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| 1 | 抑制环氧化酶-2表达后对人骨恶性肿瘤Bcl-2、LC3、Beclin1基因的表达研究显示文摘目的:通过构建小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)降低MG-63骨肉瘤细胞COX-2基因的表达,进一步研究其对MG-63骨肉瘤细胞凋亡和自噬的影响及可能的分子机制。方法:设计靶向COX-2基因的siRNA,通过脂质体体外转染MG-63骨肉瘤细胞,抑制其COX-2基因的表达,采用流式细胞仪(FCM)检测其对细胞凋亡的影响,采用实时荧光定量-PCR(real—time fluorogenie quantitative—PCR,RFQ—PCR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)法分别从基因和蛋白的水平检测MG-63骨肉瘤细胞凋亡及自噬相关因子Bcl-2、LC3、Beclin1的表达。结果:COX-2siRNA成功转染MG-63骨肉瘤细胞后,COX-2基因表达明显受到抑制,实验组与阴性对照组和空白对照组比较COX-2基因mRNA和蛋白表达降低约90%(PCOX〈0.05)。FCM检测实验组MG-63骨肉瘤细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P〈0.05)。实验组与阴性对照组和空白对照组比较,RFQ—PCR和蛋白免疫印迹检测结果显示,抗凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白表达下调(R0.05),自噬相关因子LC3mRNA、Beclin1 mRNA和Beclin1蛋白表达上调(P〈0.05)。阴性对照组和空白对照组比较无明显变化,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:沉默COX-2基因可以促进MG-63骨肉瘤细胞的凋亡和自噬,且二者之间存在-定的联系。 | 陈秀锦 杨团民 黄桂林 谈雯雯 | 2016 | 美中国际创伤杂志2016，15，2： | 0 |
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