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| 1 | 饥饿诱导胃癌细胞自噬发生及Beclin-1表达的变化显示文摘目的探讨饥饿诱导胃癌细胞MKN1自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1表达的变化。方法培养胃癌细胞MKN1至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS代替RPMI1640培养液培养细胞,培养12h后收集细胞,应用Western印迹和定量PCR(qRT-PCR)方法分别检测特异性标记自噬的微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)以及自噬相关蛋白Beclin-1的蛋白和mRNA表达。免疫荧光检测饥饿诱导后细胞自噬体的产生。结果饥饿处理12 h后,Western印迹和qRT-PCR检测LC3B和Beclin-1蛋白和mRNA表达与对照组比较均明显增加(P<0.05)。免疫荧光下可见点状自噬体。结论饥饿可以诱导胃癌细胞MKN1发生自噬,Beclin-1与饥饿诱导胃癌细胞MKN1的自噬相关,为进一步研究Beclin-1在胃癌细胞自噬中的作用机制奠定了基础。 | 沈薇 隋璐 赵慧 王丽媛 | 2015 | 中国老年学杂志2015,35,24: | 1 |
| 2 | 自体吞噬参与大鼠肝移植术后原发性肝功能障碍显示文摘目的应用大鼠原位肝脏移植模型,研究自体吞噬(自噬)如何参与缺血再灌注损伤后肝细胞死亡过程。方法在肝脏UW保存液中4°C保存24h后行大鼠同种原位肝脏移植;渥曼青霉素治疗组(WM-G)为UW保存液中添加渥曼青霉素(100 n M),对照组(UW-G)为UW治疗组:大鼠原位肝移植后观察受体生存率,分别于肝移植后15、30、60及120min检测血液血清谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT),肝脏标本行光学显微镜及透射电子显微镜组织形态学分析,免疫印迹方法进行自噬标记分子LC3定量。结果移植15min后,UW-G细胞质中含有大量吞噬小体和吞噬溶酶体的小团肝细胞自肝细胞索分离,分离的肝细胞堵塞肝窦内皮间隙从而引起移植2h后大面积的肝细胞坏死,坏死的肝细胞中包含非活化半胱氨酸天冬氨酸酶-3及非活化半胱氨酸天冬氨酸酶-7的调亡染色阳性核;自体吞噬标志性蛋白LC3-II的表达各组都逐渐增加,移植30min后达到高峰,WM-G可明显提高肝移植受体存活率,明显降低AST及ALT,WM-G移植15min后肝细胞中LC3-II的表达低于UW-G;超微结构显示移植15min后WM-G肝细胞中早期自体吞噬性液泡(AVi)、晚期自体吞噬性液泡(AVd)、自噬溶酶体/溶酶体(包括致密体)的比例明显低于UW-G(P<0.01)。结论自噬参与了肝脏冷缺血再灌注损伤过程,抑制自噬可降低肝移植术后冷缺血再灌注损伤。 | 卢震辉 余英姿 后藤邦人 门田守人 内山安男 于松宁 | 2015 | 宁夏医科大学学报2015,37,6: | 0 |
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