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| 1 | Survivin基因的shRNA干扰对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响显示文摘目的:以携带shRNA片段的腺病毒为载体,对结肠癌细胞SW480中Survivin基因的表达进行干扰,研究其对肿瘤细胞中Survivin基因沉默效果及对细胞周期、凋亡和增殖的影响。方法:将构建好的携带Survivin-shRNA片段腺病毒,体外转染结肠癌细胞株SW480。以EGFP为报告基因,采用流式细胞计数测定不同感染复数(MOI)下的转染效率,选取适当病毒浓度进行下一步实验。通过RT-PCR和Western blot检测基因沉默后结肠癌细胞内Survivin mRNA和蛋白的表达水平;在Annexin V—FITC和PI染色后通过流式细胞术检测并分析Survivin基因沉默后细胞周期和凋亡的变化;同时采用噻唑蓝(MTT)法、克隆增殖实验对细胞不同时期增殖活性进行观察,明确对细胞增殖的抑制时效性。结果:腺病毒转染后MOI值在0~50时,剂量与转染效率成正比,确定最佳MOI值为50并进行后续实验;shRNA干扰后细胞内Survivin mRNA和蛋白表达水平降低,较对照细胞组差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示基因沉默后细胞凋亡率升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。同时基因沉默后,细胞周期也有明显变化,表现为G_1/S期细胞增多和G_2/M期细胞减少,与对照细胞组相比差异有统计学意义(P<0.05)。MTT和单克隆平板实验均显示Survivin基因的沉默,对细胞的增殖和生长均具有明显抑制作用(P<0.05)。结论:采用腺病毒对结肠癌进行靶向Survivin基因的shRNA干扰,能有效降低目的基因的表达。其介导的Survivin基因的沉默,可以有效的诱导结肠癌细胞凋亡,同时Survivin基因可以通过抑制细胞G_1/S期转化来阻止细胞分裂,抑制细胞生长。 | 王学虎 傅仲学 赵渝 谌伟 吴星烨 王春毅 | 2010 | 中国肿瘤临床2010，37，9： | 6 |
| 2 | 减毒沙门菌载体在肿瘤基因治疗中的研究进展显示文摘目前基因治疗发展迅速,肿瘤基因治疗方法已经逐步从实验及基础研究过渡到临床试用阶段,理论和技术层次上日趋成熟。然而基因治疗还没达到完全安全、高效、准确的目标,其中基因治疗的载体是最受关注问题之一。合适的载体应具备最大的有效性和最小的毒性,传统生物类载体主要是病毒载体和非病毒载体。目前低毒或无毒的且具有靶向性感染特点的细菌载体在肿瘤基因治疗得到证实,充分说明了细菌载体开辟抗肿瘤治疗的新途径。 | 贾庆华 惠玲 | 2014 | 解放军医药杂志2014，26，10： | 2 |
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