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| 1 | 红豆草ISSR体系优化及其在航天诱变种质鉴定中的应用显示文摘采用正交设计法优化适合于红豆草(Onobrychis viciaefolia)的ISSR体系,对影响ISSR-PCR的多个因素,包括dNTP、引物浓度、Taq酶浓度、Mg2+浓度进行了4因素3水平的比较、优化,建立了红豆草的IS-SR最佳反应体系。运用该体系进行引物及最佳退火温度的筛选,并应用ISSR分子标记技术初步分析红豆草航天搭载诱变效应。结果表明,红豆草ISSR-PCR最佳反应体系为:2.5μL 10×PCR buffer、50 ng模板DNA、dNTP 0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、引物0.4μmol/L、Mg2+2.0 mmol/L,总体积为25μL。试验从53个ISSR引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的12个引物,并依次筛选出各引物的退火温度。12个引物标记结果显示共获得多态性位点142个,多态性比率为73.6%。地面对照的多态位点比率(P)、Nei基因多样度(h)和Shannon多样性指数(I)均低于航天诱变种,太空环境能够诱导红豆草发生基因变异。航天诱变可作为红豆草种质资源创新和品种选育的方法之一。 | 沈紫微 陈本建 康俊梅 魏小兰 张蕴薇 | 2010 | 草业科学2010,27,12: | 14 |
| 2 | 野生毛木耳ISSR-PCR反应体系的建立与优化显示文摘为获得条带清晰,重复性好,多态性高的野生毛木耳ISSR扩增结果,通过单因子试验对ISSR-PCR反应条件进行了优化。确定了ISSR分析的最佳PCR条件:25μL反应体系中模板DNA25ng、dNTPs0.24mmol/L、Taq DNA聚合酶1U、Mg2+0.9mmol/L、引物2μmol/L、10×PCR buffer2.5μL、ddH2O12.6μL。最佳退火温度因不同的引物而定,最佳循环次数为35次。在此基础上初步筛选出25条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。这一优化体系的建立为进一步利用ISSR标记技术进行野生毛木耳种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个适合的程序。 | 杜萍 崔宝凯 戴玉成 | 2010 | 生物技术通报2010,26,6: | 12 |
| 3 | ISSR、RAPD和SRAP分子标记技术在姬松茸菌株鉴定上的应用比较显示文摘利用ISSR、RAPD和SRAP3种分子标记法对16株姬松茸菌株进行比较分析。结果表明其中8条RAPD、4条ISSR和2对SRAP引物适合姬松茸菌株鉴定分析,3种标记方法均将16个菌株分为3大类群,A0011+1和A0013为1类,A0009单独为1类,其余菌株为1类。3种分子标记法对姬松茸菌株鉴别的结果存在着一定差别。SRAP反应的遗传信息较丰富,比ISSR、RAPD检测到更大的遗传差异;RAPD引物扩增到的多态性条带数较多。 | 林戎斌 张慧 林陈强 郑力 陈济琛 | 2012 | 福建农业学报2012,27,2: | 8 |
| 4 | 姬松茸种质资源多样性SRAP分析显示文摘对从国内收集的16个姬松茸菌株的基因组DNA进行SRAP分析,4对引物共获得31条明显的多态性扩增条带,其中多态性位点数为30,多态性位点百分比为96.77%;平均等位基因位点数为1.967 7,平均有效等位基因位点数为1.408 6,物种水平上Nei's基因多样度指数为0.246 8,Shannon遗传多样性指数为0.384 0。采用UPGMA方法进行聚类分析,结果显示不同姬松茸菌株间的遗传背景呈现一定的差异性,产地差异性大,种内差异性小;在相似系数约为0.7的水平上,16个菌株可以分为4大类。SRAP分子标记适合姬松茸的DNA遗传多样性分析,可以作为姬松茸菌种鉴定的依据之一。 | 林戎斌 张慧 陈济琛 林陈强 林新坚 | 2012 | 热带作物学报2012,33,3: | 6 |
| 5 | 离子束选育姬松茸新菌株的鉴定显示文摘利用同工酶I、SSR分子标记技术等方法对3个离子束选育获得的姬松茸菌株(AbML2,AbML7和AbML11)和一株孢子分离株(AbMD3)与出发菌株进行鉴定。结果表明:AbML11、AbML7在酯酶同工酶、多酚氧化酶谱带数量上与AbM9有较大的差别,有特征带出现;ISSR聚类分析看出,在相似系数大约为0.64水平上,可将供试菌株分为两大类,AbML2、AbMD3、AbML7、AbM9归为一类,菌株AbML11单独聚为一类。 | 张慧 江秀红 林新坚 陈济琛 林戎斌 郑永标 | 2010 | 食用菌学报2010,17,3: | 5 |
| 6 | 姬松茸种质资源的遗传多样性研究显示文摘为分析不同地区来源的姬松茸菌株亲缘关系,为姬松茸资源保藏与利用提供理论支撑,利用RAPD、ISSR和酯酶同工酶(EST)技术对收集的11个姬松茸菌株进行遗传多样性分析,并通过UPMGA亲缘关系树状图对其进行聚类分析。结果表明,10条RAPD引物共扩增出110条DNA片段,多态性比例为76.9%;12条ISSR引物共扩增出122条DNA片段,多态性比例为70%。通过UPGMA聚类分析发现,11个姬松茸菌株具有较高的遗传多样性。3种标记技术联合分析法将11个姬松茸菌株划分为3大类,姬松茸51119和姬松茸51242为一类,姬松茸51392为一类,其余菌株为一类,其中姬松茸51119与姬松茸51242均来自福建,姬松茸51392来自四川。该结果为今后姬松茸的遗传多样性研究以及优良品种选育提供了理论依据。 | 万诚 李蕾嘉 熊雪 罗文敏 王莹 | 2021 | 中国食用菌2021,40,9: | 3 |
| 7 | 紫丁香蘑ISSR-PCR反应体系的正交优化与建立显示文摘目的:为了获得紫丁香蘑的最佳ISSR-PCR反应体系。方法:采用正交实验方法 L16(45),对PCR反应的5个重要因素,TaqDNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTP以及引物的浓度在4个水平进行优化。结果:得到最佳的反应体系(25μL),包括1.5U TaqDNA聚合酶、2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTP、0.15μmol/L引物、160 ng模板DNA,最佳反应循环数为37。通过极差分析,对紫丁香蘑ISSR-PCR反应的影响程度从大到小依次为:TaqDNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+、引物。使用该优化体系从23个ISSR引物中筛选出6个引物使不同地区的紫丁香蘑具有多态性。结论:研究结果为进一步采用ISSR分子标记方法研究紫丁香蘑的遗传多样性提供了研究基础。 | 李萌伟 李芳菲 樊志宏 于晓丹 吕淑霞 马镝 | 2013 | 生物技术2013,23,6: | 3 |