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| 1 | 诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究显示文摘目的在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒(NorovirUSes,NoV)的衣壳蛋白VPl,并芎令证其与Caco-2细胞的结合活性。方法利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VPl蛋白表达,用蔗糖密度梯瞍超速离心方法纯化,采用Westernblot鉴定表达产物,采用流式细胞术检测NoV病毒样颗粒(Virus-likeparticles,VLPs)与Caco-2细胞的结合活性。结果重组质粒转染细胞表达产物经蔗糖密度梯度超速离心后进行SDS~PAGE,在分子质量单位55~70ku之间有3条蛋白带,与预期重组蛋白NoV—VI-Ps大小相符;Westernblot分析各蛋白组分均能被兔抗NoV多抗血清识别;流式细胞仪分析届示,加入重组蛋白NoV—VI—Ps后荧光信号较阴性对照组显著增强,表明表达的重组蛋自NoV—VI.Ps能够与Caco-2结合,且3个组分的结合能力不同(P〈i0·05),以组分5与Caco-2细胞结合的能力最强(P〈O.05)。结论NoVVI.Ps表达成功,并证明NoV-VI—Ps具有与Caco2细胞结合活性,为N。V疫苗的开发和防治药物的研制奠定了基础。 | 杨柏财 黑凯文 邱依然 李咏梅 | 2013 | 中国病原生物学杂志2013，8，10： | 2 |
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