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| 1 | miR-200b通过靶向PROM1抑制胶质瘤细胞侵袭显示文摘目的探讨miR-200b靶向调控PROM1的表达对胶质瘤细胞侵袭能力的影响以及miR-200b抑瘤的分子机制。方法构建PROM13’端非翻译区(3’UTR)荧光素酶报告载体,荧光素酶报告检测miR-200b对PROMI3’UTR-荧光素酶活性的影响。将miR-200b模拟物转染胶质瘤U87细胞,采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测PROMlmRNA和蛋白的表达水平。将PROM1 siRNA转染U87细胞,Transwell侵袭实验检测PROM1下调对U87细胞侵袭能力的影响。结果双荧光素酶报告检测显示,miR.200b能特异性地与PROM13’UTR结合,抑制其荧光素酶活性,其荧光素酶活性强度下降了57.0%,差异有统计学意义(P〈0.01)。过表达miR-200b的U87细胞中PROM1蛋白和mRNA表达水平均降低,转染miR-200b组和对照组中PROMImRNA的表达水平分别为0.64±0.05和0.95±0.09,差异有统计学意义(P〈0.05)。siRNA干扰PROM1表达能抑制U87细胞的生长和侵袭能力。转染PROMIsiRNA组和对照组中穿膜细胞数分别为(85±9)个和(155±16)个,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论miR.200b可通过靶向调控PROM1的表达而抑制胶质瘤细胞的侵袭力。 | 彭彪 胡辅 秦明筠 罗冬冬 张训 赵海林 | 2015 | 中华肿瘤杂志2015，37，1： | 2 |
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