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| 1 | 林麝IL-1β基因的克隆、表达及生物学活性检测显示文摘旨在克隆和表达林麝IL-1β,为其用于林麝疾病的防治奠定基础。从林麝外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增IL-1β(Interleukin-1β)基因。将IL-1β成熟肽编码序列连接到pET32a(+)原核表达载体进行表达,纯化目的蛋白并检测其生物学活性。序列分析表明,林麝IL-1β开放阅读框(ORF)长801bp,编码266个氨基酸,且在反刍动物中高度保守。IPTG诱导林麝IL-1β融合蛋白(MB-rIL-1β)表达,得到约35ku的目标带,且大部分以可溶形式存在。对上清蛋白分离纯化得到约35ku的单一条带。细胞增殖试验结果显示,林麝IL-1β融合蛋白能明显促进小鼠成纤维细胞(L929)增殖,表明其具有生物学活性。运用大肠杆菌表达系统可高效可溶性表达具有生物学活性的MB-rIL-1β融合蛋白。 | 邹丹丹 杨东 姜立春 邹方东 | 2013 | 畜牧兽医学报2013，44，11： | 1 |
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