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| 1 | 西藏小型猪胰岛细胞体外分离和纯化方法显示文摘的确定成体西藏小型猪胰岛细胞体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛细胞。方法对比不同质量浓度的胶原酶(1mg/ml,2mg/ml,3mg/ml,4mg/m1)和同一质量浓度不同时间点(0min,15min,30min,45min,60min,75min,90min)分离获得胰岛细胞的数量和效果;使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心和静置4种方法纯化胰岛细胞悬液,比较最终收集到的胰岛细胞数量和效果;用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度;用AO/PI染色计算胰岛细胞存活率。结果确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛细胞的最佳时间,胶原酶lmg/ml和2mg/ml组为45min,3mg/ml和4mg/ml组为30min,各组在最佳时间点获得胰岛细胞的数量最多的为1mg/ml组,胰岛细胞形态完整;4种纯化方法中,收集的胰岛细胞数量由多到少依次为静置组〉Ficoll400密度梯度离心组〉离心组〉淋巴分离液离心组。经AO/PI染色后检测胰岛细胞的存活率为95.00%以上。结论在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度lmg/ml、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛细胞,Ficoll400密度梯度离心的纯化手段收集到的胰岛细胞效果最好。 | 戚文军 汪亦男 胡强 唐华 那顺巴雅尔 顾为望 | 2013 | 实验动物与比较医学2013，33，2： | 0 |
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