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| 1 | 外源表达Nkx2.5诱导骨髓间充质干细胞向心肌分化显示文摘目的探讨转染外源性Nkx2.5基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的作用。方法全骨髓法分离大鼠BMSCs,经多次传代培养扩增纯化,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD90、CD45。脂质体法将pEGFP-N1-Nkx2.5质粒转染BMSCs,观察细胞形态变化;转染48h后,免疫细胞化学检测Nkx2.5的表达。转染4周后,Western blotting检测心肌肌钙蛋白(cTnT)的表达;免疫细胞化学检测cTnT、GATA4的表达,鉴定细胞分化。结果第3代生长良好的细胞中表达CD90而不表达CD45的占细胞总数的99%。转染48h后,实验组可见部分细胞表达绿色的Nkx2.5-pEGFP融合蛋白,免疫细胞化学结果表明,Nkx2.5蛋白只在实验组有表达(n=3)。转染4周后,Western blotting、免疫细胞化学结果表明,cTnT、GATA4表达在实验组显著高于pEGFP-N1空质粒转染组和空白对照组(n=3)。结论外源表达Nkx2.5基因能够增强BMSCs向心肌分化。 | 陈炜 张雷 孔祥增 张金平 赵昱 李航 李莉 赵春芳 | 2012 | 解剖学报2012，43，4： | 2 |
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