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| 1 | BIGH3^(R555W)突变转基因小鼠模型的建立显示文摘目的建立BIGH3^(R555W)突变转基因角膜营养不良小鼠模型。方法构建以磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)为启动子的BIGH3(M)-IRES-EGFP重组质粒载体,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植入假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western印迹法检测BIGH3^(R555W)基因表达。结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎84枚,出生35只子代鼠,经PCR检测得到4只转基因阳性小鼠。RT-PCR和Western印迹法检测结果显示,BIGH3^(R555W)在转基因小鼠角膜表达量明显增多。结论通过显微注射法使外源基因BIGH3^(R555W)突变体在小鼠基因组中整合,成功建立了BIGH3^(R555W)突变转基因小鼠模型,该模型可为今后进一步研究角膜营养不良疾病的发病机制提供依据。 | 廖昕 王方 崔红平 | 2013 | 同济大学学报(医学版)2013，34，5： | 1 |
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