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| 1 | 基因芯片技术在病原细菌检测中的应用显示文摘基因芯片技术具有快速、高通量、平行化等优点,在病原细菌检测中有广泛的应用前景,选择细菌适宜的靶基因是芯片制备的关键之一。用细菌核糖体基因做靶基因的芯片技术,虽然应用广泛,但仍存在一些不足,随着基因组信息及基因功能的深入研究,包括毒力基因、耐药基因等具有较好种属特异性的细菌基因不断被发现,为芯片技术检测病原细菌提供了更多特异的靶基因,使检测结果更加灵敏、准确,在病原细菌研究中将发挥更大的作用。 | 高兴 王景林 | 2010 | 中国生物工程杂志2010,30,2: | 16 |
| 2 | 生物芯片在病原体检测中的研究进展显示文摘生物芯片作为一种高通量的基因检测技术,在多个研究领域已广泛应用,本文介绍了生物芯片技术的基本原理,综述了其在病原体检测中的研究进展。 | 林琳 马雅军 | 2011 | 中国病原生物学杂志2011,6,3: | 2 |
| 3 | 应用液相芯片技术检测拉米夫定耐药相关性HBV变异显示文摘目的建立一种检测拉米夫定(LAM)耐药相关性HBV变异的检测系统。方法从血清样本中提取病毒DNA,经纯化后,与生物素标记的引物经过PCR扩增后,来自HBV开放阅读框架的、被生物素标记的DNA扩增产物与偶联在微球上的特异性寡核苷酸探针杂交,未能结合微球的DNA被洗脱,加入标记有链亲素修饰的藻红蛋白(SAPE),在Luminex分析仪上,用双色激光分别激发微球的红色荧光(定性)和SAPE的绿色荧光(定量),从而判断靶基因的突变类型和相对含量。采用液相芯片(muhi-analyte suspension array,MASA)技术构建有LAM相关耐药的HBV全基因质粒和25例LAM耐药的慢性乙型肝炎患者(CHB)的HBV逆转录区(RT)第180和204位氨基酸的变异情况;并与普通测序法相比较,以了解该方法的特异性;同时将变异株和野毒株按不同比例混合后检测,以了解该方法的敏感性。结果MASA可同时检测a180和n204氨基酸变异,并能准确判断变异的类型及混合变异;MASA对25例LAM耐药的CHB患者相关耐药,检测发现有15份患者标本中20411探针杂交信号明显升高(测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为5和106),有11份样本与204V探针杂交信号较高(测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为9和114)差异有统计学意义(z=-4.588,P〈0.05;z=-4.520,P〈0.05);有2份发现2种探针杂交信号均很高,即有YIDD和YVDD混合变异株存在;仅有1份标本与20412探针杂交信号明显较高。同样用该方法检测20份未治疗患者的血清标本,均未发现LAM相关性变异。当病毒群中含有大于5%的LAM耐药相关HBV变异株时,即可被本方法检测到。结论MASA可用于LAM相关耐药变异株的早期检测。该方法较普通测序法灵敏,且操作简便、高通量、需要时间短,便于临床大样本检测的应用。 | 刘红艳 毛日成 李义良 夏佳慧 范丽丽 尹永喜 李新艳 赵旭 郭红英 朱浩翔 张继明 | 2009 | 中华检验医学杂志2009,32,9: | 1 |
| 4 | 多功能悬浮点阵技术快速检测肠道致病菌的初步应用研究显示文摘目的建立以多功能悬浮点阵技术为基础的临床常见肠道致病菌的快速检测方法。方法以细菌16S rDNA基因保守区序列设计1对通用引物,采用不对称PCR扩增7种临床常见肠道致病菌标准菌株,多功能悬浮点阵技术对不同菌株的PCR产物进行检测以验证相应菌种探针的特异性,最后对48份粪便标本进行肠道致病菌高通量快速检测。结果 7种临床常见肠道致病标准菌株的不对称PCR得到了大量单链产物,其产物用多功能悬浮点阵技术的检测特异性为100%,48份粪便标本不对称PCR产物可与相应探针发生特异性结合,且在多功能悬浮点阵技术的相应检测信号大于阴性对照3倍以上,5种细菌的多功能悬浮点阵技术检测结果与培养鉴定结果符合率100%,48份标本PCR产物均与志贺菌属探针发生杂交反应(阳性率100%)。结论 16S rDNA可以作为细菌快速鉴定的靶序列,不对称PCR产物可以显著提高与悬浮芯片杂交检测的灵敏度,多功能悬浮点阵技术在鉴定细菌方面具有简单快速、高通量、高检出率等特点,可以作为细菌快速鉴定的一种新方法,但无法鉴别志贺菌属和大肠埃希菌属。 | 余道军 陈岳明 方翔 吴盛海 张卫英 | 2010 | 中国微生态学杂志2010,22,8: | 0 |
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