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| 1 | 雌二醇诱导人成骨样细胞差异表达基因筛查显示文摘目的 快速筛查 17β雌二醇 (E2 )诱导人成骨肉瘤MG 6 3细胞株差异表达cDNA片段 ,寻找雌激素相关基因。方法 改良cDNA代表性差异分析法 (cDNARDA)分离E2 干预MG 6 3细胞株表达上调cDNA片段 ,Southern杂交证实后 ,制备阵列膜行点杂交 ,然后挑取阳性差异克隆测序 ,经同源比较分析 ,最后选取部分克隆标记探针行Northern印迹杂交。结果 经过 4轮消减和动力性富集后得到 5个E2 诱导人成骨肉瘤MG 6 3细胞表达上调的差异cDNA条带 ,Southern杂交证明这些表达上调的cDNA片段来自E2 干预的MG 6 3细胞 ;共得到 6 0 0余个含有阳性插入片段的cDNA克隆 ,点杂交筛查得到 12 0个差异表达克隆。选 2 0个克隆测序得到 15个序列 ,其中 1个经Northern杂交证实E2 干预后表达上调。结论 cDNARDA能有效筛查差异表达cDNA片段 ,联合cDNA阵列点杂交可快速筛查差异表达基因 ,E2 诱导人成骨肉瘤MG 6 3细胞某些基因表达上调。 | 彭依群 廖二元 邓小戈 | 2003 | 中华内科杂志2003，42，8： | 7 |
| 2 | SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列显示文摘目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理 ,研究了整体照射条件下 ,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠 7Gyγ射线照射后 4h提取骨髓总RNA为实验方 (tester) ,对照组动物骨髓总RNA为驱动方 (driver) ;实验方、驱动方总RNA由SMARTcDNA合成方法合成双链cDNA ,进而由抑制消减杂交 (SSH)方法获得消减杂交产物 ,消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库 ;对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取 80 0个克隆进行PCR扩增 ,阳性率约为86 % ;部分克隆经两轮杂交筛选获得 1 4个差异片段 ;7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似 ,其余 7个差异片段可能是新的EST序列。 | 饶亚岚 陈肖华 张军权 魏巍 董波 毛秉智 | 2003 | 中华放射医学与防护杂志2003，23，3： | 4 |
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