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1抗人CA125单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光体系的建立显示文摘目的制备抗人糖抗原125(CA125)单克隆抗体(mAb),并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA125抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及纯化获得mAb,鉴定其特异性、纯度、亚型及效价,并建立双抗体夹心ELISA。分别对包被缓冲液、包被浓度和加样模式进行优化和选择后,建立化学发光免疫分析法检测体系,并对其进行评估和血样的测定。结果获得3株抗人CA125的杂交瘤细胞株(30—1—4、31—1-5、43—1-6),不与CA199、CA50、CA724交叉,效价在1:10。以上,用30-1.4和31—1—5建立的化学发光免疫分析法经优化后,检测范围为0~1000U/mL,最低检测限为0.72U/mL,与罗氏试剂检测结果的相关系数大于0.90。结论成功制备了抗人CA125mAb,建立并优化了人CA125的化学发光免疫分析法检测体系,为CA125检测及卵巢癌的诊断奠定了基础。冯玥 蓝兴国 张晓磊 李玉花 2014细胞与分子免疫学杂志2014,30,3:0
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