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| 1 | 用SILAC技术研究感染H5N1禽流感病毒后A549肺癌细胞蛋白质组的表达变化显示文摘目的:鉴定高致病性H5N1禽流感病毒感染A549肺癌细胞后,细胞蛋白质组的表达变化,并鉴定特异分子通路的改变及其涉及的关键蛋白质分子。方法:利用稳定同位素标记氨基酸技术(SILAC)标记A549细胞,得到'重标'或'轻标'的A549细胞;'重标'细胞感染高致病性H5N1禽流感病毒24 h后提取细胞总蛋白,与从未感染病毒的'轻标'细胞中提取的总蛋白等量混合,酶解肽段,经正交反相色谱分离后用质谱鉴定,对数据进行定性和定量分析。结果:共鉴定到3504个蛋白质,有定量信息的蛋白质为2469个,病毒感染后表达量升高的蛋白质为72个,表达量降低的蛋白质为66个,其中包括参与多个分子调控途径如RNA剪接体、干扰素诱导通路、泛素化通路、胰岛素通路等的蛋白质。结论:建立了利用SILAC技术研究宿主细胞-病毒相互作用的方法,发现了高致病性H5N1禽流感病毒感染宿主细胞相关的关键蛋白质,为探索H5N1病毒致病的分子机理提供了理论基础。 | 王继峰 李靖 康晓平 吴晓燕 钱小红 应万涛 杨银辉 | 2013 | 生物技术通讯2013，24，6： | 0 |
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