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| 1 | 核桃举肢蛾性信息素结合蛋白2的分子克隆和免疫荧光定位显示文摘【目的】明确核桃举肢蛾Atrijuglans hetaohei Yang性信息素结合蛋白2(Ahet PBP2)在核桃举肢蛾触角中的分布。【方法】本研究提取羽化后3-4 d的核桃举肢蛾成虫触角总RNA并反转录合成c DNA,设计简并引物进行RTPCR获得c DNA片段,然后利用RACE技术获得Ahet PBP2全长c DNA序列。将去除信号肽序列的Ahet PBP2进行原核表达,重组蛋白经镍柱纯化并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。制备的多克隆抗体作为一抗对核桃举肢蛾触角进行免疫组化分析。【结果】Ahet PBP2基因c DNA序列全长923 bp,开放阅读框504 bp,共编码167个氨基酸,分子量为19.26 k D,等电点为5.47。1 mmol/L IPTG诱导10 h获得可溶性重组蛋白,Western blot结果表明重组蛋白诱导表达成功,ELISA检测显示抗体效价为1∶1 024 000。免疫荧光定位结果显示核桃举肢蛾成虫触角部分感器被Ahet PBP2抗体标记。【结论】核桃举肢蛾成虫触角的部分感器中可能存在Ahet PBP2,推测该部分感器具有感受性信息素的功能。 | 李文海 黄兴龙 王敦 冯纪年 | 2015 | 昆虫学报2015，58，10： | 8 |
| 2 | 家蚕化学感受蛋白BmCSP16基因的克隆、表达和生物信息学分析显示文摘昆虫化学感受蛋白是昆虫体内在长期进化过程中形成的一类保守性强、低分子量的酸性可溶蛋白。本研究依据GenBank公布的BmCSP16基因的CDS区序列,运用反转录RT-PCR方法克隆BmCSP16基因,与表达载体pET-30b(+)连接,并在大肠杆菌BL21(DE3)中正确表达;运用生物信息学方法预测BmCSP16蛋白结构表明:有4个半胱氨酸,并形成2个二硫键,6个α螺旋折叠成近球状结构,具有昆虫化学感受蛋白的典型结构特征。 | 邓培渊 张云霞 袁洪哲 张曙光 | 2013 | 郑州师范教育2013，2，6： | 1 |
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