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		题名	作者	年代	出处	被引量
	1	人胱抑素C基因的克隆和原核表达显示文摘目的:研究人胱抑素C(Cycstatin C,Cys C)的原核重组表达及纯化。方法:通过RT-PCR扩增得到人Cys C的cDNA序列,并将其构建到pET-32a(+)的表达载体中。通过转化入BL21(DE3)表达宿主菌及表达条件的优化,摸索其最佳表达条件。通过镍柱纯化以及DEAE-sepharose FF离子交换层析的方法纯化得到重组的人Cys C蛋白。结果:通过RT-PCR扩增的方法得到的cDNA序列通过测序证明与预期一致。通过优化表达,Cys C的表达水平达到了160mg/L,约占总可溶蛋白的20%,表达产物通过两步纯化后获得了纯度为95%的重组Cys C。结论:成功构建Cys C原核表达系统和蛋白纯化系统,为下一步制备多克隆抗体以及开发Cys C的免疫诊断试剂奠定了基础。	周齐洋张小燕	2013	放射免疫学杂志2013，26，6：	1

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