57小鼠比较,mdx小鼠肌肉组织成骨、成脂基因表达有不同程度的上调(P<0.05),而成肌基因表达下调(P<0.05)。dystrophin基因缺失及成肌基因表达下调、成骨和成脂基因上调是造成mdx小鼠肌肉组织变性坏死的原因。 | 冷雁 张为西 周琛 郑振扬 张成 李秋玲 | 2011 | 中国组织工程研究与临床康复2011，15，33： | 0 |
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