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1梭梭中HaDREB2A的克隆与表达分析显示文摘脱水响应元件结合蛋白(DREB)转录因子在应激反应相关基因的调控中起重要作用。本研究利用RT-PCR方法从梭梭组织中获得Ha DREB2A基因开放阅读框(ORF)全长(Gen Bank登录号为:KP765243)。生物信息学分析表明,该基因ORF长1 083 bp,编码360个氨基酸,蛋白的分子量为40.5 k D,理论等电点(p I)为5.07,该蛋白在90(K)~143(R)区域含有一个典型的AP2保守结构域。通过物种间系统发育树可以看出Ha DREB2A与Sb DREB2A进化关系最接近,二者属于同一进化分支。半定量RT-PCR表达模式分析显示,该基因在梭梭同化枝、根、茎、花和种子中均有表达,且在同化枝中的表达量最高,并且受干旱、高盐和外源ABA的诱导。刘超 马丽 李月 代培红 姚正培 张桦 2015基因组学与应用生物学2015,34,9:12
2慢病毒介导的RNA干扰沉默MLF1IP基在胆管癌RBE细胞中的表达显示文摘目的 :应用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默胆管癌RBE细胞中人髓细胞白血病因子1相互作用蛋白(MLF1IP)基因的表达,探讨其对胆管癌细胞体外增殖的影响。方法 :设计合成针对MLF1IP靶基因序列的siRNA序列,进行重组慢病毒包装。与不含有MLF1IP基因si RNA序列的慢病毒分别转染胆管癌RBE细胞株。Real-time PCR检测MLF1IP基因的mRNA表达,MTT法检测细胞的增殖能力。结果 :成功构建了MLF1IP-sh RNA慢病毒质粒并进行慢病毒包装,Real-time PCR显示实验组MLF1IP基因的mRNA相对表达量为0.15±0.02明显高于对照组为1.01±0.12。MTT法检测实验组细胞的OD值对比对照组显著降低。结论 :慢病毒介导的RNA干扰技术能有效沉默RBE细胞中MLF1IP基因的表达,并能明显抑制胆管癌细胞RBE的体外增殖能力。曾欣欣 毛先海 吴一飞 段小辉 彭宇明 秦艳 2016湖南师范大学学报(医学版)2016,13,2:2
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