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| 1 | 肝癌Huh7干细胞样细胞的富集培养及鉴定显示文摘目的:建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌于细胞特征的细胞亚群的方法。方法:采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞(cancerstemcell,CSC)分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养,获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝癌干细胞球。流式细胞术检On,0Huh7干细胞样细胞表面肿瘤干细胞标志物EpCAM、CD90和CDl33的表达,平板克隆集落形成实验和裸鼠成瘤实验分别检测Huh7细胞和Huh7干细胞样细胞的克隆集落形成能力、体内成瘤能力。结果:Huh7细胞成球培养3~7d后即可形成肝癌干细胞样细胞球,获得的干细胞样细胞具有自我更新和增殖能力,其EpCAM阳性细胞比例较Huh7细胞明显增加[(99.6%±0.31)%猫(0.12%±O.05)%,P〈0.01],但两种细胞CD90[(0.11%±0.06)%US(0.09%±0.07)%,P〉0.05]和CDl33[(0.17%±0.08)%椰(0.15%±0.05)%,P〉0.05l表达差异无统计学意义。Huh7干细胞样细胞克隆集落形成数量明显多于Huh7细胞[(188.67±12.5)协(79±16.7)个,P〈0.01];当接种量为5X10^4个细胞时,与接种Huh7细胞的对照裸鼠相比,接种Huh'/干细胞样细胞的裸鼠成瘤时间更短(1I”s30d),成瘤率更高(100%郴16.67%);接种5×10’数量级的细胞时,实验组成瘤体积[(171.90±10.94)伽(86.39±11.21)mm^3P〈0.01]和瘤体质量[(2.984±0.82)vs(0.324±0.17)g,P〈0.01]均明显大于对照组。结论:利用成球培养法能够从Huh7肝癌细胞系中富集培养获得Huh7肝癌干细胞,其具有比Huh7细胞更强的成瘤能力。 | 张涛 李东 漆仲春 彭晶晶 陈滔 谭勇 周进军 许涛 付曾强 刘煜 李华 | 2013 | 中国肿瘤生物治疗杂志2013，20，6： | 2 |
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