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| 1 | 维生素C联合内皮素-1促进胚胎干细胞向心肌细胞分化及机制显示文摘目的:探讨维生素(Vit)-C联合内皮素(ET)-1对胚胎干细胞(ESC)向心肌细胞分化的影响及其可能机制。方法体外培养 ESC并给予Vit-C,摸索Vit-C作用于ESC的最佳浓度和干预时间;然后给予ET-1(100 nmol/L)或Vit-C(100μmol/L)+ET-1(100 nmol/L),观察两组对拟胚体搏动、Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达的影响。同时,以RNA干扰方法沉默Nkx 2.5、GATA-4及 Shox2表达,观察沉默相应启动子表达水平后对Vit-C联合ET-1介导的拟胚体搏动增加的影响。结果 Vit-C最佳作用浓度为100μmol/L,最佳干预时间为分化的第4~9天,可使拟胚体搏动增加11.19%,同时上调拟胚体中心肌细胞标志物cTnT以及心肌发育启动子Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达。在Vit-C基础上进一步给予ET-1,可进一步使拟胚体搏动增加11.07%,同时进一步上调 cTnT、Nkx 2.5、GATA-4及 Shox2表达水平。沉默 Shox2基因表达使拟胚体搏动幅度减少最明显,达12.94%。结论 Vit-C联合ET-1可获得进一步纯化的心肌细胞,上调Shox2是其促进ESC分化的最重要机制。 | 林永青 梁颖 张海峰 刘文浩 杨莹 王景峰 | 2016 | 中国老年学杂志2016，36，17： | 2 |
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