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| 1 | 人叶酸受体自身抗体IgG酶联免疫吸附试验检测方法的建立及评价显示文摘目的:建立血浆叶酸受体自身抗体免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA)检测方法,并对其进行评价。方法:从正常人的胎盘样品中提取叶酸受体蛋白并将其纯化,以纯化的人源叶酸受体蛋白为包被蛋白,以单克隆抗体为检测二抗,建立血浆叶酸受体自身抗体IgG的间接ELISA检测方法,评价其灵敏度、精密度及稳定性。随机选取24例血浆标本,同时以商品化的牛源叶酸结合蛋白与本方法中提取的人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白,采用ELISA方法分别检测血浆中叶酸受体抗体IgG的水平,比较两种方法的检测结果。结果:标准曲线可检测的IgG浓度范围为6.25×10-4~8.00×10-2(标准品采用健康人混合血浆,IgG浓度定为1),最低检测限为3.13×10-4,批内差异为2.74%~8.07%,批间差异为4.16%~8.23%。同一样本不同稀释倍数下IgG的检测结果均在可接受范围内,结果较稳定。血浆标本的牛源包被蛋白与人源包被蛋白检测方法对比结果显示两种方法高度相关,相关系数为0.954(P<0.001);人源包被蛋白检测结果比牛源包被蛋白高14%。结论:成功建立以人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白、针对血浆叶酸受体自身抗体IgG水平的ELISA检测方法,该方法检测灵敏,重复性好,可用于大样本量的人群检测。 | 王琳琳 杨娜 袁悦 任爱国 | 2014 | 北京大学学报(医学版)2014，46，3： | 6 |
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