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1线性聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳的迁移特性显示文摘使用线性聚丙烯酰胺作为筛分介质,对片段长度为80~584bp的标准DNA样品进行毛细管电泳,利用激光诱导荧光方法检测信号,荧光染料为溴化乙啶。改变电场强度100~375V/cm,得到的迁移率曲线与电场强度和DNA片段长度成复杂的函数关系,已有的经典理论模型:Ogston模型、Reptation无拉伸模型和Reptation拉伸模型都不能正确地描述实验观察到的迁移率随电场强度和DNA片段长度的变化情况。因此,提出一种修正的Ogston筛分理论,假定迁移的DNA分子在电场强度方向延展拉伸,如同小分子穿过凝胶筛孔。在该修正模型中,DNA的迁移率仅依赖于电场强度、筛分介质浓度和片段长度,很好地解释了实验现象。汪洁 王立强 石岩 郑华 陆祖康 2008分析化学2008,36,3:5
2电场强度对线性丙烯酰胺毛细管电泳特性的影响显示文摘使用2种不同质量分数(4%和6%)的线性聚丙烯酰胺(Linear Polyacrylamide,LPA)作为筛分介质,对片段长度为80~584bp的标准DNA样品进行毛细管电泳.利用激光诱导荧光方法检测信号,荧光染料为溴化乙啶.改变电场强度从100~375V/cm,得到电泳电流、迁移率、信号强度、半峰宽以及分辨率的变化曲线.实验测得电场强度与电流有很好的线性关系,非线性度参数γ分别为0.99944和0.99876.迁移率曲线与电场强度、DNA片段长度成复杂的函数关系,DNA的迁移率依赖于电场强度、筛分介质质量分数和片段长度;电场强度对信号强度的影响较小,筛分介质的质量分数对区带展宽有影响,因此也影响了信号强度,使用4%LPA比6%LPA区带展宽小,信号强度高,更适合分离片段长度≤600bp的DNA样品.电场强度对分辨率的影响十分复杂,增大电场强度并不能提高分辨率,为了提高分辨率,优化分离电场强度为125V/cm,理论分析对实验起到了很好的指导作用.汪洁 王立强 石岩 郑华 陆祖康 2010华南师范大学学报(自然科学版)2010,42,1:0
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